桂金柱
- 作品数：7 被引量：19H指数：2
- 供职机构：武汉生物制品研究所有限责任公司更多>>
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- 麻疹、腮腺炎二联减毒活疫苗的研制
- 麻疹是几世纪以来儿童最常见的急性呼吸道传染病之一,疫苗目前时代,隔年出现一次大的流行,发病率和死亡率都很高。二十世纪60年代开始计划免疫以来,发病率大幅度下降,但由于种种原因,仍存在一定的感染率,而且出现成人发病增多,流...
- 魏树源张信张波李萍萍方志正祁春华桂金柱曹涛钟绍基
- 文献传递
- 不同代次S191株麻疹病毒的基因序列分析
- 2008年
- 目的分析不同代次S191纯化株麻疹病毒(MV)的主要蛋白基因序列。方法将S191纯化株MV在原代鸡胚细胞(CEC)上连续传4代,观察每代病毒培养特性。选择其中的CEC28、30和31代病毒,测定主要蛋白N、M、F和H基因序列,并与GenBank中标准株S191(1994)和S191(2008)序列进行比对。结果S191纯化株病毒在CEC上连续传4代,其培养特性、致细胞病变效应(CPE)及病毒滴度均基本稳定。S191株病毒CEC各代与S191(1994)株比较,在15个核苷酸位点上有区别,其中N蛋白基因6个、M蛋白基因3个、H蛋白基因1个核苷酸的差异对其编码的氨基酸产生了影响;与S191(2008)株比较,在2个核苷酸位点上有区别,且均导致氨基酸的改变。各代之间主要蛋白基因未见突变。结论S191纯化株病毒在《中国药典》三部(2005版)规定的代次范围内比较稳定,在CEC30代内均可作为工作代毒种使用。
- 魏树源祁春华陈晓琦桂金柱王珍
- 关键词：麻疹病毒蛋白基因
- 三磷酸腺苷生物发光快速微生物检测法在疫苗中间品无菌试验中的应用被引量：13
- 2010年
- 目的探讨三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate,ATP)生物发光快速微生物检测法应用于疫苗中间品无菌试验的可行性。方法测定各种培养基与疫苗培养上清液(不含细胞碎片)的本底值,并确定阳性限值;确定测试仪的检测限及线性范围;考察非细菌来源的ATP对测定值的影响;筛选适宜培养基;比较ATP生物发光法与无菌试验检测结果的一致性。结果除199培养基外,其他培养基的RLU本底值均低于205,阳性限值为500;测试仪的最低检测限为10-15mol/L,在10-15～10-6mol/L范围内,线性关系良好;采用增菌法进行试验,可不考虑非细菌来源的ATP的影响;筛选出的适宜培养基为硫乙醇酸盐流体培养基(不含琼脂);ATP生物发光法和无菌试验检测结果的阳性符合率为80%,2种方法各有1个样品另一种方法未检出。结论 ATP生物发光法操作简便,应用范围广泛,可应用于疫苗中间品的无菌试验。
- 魏树源杨京生陈晓琦桂金柱刘瑛球王珍黄宙
- 关键词：三磷酸腺苷无菌试验荧光素
- 流行性腮腺炎病毒疫苗株WM84六代次基因序列分析被引量：2
- 2008年
- 目的分析6个代次流行性腮腺炎病毒疫苗株WM84融合蛋白(F)、血凝素神经氨酸酶蛋白(HN)和疏水蛋白(SH)的基因序列,并与Jery-Lynn(JL)株和ME株进行比较。方法WM84株病毒在原代鸡胚成纤维细胞(CEF)上连续传代至12代,观察各代病毒的培养特性,测定2、7、9、10、11、12代主要结构蛋白基因及高变区SH基因序列,与GenBank中参考毒株JL2、JL5和ME株进行比对,分析其核苷酸序列及相应氨基酸序列的差异,并构建系统进化树。结果WM84株病毒在CEF上连续传代至12代,其培养特性及病毒滴度基本稳定。与WM84株2代相比,其各代在主要蛋白基因区域有散在的核苷酸变化。7～12代病毒HN、F和SH基因与2代相比,核苷酸同源性分别为97.0%～100%、97.0%～100%及94.0%～100%;氨基酸同源性分别为98.3%～100%、97.2%～100%及94.1%～100%。2～7代病毒,HN、F和SH基因氨基酸与JL2株同源性为98.8%～99.5%,与JL5株同源性为94.1%～98.3%,传至11、12代,与JL5株同源性达99.8%～100%。结论WM84株2～7代病毒蛋白基因与JL2株十分相似,但在后续传代过程中出现了JL2株向JL5株转化的倾向。WM84株病毒在传代过程中HN及F基因结构基本稳定。
- 魏树源陈晓琦桂金柱祁春华王珍
- 关键词：流行性腮腺炎病毒疫苗株传代基因序列
- 麻疹腮腺炎乙型脑炎联合减毒活疫苗及其制备方法
- 一种麻疹腮腺炎乙型脑炎联合减毒活疫苗的制备方法，其步骤包括：(1)分别制备麻疹疫苗原液、腮腺炎疫苗原液和乙型脑炎疫苗原液；(2)将三种单价疫苗原液分别与疫苗保护剂明胶蔗糖和人血白蛋白混合，得麻疹、腮腺炎、乙型脑炎三种单价...
- 李萍萍贾丽丽杨晓明方志正董关木孙凌聪易玲桂金柱吕文利岳广智刘晓娜夏莉莉刘钢胡德祥胡志雄王志伟徐宏山刘欣玉
- 文献传递
- 麻疹、腮腺炎二联减毒活疫苗的研制
- 魏树源张信张波李萍萍方志正祁春华桂金柱曹涛钟绍基
- 课题研制生产的麻疹、腮腺炎二联减毒活疫苗，系采用麻疹和腮腺炎病毒减毒株（我所独有知识产权），分别接种SPF级原代鸡胚细胞，以多次试验摸索确定的最佳配比配制并加入稳定剂后，再采用先进工艺冻干制成。疫苗每次人用剂量为0.5m...
- 关键词：
- 关键词：腮腺炎
- 流行性腮腺炎病毒疫苗株WM84全基因序列测定及分析被引量：4
- 2015年
- 目的分析流行性腮腺炎病毒疫苗WM84株(以下简称WM84株)全基因序列,并与Jeryl Lynn(JL)株和腮腺炎病毒各基因型进行比对。方法 WM84株原始毒株于原代鸡胚成纤维细胞(chicken embryo fibroblast,CEF)上连续传代至7代,观察每代病毒的培养特性,测定第7代病毒全基因序列,用MEGA 4.1软件分析其核苷酸及氨基酸序列与JL株的差异,用MEGA 4.1软件的相邻连接方法(neighbor-joining,NJ)构建各基因型腮腺炎病毒的系统进化树。结果 WM84株原始病毒在CEF上连续传7代的各代病毒的培养特性基本稳定。WM84株与JL2及JL5株比较,核苷酸序列同源性分别为99.90%和97.17%。WM84株与JL2株比较,核衣壳蛋白(N)、磷酸化蛋白(P)、基质蛋白(M)、融合蛋白(F)、小疏水蛋白(SH)、血凝素-神经氨酸酶蛋白(HN)、大蛋白(L)核苷酸序列同源性分别为为99.94%、99.92%、99.91%、99.81%、98.84%、99.94%、100%;氨基酸序列的同源性分别为100%、100%、99.73%、99.44%、98.23%、100%、100%。WM84株与JL5株比较,N、P、M、F、SH、HN、L蛋白核苷酸序列同源性分别为97.59%、96.84%、97.93%、97.02%、94.01%、97.02%、97.63%;氨基酸序列的同源性分别为98.72%、94.27%、98.39%、97.36%、90.82%、97.57%、99.42%。WM84株与JL2、JL5株SH蛋白的第29位和第48位氨基酸位点上无差异。WM84、JL2和JL5株均为A基因型,WM84株与JL2株的遗传距离低于与JL5株的遗传距离。结论 WM84株CEF 7代病毒与JL2株的同源性较高,其致病性、中和活性相关位点均未发生改变,表明WM84株具有稳定的免疫原性,其制备的疫苗安全有效。
- 陈晓琦魏树源肖健桂金柱祁春华姚新欣朱凌毅宰家敏郭长福张曦
- 关键词：流行性腮腺炎病毒全基因序列
