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牙鲆(Paralichthys olivaceus)胚胎冷冻保存研究: 鱼类胚胎冷冻保存对鱼类种质资源保护、低温生物学、遗传育种和水产养殖业都具有重要的意义。牙鲆(Paralichthys olivaceus)是重要的经济鱼类，本文以牙鲆胚胎为材料，对玻璃化中所涉及到的主要影响因素：适宜胚胎...; 武鹏飞; 关键词：牙鲆胚胎冷冻保存玻璃化显微注射; 文献传递

半滑舌鳎雌核发育二倍体鱼苗的诱导和鉴定方法: 一种半滑舌鳎雌核发育二倍体鱼苗的诱导方法，包括：半滑舌鳎卵子人工雌核发育方法，雌核发育鱼苗的鉴定方法。本发明首次建立了采用半滑舌鳎精子和花鲈精子诱导半滑舌鳎卵子雌核发育获得雌核发育二倍体鱼苗的方法，筛选到适合半滑舌鳎卵雌...; 陈松林田永胜杨景峰刘海金翟介明邵长伟廖小林苏鹏志季相山徐建勇武鹏飞; 文献传递

三个牙鲆育种群体亲本效应及遗传参数估计被引量：18: 2009年; 针对牙鲆(Paralichthys olivaceus)养殖品种生长速度变慢、抗病力降低这一问题。近年来构建了牙鲆抗病群体(RS)、日本群体(JS)和黄海群体(YS)3个育种群体,开展牙鲆选择育种,建立了63个家系,收集了所有家系5 328尾鱼苗的体长和体重数据。借助线形混合模型(Linear mixedmodel)、"加性-显性"模型、约束极大似然法(REML)及最佳线性无偏预测(BLUP)分别估计亲本效应值、体重和体长遗传力和遗传相关、父母本效应和杂交效应。预测结果显示,其中父本130,141,146,170,218,229,303和308随机效应达到了极显著效应水平(P<0.01),父本112,122,141,190,212达到显著水平(P<0.05),所有母本体重随机效应达到了极显著水平(P<0.01);体长和体重两性状的加性、显性、表型和基因型相关分量都达到极显著水平(P<0.01),体长和体重的加性方差比率均大于显性方差比率,可见两性状的遗传效应主要取决于基因的加性效应。体长的总遗传效应率为31.20%,体重的总遗传效应率为33.58%,体长和体重的随机方差比率分别达到68.80%和66.41%,说明养殖环境等因素对牙鲆体长和体重的影响较大,同时说明在牙鲆选择育种中消除环境影响极为重要。体长和体重的狭义遗传率分别为0.199和0.256(P<0.01),广义遗传率分别为0.312和0.336(P<0.01),牙鲆在以上两性状上属于中等遗传力,通过选择育种可取得较大的遗传进展。对3个牙鲆育种群体杂交随机效应估计结果显示,抗病群体和黄海群体在体长和体重两性状上加性随机效应显著(P<0.05);抗病群体分别与日本群体、黄海群体杂交,其后代表现出显性随机效应达到0.10的水平(P<0.10),黄海群体自交、日本群体和黄海群体杂交随机效应不显著(P>0.05),因此在杂交组配中选择抗病群体与其他两个群体交配可取得较好的效果。; 田永胜徐田军陈松林邓寒王磊王磊季相山丁浩; 关键词：遗传力

利用显微注射技术冷冻保存牙鲆胚胎被引量：2: 2008年; 在鱼类胚胎的冷冻保存中,需要抗冻剂有效地渗入胚胎,才能对胚胎起到保护作用。本研究采用显微注射技术将抗冻剂直接注射到牙鲆（Paralichthys olivaceus）胚胎内,以实现牙鲆胚胎的玻璃化低温冷冻保存。研究中,首先对抗冻剂种类进行了选择,将抗冻剂的毒性由大到小依次排列为：乙二醇（EG）、甘油（Gly）、二甲基亚砜（DMSO）、甲醇（MeOH）、1,2丙二醇（PG）、PM21（PG∶MeOH=2∶1）;对胚胎发育时期和注射剂量进行了筛选。实验结果显示,注射600pL（1pL=10-6mL）抗冻剂PM21后,牙鲆的心跳期胚胎成活率显著高于尾芽期胚胎（P〈0.05）,成活率为（64.04±2.05）%;对卵黄囊、卵膜与卵黄膜间隙作为注射部位进行了选择,发现采用卵黄囊内注射的胚胎成活率高于＂五步平衡法＂,并显著高于通过卵黄膜间隙注射（P〈0.05）,其成活率为（44.24±7.88）%。结果表明,注射600pL35%PM21至牙鲆心跳期胚胎卵黄囊内,平衡10min,然后进行玻璃化冷冻保存,取得了68.2%~79.4%透明胚胎,能够对牙鲆胚胎提供很好的保护。说明显微注射方法可以成功地将抗冻剂注射入牙鲆胚胎,并在牙鲆胚胎的冷冻及胚胎的完整性方面发挥有效的保护作用。; 丁浩田永胜武鹏飞刘洋陈松林; 关键词：牙鲆胚胎显微注射玻璃化冷冻保存

显微注射抗冻剂对牙鲆(Paralichthys olivaceus)胚胎毒性及冷敏感性的影响被引量：4: 2009年; 在鱼类胚胎冷冻保存中,由于胚胎体积大、卵膜具多层结构,并且通透性差,传统的平衡法无法使抗冻剂足够、有效的进入胚胎内部起到保护作用。为弥补了普通平衡法的不足,此研究利用显微注射技术,将抗冻剂直接注射到鱼类胚胎卵黄囊内,提高了抗冻剂对胚胎的保护程度。此研究以牙鲆胚胎为试验材料,对显微注射抗冻剂种类、抗冻剂的注射剂量、注射浓度、以及抗冻剂注射后胚胎的冷敏感性影响进行了筛选。结果表明:牙鲆胚胎较适宜的显微注射剂量为750pl;几种抗冻剂注射牙鲆胚胎后的毒性大小相对排列为PVP>蔗糖,DMSO>MeOH>PG,其中注射PG获得的胚胎成活率和孵化率最高,注射PVP获得的胚胎成活率和孵化率最低,而PG与MeOH组成混合抗冻剂PM毒性更低获得的胚胎成活率和孵化率更高。而任何一种抗冻剂均随着浓度的增加其毒性随之增加;另外,在冷敏感试验中,显微注射6mol/L的PM的胚胎胚胎,应用程序化法处理,以2℃/min的速率由室温降至-20℃,平衡10min后解冻处理,发现注射PM的胚胎低温处理后成活率为(25.07±1.57)%,而6mol/的PM五步平衡法同步处理的对照组胚胎成活率为(20.88±2.84)%,说明显微注射的胚胎冷敏感性一定降低。; 武鹏飞丁浩田永胜陈松林; 关键词：显微注射

半滑舌鳎遗传性别及WW超雌鱼鉴定方法: 本发明提供了一种半滑舌鳎遗传性别及WW超雌鱼鉴定方法，可以解决半滑舌鳎性别控制和全雌育种研究中不能鉴定ZW雌鱼和WW超雌鱼的问题。所采用的技术方案是：一种半滑舌鳎遗传性别鉴定方法，包括如下步骤：1)半滑舌鳎血液样品的制备...; 陈松林季相山邵长伟田永胜王娜武鹏飞; 文献传递

半滑舌鳎遗传性别及WW超雌鱼鉴定方法: 本发明提供了一种半滑舌鳎遗传性别及WW超雌鱼鉴定方法，可以解决半滑舌鳎性别控制和全雌育种研究中不能鉴定ZW雌鱼和WW超雌鱼的问题。所采用的技术方案是：一种半滑舌鳎遗传性别鉴定方法，包括如下步骤：1)半滑舌鳎血液样品的制备...; 陈松林季相山邵长伟田永胜王娜武鹏飞; 文献传递

半滑舌鳎人工催产和雌核发育二倍体鱼苗的诱导方法: 一种半滑舌鳎人工催产和雌核发育二倍体鱼苗的诱导方法，包括：亲鱼人工催产、精子的遗传失活、雌核发育二倍体鱼苗的诱导及鉴定方法。本发明首次建立了半滑舌鳎人工催产获得批量化未受精卵的方法，首次建立了采用半滑舌鳎精子和花鲈精子诱...; 陈松林田永胜杨景峰翟介明邵长伟廖小林苏鹏志季相山徐建勇武鹏飞; 文献传递

紫外灭活的异源和同源精子诱导的半滑舌鳎单倍体胚胎发育过程比较被引量：7: 2009年; 为探讨在雌核发育研究中紫外灭活的异源精子的细胞质等是否对"受精"卵的发育产生影响,本文对紫外灭活的异源和同源精子诱导的半滑舌鳎单倍体胚胎发育过程进行了比较研究。结果显示,在胚盘形成期、二细胞期、多细胞期和囊胚期,异源和同源精子诱导的半滑舌鳎单倍体胚胎发育时序及形态无显著差异。之后,灭活的异源精子诱导的单倍体胚胎发育速度比同源精子诱导的单倍体胚胎要慢,至受精后18 h 48 min已慢1个发育时期,说明在发育前期,异源精子诱导的单倍体胚胎发育阻力更大。肌节期后,同源精子诱导的半滑舌鳎单倍体胚胎发育也严重受阻,与异源精子诱导的单倍体胚胎发育速度无显著差异;且单倍体胚胎陆续大量死亡,但异源精子诱导的单倍体胚胎死亡率明显要大于同源精子诱导的单倍体胚胎。异源和同源精子诱导的单倍体胚胎孵出的仔鱼均表现有单倍体综合症,外形基本一致。为确保紫外线处理将精子完全灭活,当紫外灭活的异源和同源精子诱导的半滑舌鳎单倍体胚胎发育至原肠后期时,各取30粒用倍性分析仪检测其倍性,结果显示全为单倍体。; 季相山陈松林武鹏飞田永胜姜运良; 关键词：半滑舌鳎单倍体胚胎发育倍性

半滑舌鳎雌核发育二倍体鱼苗的诱导方法: 一种半滑舌鳎雌核发育二倍体鱼苗的诱导方法，包括：半滑舌鳎卵子人工雌核发育方法，雌核发育鱼苗的鉴定方法。本发明首次建立了采用半滑舌鳎精子和花鲈精子诱导半滑舌鳎卵子雌核发育获得雌核发育二倍体鱼苗的方法，筛选到适合半滑舌鳎卵雌...; 陈松林田永胜杨景峰翟介明邵长伟廖小林苏鹏志季相山徐建勇武鹏飞

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武鹏飞

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