沈文 作品数:60 被引量:134 H指数:7 供职机构: 石河子大学动物科技学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中国科学院知识创新工程重要方向项目 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 理学 更多>>
绵羊ISG15重组蛋白及其编码基因和应用 本发明提供了绵羊ISG15的重组蛋白,应用该重组蛋白能在一定程度上治疗绵羊支原体肺炎,本发明还提供编码该重组蛋白的基因,其含有选自以下的核苷酸序列:1)SEQIDNo.1中所示核苷酸序列;或SEQIDNo.3中所示核苷酸... 孙延鸣 沈文 鲁海富 姜方配 杨文文献传递 诺卡氏菌形放线菌β-甘露聚糖酶的水解特性 被引量:9 2006年 诺卡氏菌形放线菌(Nocardioform actinomycetes)NA3-540产生的β-甘露聚糖酶(ManNA)能不同程度地水解槐豆胶、瓜胶、田菁胶和魔芋胶等甘露多聚糖为组分的植物胶,生成系列甘露寡糖;该酶只轻微地水解香豆胶,不能水解β-甘露聚糖、黄原胶、海藻胶;ManNA对槐豆胶、瓜胶和魔芋胶多糖的Km值和Vmax分别为1·75、6·13、3·9mg/mL和2485、1303、853μmol/(min/mg),表明槐豆胶是该酶的理想水解底物。ManNA水解几种植物胶的明显差异,表明甘露聚糖的糖链组成和空间结构明显地影响着β-甘露聚糖酶的水解活性。 吴襟 段子渊 高启禹 沈文 马延和关键词:Β-甘露聚糖酶 水解 甘露聚糖 新疆细毛羊KAP6.1基因的克隆及序列分析 被引量:3 2013年 根据绵羊毛囊角蛋白关联蛋白(KAP)6.1(登录号为AY483218.1)基因序列设计合成2个特异性引物,以新疆细毛羊为研究对象,从采集的皮肤组织中提取RNA进行RT-PCR反应,扩增出长度为320 bp的特异性片段,回收目的片段并连接至pMD18-T载体后转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,检测阳性克隆、测序并进行分析。结果表明:试验成功克隆了新疆细毛羊KAP6.1基因,得到的长度为320 bp序列中包含252 bp的编码区序列。新疆细毛羊与绵羊亲缘关系最近,同源性为99.2%,与山羊同源性为94.8%,有13处核苷酸差异与人和兔的同源性分别为80.8%、75.1%。 沈文 孙延鸣 崔茹鹏 鲁海富 肖林晋 石国庆关键词:新疆细毛羊 家兔人工感染疑似猪伪狂犬病病料的病理学观察 被引量:2 2001年 采用石河子地区某猪场疑似伪狂犬病病猪脑悬浮液人工接种于家兔 ,从被感染家兔表现不可忍受的奇痒、发热典型症状、剖检和病理组织学及包涵体的观察结果表明 。 田晶华 张高轩 陶岳 沈文 段风珍关键词:家兔 伪狂犬病 病理学 病理组织学 奇痒 冷应激对新疆阿勒泰羊脂蛋白脂酶mRNA表达的影响 被引量:2 2014年 为研究冷应激对阿勒泰羊脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)mRNA表达的影响,试验分别采集冷应激前与冷应激后阿勒泰羊6个部位的组织,采用实时荧光定量PCR方法检测各组织中LPL mRNA的表达水平,分析其在不同部位中表达的变化。结果显示,阿勒泰羊LPL mRNA表达量在冷应激后显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01),其中颈部肌间脂肪和尾部脂肪冷应激后表达量最高。表明阿勒泰羊在低温下脂肪组织的动员能力较强,使机体产热增加,以抵抗冷应激。 杨莉 齐亚银 张莉 沈文 李岩 张鲁安关键词:冷应激 脂蛋白脂酶 阿勒泰羊 雏鸡烟曲霉菌感染的诊治 1998年 雏鸡烟曲霉菌感染的诊治剡根强马勋沈文(石河子大学动科系石河子,832003)石河子某个体鸡场由于垫料受潮发霉,诱发雏鸡烟曲霉感染,现报道如下。1流行病学调查石河子某个体鸡场饲养的15000羽雏鸡,于15日龄时鸡群陆续出现以呼吸道为主要症状的病例,经全... 剡根强 马勋 沈文关键词:雏鸡 细粒棘球六钩蚴副肌球蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备 2017年 为了表达、纯化细粒棘球六钩蚴副肌球蛋白及制备多克隆抗体,本研究构建细粒棘球六钩蚴副肌球蛋白原核表达载体p ET30a-M26,转化至大肠杆菌BL21(DE3)内进行诱导表达,SDS-PAGE切胶纯化的副肌球蛋白,免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,并用Western blotting和ELISA对副肌球蛋白及抗体进行检测。结果显示:成功表达并纯化了细粒棘球六钩蚴副肌球蛋白,重组蛋白分子质量约41 k D,纯化后目的蛋白纯度可达85%,蛋白浓度为0.5mg/ml。副肌球蛋白可与所制备的多克隆抗体结合,ELISA测定的抗体效价为1∶12800,结果表明,成功表达并纯化了六钩蚴副肌球蛋白。本研究可为研究包虫病早期诊断奠定了基础。 袁方园 贾斌 王绪海 杜迎春 孙丽蓉 李鑫 李亚强 沈文关键词:副肌球蛋白 原核表达 多克隆抗体 六钩蚴 绵羊ISG15基因的克隆表达与纯化 被引量:3 2013年 为了克隆并表达绵羊ISG15,且对其表达产物进行纯化,首先从绵羊外周血单核细胞(PBMC)中提取总RNA,通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR),扩增出ISG15的基因;再通过基因克隆技术,构建ISG15在pET28a中的重组表达质粒pET28a-ISG15,在大肠杆菌BL21(DE3)用IPTG进行诱导表达,得到ISG15的原核表达蛋白;最后采用Ni 2+-NTA亲和层析方法纯化目的蛋白。结果显示:克隆的绵羊ISG15基因序列长度为541bp,编码157个氨基酸。重组表达产物通过SDS-PAGE可检测到相对分子质量为25ku的重组蛋白,且表达的目的蛋白能被Ni 2+-NTA亲和层析方法所纯化。该研究为后续深入研究绵羊ISG15奠定基础。 崔茹鹏 沈文 鲁海富 孙延鸣关键词:绵羊 克隆 巴什拜羊ISG15基因的克隆与序列分析 被引量:1 2012年 本研究旨在了解新疆巴氏拜羊类泛素蛋白ISG15基因的序列特征。采集巴什拜羊外周血液,从中分离得到淋巴细胞并提取RNA,设计特异性引物进行RT-PCR,克隆出巴什拜羊ISG15基因序列,回收PCR产物与pMD18-T载体连接后转化DH5α,检测阳性克隆、测序并进行序列分析。结果表明,克隆的巴什拜羊ISG15基因编码区全长为522bp,编码172个氨基酸。BLAST结果表明,巴什拜羊ISG15基因与绵羊、山羊、小尾寒羊、水牛、牛和野猪的ISG15基因序列同源性分别为99%、98%、95%、94%、94%和82%。构建基因进化树分析结果显示,巴什拜羊与绵羊先聚为一类,再与小尾寒羊聚为一类,然后和牛聚为一类。该聚类结果与生物学上的分类一致。 崔茹鹏 沈文 鲁海富 孙延鸣关键词:巴什拜羊 克隆 传染性附睾炎公羊精液临床病理学研究 被引量:1 2001年 对Br.ovis感染的轻病、重病和对照组公羊精液各 10份进行pH测定 ,结果分别为 6 .9± 1.13和 7.77± 0 .30 ,与对照组 6 .2 1± 0 .17相比差异显著 ;畸形精子计数 ,轻、重病羊分别占精子总数的 2 7.72 %和 34.17% ,与对照组 5 .90 %相比差异极显著 ,而头、颈、尾的畸形率差异不显著 ;炎症细胞检出率的羊数和炎症细胞数 47/ 6和 174/ 10与对照组 6 / 张高轩 张银国 沈文 王鹏雁关键词:临床病理学 精子畸形 炎症细胞