王劲峰
- 作品数:19 被引量:32H指数:3
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院输血研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生化学工程生物学更多>>
- 疏水相互作用层析分离重组人干扰素α2b被引量:2
- 2012年
- 目的采用疏水相互作用层析分离重组人干扰素α2b,去除干扰素样品中的二聚体,得到高纯度的干扰素用于进一步的研究。方法首先采用阳离子交换层析纯化复性重组人干扰素α2b,去除了大部分的杂蛋白,然后采用疏水相互作用层析纯化重组人干扰素α2b,去除复性过程中产生的错误折叠体和二聚体,并考察盐浓度、pH值、流速和洗脱液中尿素对疏水相互作用层析纯化效果的影响。结果硫酸铵初始浓度1.2 mol/L、缓冲液pH值6.0、流速2.5 mL/min、洗脱液中添加尿素浓度为2 mol/L时疏水相互作用层析纯化效果最佳。最终得到的重组人干扰素α2b非还原型SDS-PAGE电泳均呈单一条带。结论确定了疏水层析纯化重组人干扰素α2b的最优条件,成功提取到具有高活性、高纯度的重组人干扰素α2b纯品。
- 韩霭辰王劲峰
- 关键词:重组人干扰素Α2B纯化
- 日本金龟子芽孢杆菌生长和孢子生成阶段的特性研究被引量:2
- 2008年
- 日本金龟子芽孢杆菌是一种在活有机体外很难产生孢子的昆虫病原体。在以可溶性淀粉、酵母膏、磷酸氢二钾、糖类、碳酸钙为主要成分的液态培养基中对影响菌株生长和孢子生成因素进行研究。结果发现,菌体生长的最佳条件是葡萄糖为糖源、培养温度30℃、初始pH值7.6、通气量与菌液体积比1.5∶1、培养时间16h;孢子生成的最佳条件是海藻糖为糖源、温度30℃、pH值8.0、以硫酸锰和大孔吸附树脂为孢子生成促进剂、培养时间24h。在上述条件下,利用两阶段法生产孢子,成功的使孢子在活有机体外的生成率达到70%以上。
- 丁莹王若菡王劲峰
- 关键词:孢子微生物杀虫剂
- 氯化N-苄基-4-乙烯基吡啶聚合物的抗菌活性
- 2007年
- 氯化N-烷基-4-乙烯基吡啶聚合物,简称可溶性PVP,是一类具有高活性、低毒性和诸多潜在的特殊用途的季铵盐抗菌材料。本研究对聚-N-苄基乙烯基吡啶进行了合成与提纯,并对其在不同物理化学条件下抗菌性能差异进行了研究,结果表明温度、溶液条件等因素的变化对于样品的抗菌性能有重大影响。
- 李静涛张娜施秀芳李石王劲峰
- 关键词:抗菌活性
- 人胎盘血红蛋白聚合工艺的优化研究被引量:6
- 2013年
- 从影响血红蛋白与戊二醛聚合的相关因素戊二醛加样方式、血红蛋白浓度、戊二醛与血红蛋白摩尔比、反应时间和温度出发,以固定变量的方法逐个研究各因素对聚合产物分子量分布的影响,以达到降低制品平均分子量、提高有效转化率的目的。结果表明:原工艺平均分子量为(350.20±35.45)kD,有效转化率(分子量90~600kD)为53.27%±4.95%;而改进后工艺平均分子量为(158.60±8.70)kD,有效转化率为69.50%±3.70%。此外,改进后工艺应用于中试(扩大30倍)规模的验证性试验,有效转化率和平均分子量均可达到上述小试结果。
- 周文涛李燊李凤娟王劲峰陈刚杨成民
- 关键词:红细胞代用品戊二醛影响因素
- 干扰素及其聚乙二醇化修饰产物的概述被引量:1
- 2013年
- 干扰素是一类由不同细胞产生的可溶性糖蛋白,并且具有抗病毒,抗肿瘤和免疫调节功能。目前,干扰素已被用于治疗多种疾病,包括毛细胞白血病、乙型肝炎、丙型肝炎以及其他治疗领域。然而,这种治疗的缺点是干扰素在血液中的短半衰期以及快速被清除。近年来,有资料已证明聚乙二醇(PEG)共轭结合生物分子比其相应的未修饰分子表现出优越的临床应用。然而,虽然蛋白共轭连接聚乙二醇能够延长它们在血液中的半衰期,但是通常会导致生物学和药理学活性的急剧降低甚至活性丧失。在此,对干扰素及其聚乙二醇修饰产物的药理学、药代动力学以及药效进行对比概述。
- 韩霭辰王劲峰
- 关键词:干扰素聚乙二醇药理学药代动力学药效
- 聚乙二醇修饰重组人干扰素α-2b的碘染色法被引量:1
- 2013年
- 目的:建立检测聚乙二醇位点特异性修饰重组人干扰素α-2b反应的方法。方法:采用分子量20000的甲氧基聚乙二醇马来酰亚胺修饰重组人干扰素α-2b,反应混合物样品经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)后,碘染色法判断反应产物组成。结果:该修饰反应产物除含有单PEG化的干扰素α-2b外,还有不同修饰程度的多PEG化干扰素。结论:本方法方便快捷、分辨率高、特异性强,同时可用于其它聚乙二醇修饰蛋白质的分析研究。
- 郑博王昶王劲峰
- 关键词:重组人干扰素Α-2B聚乙二醇化学修饰
- 以人血红蛋白为基础的红细胞代用品修饰工艺的研究
- 2009年
- 对热敏法纯化的人胎盘血红蛋白进行理化指标及生物学性质进行检测,结果表明纯化血红蛋白的纯度为99%,高铁Hb含量为2.09%,氧结合量为1.19ml/g,光谱分析表明纯化后空间构象没有发生改变,即保持了生物活性。对纯化血红蛋白进行PLP修饰、GDA聚合工艺形成终产品。对修饰放于聚合步骤之前及之后两种工艺产品的理化指标及生物学性质进行比较,结果表明两种工艺产品的聚合度、高铁血红蛋白含量、氧结合量、P50光谱分析图都无显著差异,且后修饰可以大大节省PLP用量,降低研究成本,因此可以考虑在研究及生产中采用后修饰工艺。
- 李凤娟张鸿辉王劲峰杨成民
- 关键词:修饰高铁血红蛋白
- 干扰素的基础与应用进展被引量:9
- 2013年
- 干扰素(IFNs)是宿主细胞在受到病原体例如病毒、微生物、寄生虫、肿瘤细胞的侵染后产生并释放的。干扰素属于糖蛋白的一种,干扰素具有干扰病毒在宿主体内复制的能力,它对于提高宿主免疫系统对病毒的识别和抵抗起到十分重要的作用,现在被广泛的运用在病毒引起的疾病和肿瘤的治疗中。本文从干扰素的分类、产生、功能、疗效等方面入手,对其基础和应用进展进行综述。
- 李强韩霭辰郑博王劲峰
- 关键词:干扰素抗病毒抗癌PEG
- 凝胶阻滞色谱柱上聚合制备窄分布低分子量聚合血红蛋白的方法
- 一种凝胶阻滞色谱柱上聚合制备窄分布低分子量聚合血红蛋白的方法,它将天然血红蛋白用泵加入凝胶阻滞色谱中平衡,然后分布加入双功能交联剂进行聚合反应,反应温度为0~30℃,pH值为5.0~9.0反应时间3~10小时;血红蛋白溶...
- 杨成民王翔黄磊李燊张鸿辉梁伟光李洪英许丽丽王劲峰由英才
- 文献传递
- 一种聚合血红蛋白修饰方法
- 本发明涉及的是用于聚合血红蛋白的修饰方法,其特征在于在0~4℃及通氮等条件下,由天然红细胞得到纯化血红蛋白,将其先经同型双功能试剂聚合,再用5’-磷酸吡哆醛修饰。修饰过程中,谷胱甘肽应在加入PLP之后0.5-1.5小时之...
- 杨成民李凤娟张鸿辉梁伟光李洪英许丽丽李燊王劲峰杨晓明
- 文献传递