王超 作品数:19 被引量:78 H指数:6 供职机构: 西北农林科技大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 中医药行业科研专项 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
基于ITS2和rbcL序列石斛属植物的鉴定 被引量:1 2016年 为选育优质石斛品种和开发利用高效药用石斛资源,利用形态学分类法和DNA条形码技术对采集到的石斛样品进行鉴定,并对样品ITS2序列二级结构进行分析。结果表明:样品形态与石斛属植物特征相似。以ITS2序列构建系统发育树,样品GX07与Dendrobium loddigesii,YN08与Dendrobium officinale位于同一位置,其二级结构也基本一致,螺旋区和茎环等结构均无明显区别。基于rbcL序列构建的系统发育树没有达到很好的分辨效果,石斛属种间遗传距离最大为0.028。表明ITS2比rbcL更适合石斛属种间物种鉴定,并且其二级结构具有一定的辅助作用。 王超 郭雪玲 郭瑞军关键词:石斛属 ITS2 RBCL 猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白1α(nsp1α)的N端锌指结构是其抑制NLRP3炎症小体活性所必需 殖与呼吸综合征(PRRS)是严重危害养猪业的病毒性传染病,其致病原猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抑制宿主的天然免疫和特异性免疫反应,引起机体免疫抑制,造成持续性感染,从而给该病的防控带来困难.NLRP3炎症小体作为... 王超 史西保 王丽 陈静 司朝朝 邓瑞广 张改平关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 拮抗作用 山羊胎儿成纤维细胞的冷冻保存和体外培养(英文) 被引量:6 2004年 将胎儿成纤维细胞悬浮于不同的冷冻保护液中 ,在不同的温度下进行冷冻保存试验。结果显示 ,当保护液中含有 90 0 m L / L胎牛血清 (FBS)时 ,- 196℃下保存的山羊胎儿成纤维细胞解冻后的细胞贴壁率高于- 80℃ ,且前者贴壁细胞增殖也较后者快 ,二者间差异显著 ;而在 - 2 0℃条件下只有一小部分细胞能够存活 ,与前两者相比差异极显著 ,说明 - 2 0℃不适合冷冻胎儿细胞。冷冻保护液中含有 10 0 m L / L二甲基亚砜 (DMSO)的保护效果明显好于 5 0 m L / L DMSO,二者间差异显著。用组织块法培养的细胞 ,在两种培养基 DMEM和 M199中添加 10 0 m L / L FBS和 2 mm ol/ L 2 -巯基乙醇 (2 - Me) ,其组织块成活率及细胞生长速度均高于单纯添加 10 0 m L / LFBS,同时证明 DMEM和 M199都能用于胎儿成纤维细胞的体外培养。以 DMEM培养液为基础 ,分别添加 2mm ol/ L 2 - Me,5 m L / L FBS,10 0 m L / L FBS和 2 m mol/ L 2 - Me+10 0 m L / L FBS对山羊胎儿成纤维细胞进行体外培养 ,结果显示 ,细胞在 10 0 m L / L FBS和 2 mm ol/ L 2 - Me+10 0 m L / L FBS培养液中生长迅速 ,两者间无明显差异 ,2 - Me的存在促进了细胞的增殖 ;两者都与添加 2 m mol/ L 2 - Me组存在显著差异 ;添加 2 m mol/ L 2 - Me和 5m L / L 王超 李向臣 安志兴 张志平 舒建洪 张涌关键词:山羊 胎儿成纤维细胞 冷冻保存 体外培养 2-巯基乙醇 不同植冰温度下冷冻液的结晶变化及其对小鼠胚胎冷冻的效果 被引量:4 2003年 采用程序化冷冻方法 ,对不同植冰温度下几种冷冻液的结晶变化进行了分析 ,并比较了其对小鼠胚胎的冷冻效果。结果表明 ,- 5 .0℃植冰时 ,3种冷冻液 PEF、PGF和 PEGF只有部分结晶 ;当植冰温度为 - 5 .5℃时 ,PEF和 PEGF完全结晶时间为 1 0 min,PGF在 1 5 m in尚未完全结晶 ;- 6 .0℃植冰时 ,3种冷冻液完全结晶时间分别为 8,1 0和 1 0 min;- 6 .5℃植冰后完全结晶时间分别为 5 ,8和 5 min。将小鼠胚胎载入上述 3种冷冻液 ,- 5 .5℃植冰冷冻解冻后 ,囊胚孵化发育率分别为 81 .7% ,6 8.5 %和 87.5 % ,- 6 .0℃植冰时发育率分别为 80 % ,76 .5 %和 90 .9% ,- 6 .5℃植冰后的发育率分别为 1 0 % ,1 3.3%和 38.4 %。据此得出 ,在 - 5 .5或 - 6 .0℃时植冰 ,以 安志兴 李向臣 王超 张涌关键词:小鼠 胚胎冷冻 胚胎移植 胚胎保存 陇山山地自然区药用植物资源及多样性研究 被引量:8 2017年 【目的】了解陇山山地自然区药用植物资源及其分布规律,分析该区药用植物多样性特征,为该区药用植物资源的开发利用和保护提供科学依据。【方法】结合第四次全国中药资源普查工作,通过野外调查,统计陇山山地自然区药用植物种类构成及其科、属、种层面的具体分布,分析其分布类型、濒危物种和道地、特色药材现状,并对其生长类型、药用部位进行分类统计,分析当地药用植物利用现状及问题并提出对策。【结果】陇山山地自然区共有药用植物146科、763属、1 838种,其中珍稀濒危药用植物45种,道地药材103种,特色药材144种,多年生草本类药材943种,以全草类、根类和根茎类入药的药材较多。区内药用植物属存在15种分布区类型18个变型,药用植物区系热带、温带性质显著,同时具有一定的古老成分。【结论】陇山山地自然区药用植物种类丰富,多样性程度较高,应加强资源保护工作,科学合理地开发利用该区药用植物资源。 邢妮 张婷 刘秉焱 王超 刘虎岐关键词:药用植物 资源调查 植物多样性 植物区系 猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白11(nsp11)的核酸内切酶活性是其抑制NLRP3炎症小体活性所必需 RP3炎症小体作为一个多蛋白复合物,可以引起促炎性细胞因子IL-1β的成熟和分泌,是连接天然免疫和适应性免疫反应的重要桥梁.前期研究表明猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)可以激活NLRP3炎症小体但却会诱发机体的免疫抑... 王超 史西保 王丽 陈静 司朝朝 邓瑞广 张改平关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 拮抗作用 金黄色葡萄球菌鉴定方法研究 被引量:2 2020年 目的筛选出能够快速准确鉴定金黄色葡萄球菌的方法。方法利用国家标准法、VITEK 2 Compact生化鉴定、16S rDNA序列分析和PCR鉴定等4种方法对酱卤肉制品中分离出的典型菌落进行鉴定。结果国家标准法检测结果显示菌株为革兰氏阳性菌,血平板上有明显的透明溶血圈且血浆凝固酶试验结果为阳性,符合金黄色葡萄球菌判定标准。VITEK 2 Compact生化鉴定结果中不吻合的典型生化谱仅有1项(dMAL),判定菌株为金黄色葡萄球菌(98%概率),为极好的鉴定。16SrDNA序列比对分析及以邻接法构建的进化树均显示典型菌落为金黄色葡萄球菌。以耐热核酸酶基因(nuc)设计的引物能扩增出单一的清晰条带,能快速准确的识别出金黄色葡萄球菌。结论 4种方法均能准确鉴定出金黄色葡萄球菌,但耗时都比较长,通过改进实验方法,缩短DNA提取时间, PCR鉴定将表现出较大优势。 郭瑞军 王超关键词:酱卤肉 国标法 PCR鉴定 青年荷斯坦奶牛初次超数排卵试验 被引量:11 2003年 对影响荷斯坦青年奶牛超数排卵的因素进行了对比分析 ,并探索了青年奶牛超排的可行性方案。卵巢上有黄体存在的供体牛可以用于超排。青年奶牛在不同性周期阶段进行超排的结果不同 ,但差异不显著。用 FSH联合氯前列烯醇 ,采用常规逐日递减法肌肉注射进行超排 ,平均获得胚胎 7.0 7枚 ,可用胚胎 5 .98枚 ;在人工授精的同时注射促排卵素 3号 (L RH- A3) ,平均回收胚胎 8.6 4枚 ,可用胚胎为 5 .5枚。促排卵素 3号能提高胚胎的回收率 。 安志兴 刘俊平 王超 张迎科 李向臣 张明波 张涌关键词:荷斯坦奶牛 超数排卵 促排卵素 人工授精 体外成熟对牛卵母细胞孤雌激活后发育潜力的影响 被引量:4 2004年 本试验在卵母细胞体外成熟的研究基础上,研究了培养用水、卵泡液和成熟时间对卵母细胞体外成熟及孤雌激活后发育潜力的影响。结果表明:(1)将卵母细胞分别于蒸馏水和Milli-Q超纯水配制的成熟培养液中培养2224h,孤雌激活后,卵裂率无显著差异(P>0.05);但孤雌卵在超纯水配制的胚胎培养液中培养,囊胚发育率为22.3%,明显高于在蒸馏水配制的培养液中的囊胚发育率14.1%(P<0.05)。(2)在成熟培养液中添加10%、20%卵泡液,成熟卵母细胞孤雌激活后的囊胚发育率(32.3%,30.9%)明显高于添加5%和0%卵泡液组的囊胚发育率(21.8%,22.7%,P<0.05)。卵母细胞在添加20%卵泡液的培养液中成熟培养,孤雌激活后囊胚孵化率明显低于添加0、5%、10%卵泡液组的囊胚孵化率(P<0.05)。(3)成熟28h或30h的卵母细胞孤雌激活后,其囊胚发育率(30.5%或29.4%)明显高于成熟24h或26h组的囊胚发育率(20.5%或22.1%,P<0.05)。 张琇 李裕强 张涌 王超 李向臣 张志平关键词:体外成熟 卵母细胞 孤雌激活 发育潜力 胚胎工程 猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白1α(nsp1α)的N端锌指结构是其抑制NLRP3炎症小体活性所必需 被引量:2 2015年 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是严重危害养猪业的病毒性传染病之一,其致病原猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抑制宿主的天然免疫和特异性免疫反应,引起机体免疫抑制,造成持续性感染,从而给该病的防控带来困难。NLRP3炎症小体作为先天性免疫的重要组分在机体抗病毒中发挥重要作用。前期研究发现PRRSV能够激活NLRP3炎症小体,但PRRSV是否存在拮抗NLRP3炎症小体的组分还未见报道。本研究首先在缺失内源性炎症小体的HEK293T细胞中,共转染NLRP3、ASC、procaspase-1和pro-IL-1β四个真核表达质粒,建立NLRP3炎症小体的体外研究模型。然后,在该炎症小体模型细胞和猪肺泡巨噬细胞中,转染PRRSV nsp1α的真核表达质粒,结果表明nsp1α能够明显拮抗炎症小体的活化,而进一步的突变试验表明缺失N端锌指(ZF)结构或者突变ZF结构的nsp1α均不能抑制NLRP3炎症小体活化。本研究不仅首次发现了拮抗NLRP3炎症小体活化的PRRSV蛋白——nsp1α,而且发现nsp1α的N端锌指结构是其抑制NLRP3炎症小体活性所必需。本研究进一步发现了PRRSV拮抗天然免疫的新机制,并为PRRSV的防控提供了潜在的分子靶点和理论指导。 王超 史西保 史西保 王丽 陈静 王爱萍 王爱萍 邓瑞广关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 IL-1Β