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耿毅: 作品数：316 被引量：1,011H指数：18; 供职机构：四川农业大学动物医学院更多>>; 发文基金：长江学者和创新团队发展计划四川省科技支撑计划四川省教育厅重点项目更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>

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兔出血症病毒可视化RT-LAMP检测方法的建立与应用被引量：2: 2017年; 为建立一种可视化的兔出血症病毒RT-LAMP检测方法,根据兔出血症病毒(rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)的主要结构蛋白VP60基因的序列设计合成4条特异性引物,以重组pMD19-T-VP60质粒为模板,通过反应条件与反应体系优化,建立RHDV的环介导等温扩增(LAMP)检测方法,测定RT-LAMP对RHDV的最低检测限,并与普通RT-PCR进行比较。结果显示,该RT-LAMP的最佳反应温度为62℃,反应时间为40 min,对RHDV的最低检测限为50 copies/L,常规RT-PCR的检测限为5×10~3copies/L,表明建立的RT-LAMP的灵敏度显著高于常规RT-PCR。建立的RT-LAMP的全部反应可在1 h内完成;反应结束后加入荧光染料Et Br可肉眼判定粉色为阳性,而棕色则为阴性,且与兔巴氏杆菌、大肠杆菌、沙门菌、产气荚膜梭菌、无乳链球菌及肺炎克雷伯菌无交叉反应。上述结果表明,建立的RT-LAMP简便、快速、灵敏、特异,且不需昂贵仪器设备,适合在基层推广应用。; 刘星星耿毅孙娜陈勤杨泽晓李亚军牟维豪; 关键词：兔出血症病毒 RT-LAMP RT-PCR VP60基因

牛脾转移因子联合核酸疫苗对虹鳟鱼IHN病的保护率影响研究被引量：1: 2019年; 传染性造血器官坏死病(infectiou shematopoietic necrosis,IHN)是一种严重威胁鲑鳟的急性传染病。它主要感染鱼类的脾脏和肾脏等造血组织,引起组织坏死,根据鱼种、鱼龄、病毒菌株及饲养环境的不同,死亡率在80%~100%。目前,在多个国家和地区发现此病。一般认为眼球突出和拖假便是该病的典型特征。另外,稚鱼、幼鱼体侧以线状或v字型出血为特征。; 赖为民汪开毓魏文燕杨蕊菡耿毅欧阳萍; 关键词：核酸疫苗红细胞保护率

斑点叉尾鮰暴发性出血溃疡症的病理学研究: 2019年; 【目的】探究两起斑点叉尾鮰Ietalurus punetaus暴发性体表出血溃疡症的发病病因和病理特征。【方法】利用湿片法对鳃组织和体表黏液进行压片,观察寄生虫寄生情况。从发病鱼的肝脏、脾脏和肾脏中分离病原菌,检测细菌感染情况;利用PCR法检测患病斑点叉尾鮰的肝、脾、肾混合组织匀浆中斑点叉尾鮰病毒(Channel catfish virus,CCV)的携带情况。运用组织病理学方法观察病鱼的病理损伤特点,综合分析并推测该病的致病原因。【结果】该出血溃疡症的靶器官主要为脾脏、肾脏、肝胰脏、肠道以及皮肤肌肉。主要表现为严重的血管反应,实质细胞可见肿胀、变性、坏死;而胃、脑和心脏病变较轻,仅有轻微的炎症;鳃丝、眼球和鳔等未见明显病变。所有的患病个体均出现中度至重度出血性坏死性脾炎、中度肾炎、轻度至中度坏死性肝胰腺炎和肠炎。患病斑点叉尾鮰体内未检测到寄生虫、细菌以及CCV。【结论】综合病理学、细菌学和病毒学检测结果,推测此次斑点叉尾鮰暴发性疾病由某种非CCV的病毒感染所致,温度应激可能是引发该病的条件诱因。; 冯杨段靖黄小丽汪开毓邓永强耿毅欧阳萍陈德芳; 关键词：斑点叉尾鮰病理学诊断靶器官

一种鲤疱疹病毒Ⅲ型疫苗及其制备方法: 本发明公开了一种鲤疱疹病毒Ⅲ型疫苗及其制备方法。该疫苗包括如SEQ ID NO.1所示核苷酸序列编码的亚单位疫苗蛋白rORF57，以及佐剂。本发明疫苗可诱导鲤鱼鱼体产生特异性抗体，有效对抗鲤鱼抗鲤疱疹病毒Ⅲ型感染，免疫保...; 欧阳萍何汶璐陶雨耿毅汪开毓黄小丽陈德芳; 文献传递

一种黄羽鹌鹑孵化器: 本实用新型公开了一种黄羽鹌鹑孵化器，包括孵化器箱体，氧气瓶，空调，通风管道，孵化器箱门，所述的氧气瓶与空调分别固定在孵化器箱体的外侧，所述的通风管道穿过孵化器箱体，所述的托蛋盘一通过连杆与托蛋盘二固定连接，所述的托蛋盘一...; 何敏梁晓霞汪开毓方静陈正礼耿毅; 文献传递

简易涂布器: 本实用新型公开了简易涂布器，包括手柄，所述手柄为圆柱形结构，且手柄的一端连接有安装腔，所述安装腔上远离手柄的一侧开设有开口，且开口处活动设置有涂布棒，所述涂布棒的一端从安装腔的开口处活动插入安装腔内，所述安装腔上靠近开口...; 黄小丽冯杨段靖汪开毓陈德芳耿毅欧阳萍; 文献传递

锦鲤疱疹病毒环介导等温扩增检测方法的建立被引量：5: 2016年; 为建立一种快速检测锦鲤疱疹病毒(CyHV-3)的环介导等温扩增方法(LAMP),本研究根据Gen Bank中登录的CyHV-3 Sphi基因编码区序列设计了LAMP特异性引物,经反应体系和反应条件优化,建立了检测CyHV-3的LAMP方法。结果表明,本研究建立的LAMP检测方法与鲤痘疱疹病毒、金鱼造血器官坏死病病毒和鳗鱼疱疹病毒均无交叉反应,特异性强;最低检出率为13.9拷贝/μL,灵敏度高。使用LAMP方法和普通PCR方法对四川地区的15个检测点采用鱼鳃拭子非致死性采集的临床样品进行检测,阳性检出率均为31.40%(27/86)。表明本实验建立的该检测方法具有高灵敏度、高特异性、快速和简便的特性,适用于临床上对锦鲤疱疹病毒病的快速诊断。; 陈俊杰汪开毓周立新王定国曹成易耿毅尹立子陈德芳欧阳萍; 关键词：环介导等温扩增锦鲤疱疹病毒

蛙病毒感染致养殖大鲵大规模死亡的电镜观察及PCR检测被引量：33: 2010年; 为探索2009年12月甘肃陇南与陕西汉中养殖的大鲵发生的以皮肤出现白点、出血斑、溃疡,四肢肿胀,溃烂和头部肿胀为特征并引起大规模死亡疾病的原因,采用针对蛙病毒的特异性PCR方法与电子显微镜观察对患病大鲵进行了蛙病毒感染的诊断。结果显示,在病鲵的肝、脾和肾中发现大量直径为140～180nm的虹彩病毒样颗粒;针对蛙病毒的特异性PCR扩增出蛙病毒衣壳蛋白基因500bp的目的片段,测序后经采用BLAST软件分析,发现其与GenBank中的蛙病毒衣壳蛋白基因同源性达96%～99%。确认本次养殖大鲵发生大规模死亡是蛙病毒感染所致,首次报道了蛙病毒感染对我国养殖大鲵的危害。; 耿毅汪开毓李成伟王均廖雨婷黄锦炉周赵英; 关键词：聚合酶链反应