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转HCY-2基因对鸡胚神经管发育的影响: 为探讨新基因HCY-2与神经管畸形表型的关系及明确其是否具有基因毒性作用,应用脂质体介导基因转移技术将构建的含有全长HCY-2 cDNA(201 4bp)的真核表达载体转入新生鸡受精卵,培养3.5天后观察其对神经管闭合时...; 李勇李竹陈星孟昭亨刀京晶刘虹赵智榕; 关键词：神经管畸形胚胎发育; 文献传递

同型半胱氨酸对大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响被引量：3: 2000年; 目的进一步研究同型半胱氨酸(HCY)的致畸性及作用机制。方法应用大鼠胚胎胚芽细胞微团培养法了解HCY对胚胎胚芽细胞增殖和分化的影响。结果随着剂量的增加,HCY表现了对胚胎肢芽细胞的促进和抑制双相作用。半数抑制分化浓度(IC_(50))是5.0mmol/L,当加入S9时,IC_(50)减至3.5mmol/L;半数抑制增殖浓度是9.5mol/L,当加入S9时,IC_(50)为5.8mmol/L。结论 HCY对胚胎细胞分化的影响更为显著,对大鼠致畸作用不明显。; 刘虹李勇赵智榕陈星李松叶鸿瑁; 关键词：同型半胱氨酸致畸性

定位转HCY-2基因诱发鸡胚神经管畸形的时间-效应关系研究被引量：4: 1999年; 本文旨在研究定位转新基因（ＨＣＹ－２）与神经管畸形发生的时间－效应关系及可能的作用机理。采用脂质体介导基因转移技术将已构建的含有全长ＨＣＹ－２ｃＤＮＡ的真核表达载体定位转入不同发育时期的鸡胚（Ｈａｍｂｕｒｇｅｒ－Ｈａｍｉｌｔｏｎ１、６和１２期），培养后再用ＲＴ－ＰＣＲ、免疫组化、扫描和透射电镜及光镜等技术探讨ＨＣＹ－２基因在４天龄鸡胚中的表达、分布和致畸作用。结果在３个不同时期定位导入ＨＣＹ－２基因后，均可诱导胚胎发生神经管畸形，以１天龄头侧微注射的胚胎最为敏感，神经管畸形发生率高达３５．３％，呈明显时间－效应关系，其表现型是：脑膨出、无脑、脊柱裂和小头。转基因组胚胎能够表达ＨＣＹ－２ｍＲＮＡ和相应编码蛋白，主要分布于胚胎脑组织中。扫描和透射电镜下发现ＨＣＹ－２基因能损伤细胞表面和内部的超微结构；在畸形部位还观察到大量的凋亡细胞。结论是，ＨＹＣ－２基因可能是一种新的基因毒性因子，它在胚胎早期神经管畸形发生机制中起重要作用。; 李勇李竹张晨晖陈星孟昭亨刘虹赵智榕李松; 关键词：神经管畸形胚胎

HCY-2基因和同型半胱氨酸与鸡胚先天性心脏畸形发生的关系被引量：27: 2000年; 目的　探讨新基因HCY 2和同型半胱氨酸与早期先天性心脏畸形发生的关系。方法　应用鸡胚致畸试验观察同型半胱氨酸 (0～ 1 6 μmol/胚胎 )对鸡胚心血管发育的影响 ;采用脂质体介导基因转移法将已构建的含有全长HCY 2cDNA的真核表达载体转入新生鸡卵 ,培养 4d后再用Western杂交和免疫组织化学等方法观察HCY 2基因对早胚心血管发育的致畸作用及其编码产物的表达和分布。结果　HCY对器官形成期的心脏有明显的致畸作用并呈剂量反应关系 (P <0 .0 5 )。转1 0 μg和 2 0 μgHCY 2基因能诱导鸡胚心血管系统发育异常 ,心脏畸形发生率分别为 1 6 .7%和 2 4.0 % ,主要表现型是心包积液、异位心、心外露和心脏过小。Western杂交显示转 1 0 μg和 2 0 μg基因组胚胎样品有HCY 2蛋白大量表达 ,其分布以胚胎心脏组织为主。HCY 2基因可引起心脏结构紊乱、心内膜垫缺损和抑制心室心房发育 ,并可损害心肌细胞的超微结构。结论　HCY/HCY 2基因可能是一种新的心脏发育毒性因子 ;HCY 2基因的异常表达在心血管畸形发生过程中起重要作用。; 李勇李松陈光慧胡白和孟昭亨陈星赵如冰张晨晖刘虹赵智榕汤健李竹; 关键词：半胱氨酸胚胎心脏缺损先天性

转HCY-2基因对鸡胚神经管发育的影响被引量：6: 1999年; 为探讨新基因ＨＣＹ－２与神经管畸形表型的关系及明确其是否具有基因毒性作用，应用脂质体介导基因转移技术将构建的含有全长ＨＣＹ－２ｃＤＮＡ（２０１４ｂｐ）的真核表达载体转入新生鸡受精卵，培养３．５天后观察其对神经管闭合时期胚胎的整体分子生物学效应，利用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹和免疫组化等技术研究在整体环境下ＨＣＹ－２蛋白的表达和分布情况。结果显示转ＨＣＹ－２基因（５～２０μｇ）可诱导早期鸡胚发生神经管畸变，而空载质粒组胚胎发育正常；Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹和免疫组化分析发现有ＨＣＹ－２蛋白大量表达，主要分布于胚脑组织中，显著高于空载质粒对照组；透射电镜观察发现转ＨＣＹ－２基因后，胚脑细胞超微结构受损和出现呈弥散分布的凋亡细胞。结论是ＨＣＹ－２基因对神经管闭合时期的胚胎神经系统发育具有明显基因毒性作用。; 李勇李竹陈星孟昭亨刀京晶刘虹赵智榕; 关键词：神经管畸形胚胎发育鸡胚

同型半胱氨酸对大鼠胚胎中脑细胞增殖和分化的影响被引量：3: 2000年; 为深入揭示同型半胱氨酸(hom ocysteine,HCY)的致畸性及作用机理,应用大鼠胚胎中脑细胞微团培养法探讨了HCY(0～10m m ol/L)对胚胎中脑细胞增殖和分化的影响。结果显示:随着剂量的增加,HCY对胚胎中脑细胞分化具有促进和抑制双相作用,半数抑制分化浓度(IC50 )为4.3m m ol/L,当加入肝微粒体S9时,IC50减至2.3m m ol/L;在实验剂量范围内,HCY对中脑细胞增殖无明显抑制作用。上述结果说明HCY 对大鼠胚胎中脑细胞分化的影响明显高于对细胞增殖的影响。; 刘虹李勇叶鸿瑁赵智榕陈星李松; 关键词：同型半胱氨酸中脑细胞胚胎细胞增殖细胞分化

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赵智榕