邓芳
- 作品数:4 被引量:13H指数:2
- 供职机构:中国科学院更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 在大肠杆菌K99(中国QH株)菌毛形成亚单位基因(fanC)的克隆和测序中发现IS1 插入序列被引量:1
- 2002年
- 目的 构建大肠杆菌K99菌毛表达载体。方法 通过逐级亚克隆的方法克隆k99菌毛形成亚单位基因(fanC),并进行序列测定和fanC亚单位的抗原决定簇模拟,以确定突变部位。结果 克隆了包括K99菌毛形成亚单位基因(fanC)和部分fanD基因在内的一段基因,该基因与国外报道相比明显偏大。序列测定表明:在fanC尾部多出 24bp,在fanC与 fanD,的结合部有一 800bp左右的新基因。经与基因库中大肠杆菌基因作同源性比较发现,该新基因为768bp的插入序列IS1。其他基因为K99自身fonC与fanD片段之间的过渡基因。IS1的插入未改变fanD,基因的阅读框架,只是使fanD片段末端增加了 8个氨基酸。fanC亚单位的抗原决定簇模拟结果显示,K99 fanC片段具有一个非常突出的亲水区域,根据经验它应是抗原决定簇所在的部位。结论 首次发现大肠杆菌K99基因中含有插入序列IS1。
- 陈溥言杜念兴赵国屏成志恒邓芳杨胜利刘永庆
- 关键词:大肠杆菌K99抗原决定簇菌毛测序
- 生长抑素(SS)大肠杆菌基因工程疫苗促进小尾寒羊生长的试验研究
- 2001年
- 对山东小尾寒羊进行了SS大肠杆菌基因工程疫苗的免疫增重试验 ,结果显示 :免疫母羔羊5 8天比载体对照组提高增重 15 6 4% (P <0 0 1) ,90天提高增重 2 8 2 % (P <0 0 1) ;免疫公羔羊变化不明显。
- 国庆坤刘振忠刘永庆杜念兴陈溥言赵国屏邓芳李瑞宋修春
- 关键词:基因工程疫苗促生长小尾寒羊
- 生长抑素基因在大肠杆菌pThioHis表达系统中的克隆与表达被引量:7
- 2003年
- 目的 在大肠杆菌表达系统中高效表达生长抑素 (SS)基因。方法 以天然SS的氨基酸和基因序列为标准 ,将大肠杆菌使用频率较低的密码子分别更换成了使用频率较高的密码子 ,在SS基因的两端加上了合适的酶切位点 ,头部 :KpnI和NcoI;尾部 :PstI(这一酶切位点可与NsiI的切口互补 )。克隆至pThioHisA质粒的KpnI/PstI酶切位点后 ,再克隆至pThioHisA质粒的KpnI/NsiI酶切位点 ,使SS基因分别位于多克隆位点的尾部和前部。结果 重组质粒经酶切鉴定和基因序列测定证明 ,基因完全正确 ,在大肠杆菌TOP10中均得到较好的表达 ,IPTG诱导后 4h表达量基本达到最高 (37℃ ) ;在A60 0 0 .4~ 1.5之间用IPTG诱导均可获得到较好的表达 ,但以 0 .6左右为最佳诱导时机 ;在LB、TB和 2YT培养基中表达量依次为 :TB >LB >2YT ;表达的SS融合蛋白基本为水溶性的 ,具有良好的SS抗原性和免疫原性。
- 刘永庆潘杰彦陈溥言杜念兴赵国屏褚仲海邓芳杨胜利
- 关键词:基因克隆基因序列测定
- 重组生长抑素(SS)大肠杆菌疫苗促进动物生长的效果被引量:8
- 2002年
- [摘 要]目的 验证重组SS大肠杆菌疫苗促进动物生长的效果。方法 由SS融合蛋白与弗氏不完全佐剂制成实验用疫苗,皮下注射BALB/c小鼠、去势仔公猪、妊娠初产母猪和羔羊等动物,并观察体重变化。结果 与Vector Vaccine相比,Vaccine-1和 Vaccine-2可分别使雌性小鼠提高增重 10.28%和 15.63%;对雄性小鼠的作用不明显。用SS融合蛋白疫苗免疫去势仔公猪,免疫后89天提高增重7.2%;免疫初产母猪,所产28日龄仔猪可比载体对照组仔猪提高增重11.81%,比44日龄仔猪提高增重17.95%;免疫母羔羊58天可比载体对照组提高增重15.64%,90天提高增重28.2%;免疫公羔羊变化不明显。用SS融合蛋白疫苗免疫小鼠,其血清中抗因抗体阳性率为75%。结论 重组SS大肠杆菌疫苗能促进雌性小鼠、去势仔公猪、妊娠初产母猪所产仔猪和母羔羊增重,但对雄性小鼠和公羔羊无作用。
- 刘永庆hotmail.com陈溥言张晓娟杜念兴赵国屏孙敬芳国庆坤邓芳
- 关键词:大肠杆菌疫苗动物增重初产母猪羔羊