马伟
- 作品数:6 被引量:11H指数:2
- 供职机构:新疆农业大学更多>>
- 发文基金:新疆维吾尔自治区重大科技专项国家级星火计划更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- 猪圆环病毒Ⅱ型新疆分离株全基因组及ORF2基因的克隆与测序
- 2010年
- 根据GenBank中已发表的猪Ⅱ型圆环病毒(PCV2)全基因组序列,设计合成了2对特异性引物。将PCV2新疆分离株(PCV2-XJ)用PK15细胞培养数代,从细胞培养物中提取病毒总DNA,并取其作为模板,PCR扩增出病毒全基因和结构基因(ORF2)。将PCR回收产物克隆到pMD18-T载体,成功构建了重组质粒pMD18-TPCV2和pMD18-T-ORF2,并对筛选出的阳性质粒进行测序。应用序列分析软件对测序结果分析可知,克隆得到的PCV2-XJ基因组全长1 768 bp。通过序列分析结果显示,PCV2-XJ与国内外PCV1、PCV2参考毒株的核苷酸同源性分别为99.5%~99.7%和68.7%;与HuB08(FJ041151)参考株核苷酸同源性最高(99.7%)。PCV2-XJ株ORF2基因与参考株核苷酸和氨基酸同源性分别高达99.3%和98.8%。
- 张伟马伟王传锋薛英贺笋吴星星冉多良
- 关键词:基因组克隆
- H3N8亚型马流感病毒HA1基因原核表达载体的构建及表达被引量:3
- 2013年
- 采用RT-PCR方法从马流感病毒中国分离株A/马/新疆/07(H3N8)中扩增的HA1基因片段,将其克隆到表达载体pET-28a(+)中,测序正确后转化入Rosetta(DE3)中进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌表达出约53ku,以沉淀性形式存在的重组蛋白,且在37℃,0.4mmol/L IPTG条件下诱导8h表达效果最好。表达产物经切胶纯化后得到纯度较高的目的蛋白。经Western-blot分析,表达的蛋白与抗马流感病毒阳性血清发生特异性反应,证实该蛋白具有良好的反应原性。
- 何晶马伟孙建华徐泉源冉多良
- 关键词:H3N8亚型马流感病毒HA1基因克隆原核表达
- PRRSV新疆株N基因的克隆及原核表达被引量:1
- 2009年
- 根据GenBank上已发表的毒株,设计了一对引物扩增PRRSV新疆株N基因片段;将N基因克隆到pMD18-T,在亚克隆到pGEX-6p-1原核表达载体上,构建重组质粒pGEX-6p-N;在37℃条件下,经终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导表达4 h后,获得了可溶性融合蛋白;经SDS-PAGE电泳检测和Western blotting分析,该融合蛋白分子量约为39 kDa,与预期结果一致,并能与PRRSV阳性血清发生特异性反应,且非特异性背景很低。
- 王传锋马伟张伟薛英吴星星冉多良
- 关键词:PRRSVN基因克隆原核表达
- PRRSV-XJPRRSV1/03株结构蛋白基因的克隆与序列分析
- 本研究从培养好的PRRSV XJPRRSV1/03株提取总RNA,参考VR2332和CH-1 α株基因序列,设计6对引物GP2-1/GP2-2、GP3-1/GP3-2、GP4-1/GP4-2、GP5-1/GP5-2、M1...
- 马伟
- 关键词:繁殖呼吸综合征结构蛋白基因生物信息学
- 文献传递
- 牛病毒性腹泻/粘膜病检测试剂盒的研制及应用
- 冉多良季新成刘建华史茜王科珂郭庆勇苏战强马伟加尔肯张伟
- 该研究建立了内标三重BVDVI和BVDVII分型RT-PCR检测方法、BVDV通用型内标双重RT-PCR检测方法,并组装检测试剂盒;原核表达BVDVE2蛋白,制备单克隆抗体,研制了BVDV c-ELISA检测试剂盒;进行...
- 关键词:
- 关键词:病毒性腹泻粘膜病检测试剂盒
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒新疆株的分离鉴定被引量:2
- 2008年
- 从新疆阿克苏地区某规模化猪场发病仔猪体内分离到1株病毒,该病毒能在Marc-145细胞上增殖并产生特征性的细胞病变,而在Vero与BHK-21细胞上不出现细胞病变。病毒能被猪繁殖与呼吸综合征病毒阳性血清特异性地中和,用RT-PCR反应能扩增出369 bp的特异性片段。将病毒接种30日龄血清阴性仔猪,可检测到血清中出现病毒特异性抗体,将分离株命名为XJPRRSV1/03株。
- 马伟冉多良黄炯薛英
- 关键词:繁殖与呼吸综合征病毒