高媛媛
- 作品数:20 被引量:45H指数:4
- 供职机构:福建师范大学更多>>
- 发文基金:福建省自然科学基金国家自然科学基金福建省发展和改革委员会项目更多>>
- 相关领域:生物学艺术医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 低温胁迫对裂殖壶菌DHA生物合成及SOD表达的影响被引量:15
- 2010年
- 培养温度对裂殖壶菌产油脂中二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,DHA)含量以及超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)表达水平均有重大影响。细胞干重测定和气相质谱联用法检测了不同温度下裂殖壶菌Schizochytrium sp.FJU-512的生长和脂肪酸组成,荧光定量PCR法比较各温度下SOD mRNA表达量。结果表明,低温有利于DHA的合成,低温胁迫下SOD mRNA表达量最高。探讨裂殖壶菌耐低温胁迫的机制可能是低温增加培养基中溶解氧水平,氧化应激造成SOD的高表达,加快活性氧自由基的清除,促进DHA等不饱和脂肪酸的积累,增强膜的流动性以适应低温环境。其次,从DHA高产菌株裂殖壶菌Schizochytrium sp.FJU-512 EST文库筛选出SOD基因,并应用生物信息学分析该氨基酸序列。
- 刘静高媛媛江贤章毛若雨田宝玉柯崇榕吴松刚黄建忠
- 关键词:裂殖壶菌二十二碳六烯酸
- 破囊壶菌△4-脂肪酸脱饱和酶基因5′端侧翼区域的克隆与鉴定
- 二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,简称DHA)是目前发现的碳链最长、不饱和度最高的ω-3长链高度不饱和脂肪酸(Long-chain polyunsaturated fatty acids,Lc-P...
- 江贤章陈金卿田宝玉高媛媛舒正玉李欣蓝灿华黄建忠
- 关键词:破囊壶菌启动子绿色荧光蛋白
- 文献传递
- 敲除SNF1基因提高酿酒酵母乙醇生物合成的研究被引量:2
- 2009年
- SNF1基因编码的Snf1p对起始受葡萄糖阻遏基因的转录是必需的。通过重叠延伸PCR和两步PCR法合成了两端各带有352bp和345bp与SNF1序列上下游同源的基因敲除组件。将该敲除组件转化至酿酒酵母YS2,获得被loxP-kan-loxP序列组件替换而产生kanr的阳性克隆子。然后将质粒pSH65转入阳性克隆子并诱导表达Cre酶切除kan基因,进而通过传代丢失质粒pSH65后得到SNF1单倍体缺陷型菌株。重复转化敲除组件实现另一条等位基因的敲除,得到SNF1双倍体缺陷型菌株YS2-△snf1::loxp-kan-loxp。厌氧发酵试验表明该突变株的乙醇产量较出发菌株YS2提高了8.74%。残糖量试验表明在培养基中葡萄糖消耗殆尽后,突变株相对于出发菌株而言并没有利用乙醇作为碳源,乙醇产量保持稳定未有下降。敲除SNF1基因是提高酿酒酵母生物合成乙醇的一条有效途径。
- 雷娟娟王艳尊江贤章高媛媛李欣蓝灿华陈由强吴松刚黄建忠
- 关键词:酿酒酵母基因敲除乙醇
- 酿酒酵母adh2和ald6双基因缺失突变株的构建被引量:7
- 2009年
- 酿酒酵母乙醇合成代谢过程中,阻断或削弱乙醛至乙酸代谢流不但能增强乙醇合成流,同时还能降低发酵乙酸含量。本研究以乙醇脱氢酶Ⅱ(adh2)基因缺陷型酿酒酵母YS2-Δadh2为出发菌株,应用长侧翼同源两步PCR(LFH-PCR)策略构建乙醛脱氢酶Ⅵ(ald6)基因敲除组件,转化酿酒酵母YS2-Δadh2敲除ald6基因,之后转入表达质粒pSH65到阳性克隆中,半乳糖诱导表达Cre重组酶切除Kanr基因筛选标记,最后,传代丢失质粒pSH65获得单倍体ald6基因缺失突变株。利用同样的敲除组件和技术再次敲除其等位基因,最终获得双基因缺失突变株YS2-△adh2-Δald6。发酵实验表明与出发菌株YS2相比,突变株乙酸合成量降低18%,乙醇最高产量提高12.5%。
- 王艳尊雷娟娟江贤章高媛媛李欣蓝灿华陈由强陈如凯黄建忠
- 关键词:酿酒酵母基因敲除
- 线虫surface coat proteins提取方法的建立与双向电泳分析被引量:1
- 2010年
- 目的:建立一套适用于蛋白质双向电泳体系的线虫surface coat proteins(SCPs)样品制备技术,为今后研究线虫surfacecoat蛋白质组学及线虫病理生理学奠定基础。方法:以秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)为研究材料,对比和分析不同的蛋白提取沉淀方法,进而采用SDS-PAGE电泳技术和双向电泳技术对所提蛋白进行评价。结果:通过35%乙醇结合TCA-丙酮沉淀法获得的质量较好的线虫SCPs,在12%的SDS-PAGE分析中该法提取的蛋白背景浅,蛋白条带多且清晰尖锐,含有丰富的蛋白信息量。通过双向电泳分析,可从提取的蛋白中鉴定出清晰蛋白点400多个。随机选择5个蛋白斑点,进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定,鉴定得到高度匹配的已知线虫蛋白质2个。结论:所建立的方法可为今后研究线虫surface coat蛋白质组学及线虫病理生理学提供重要工具。
- 黄薇田宝玉郭菁蔡婉玲高媛媛柯崇榕黄建忠
- 关键词:线虫SURFACECOAT蛋白提取双向电泳MALDI-TOF质谱
- 乙醇作为增敏剂提高氨基糖苷类抗生素杀菌效率的方法
- 本发明公开了乙醇作为增敏剂提高氨基糖苷类抗生素杀菌效率的方法。该方法是在含有待灭细菌的菌液中加入终浓度为20‑30mM的乙醇,得到菌液预处理液,然后在所得菌液预处理液中加入氨基糖苷类抗生素,杀灭细菌。本发明方法可以大幅度...
- 付新苗李中燕张祖勤高媛媛
- 文献传递
- 海洋破囊壶菌△^5-延长酶和△^4-脱饱和酶在酿酒酵母中的共表达被引量:2
- 2009年
- 二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,DHA C22:6n-3)是具有各种重要生理功能的高度不饱和脂肪酸.分别以质粒pYTFD5和pYFAD4为模板,扩增获得860bp的△5-延长酶基因(elo5)和1600bp的△4-脱饱和酶基因(fad4).利用重叠延伸PCR构建elo5-fad4融合基因,Hind Ⅲ/Sph Ⅰ双酶切后连接到经同样处理过的pYES2.0载体,构建重组表达质粒pYELO5-FAD4.转化酿酒酵母尿嘧啶缺陷型菌株INVScl,通过缺少尿嘧啶的选择性培养基筛选阳性克隆子.添加外源脂肪酸C20:5底物,半乳糖诱导表达.气相色谱-质谱分析表明,重组酵母总脂肪酸中出现了DHA(二十二碳六烯酸,C22:6n-3)新产物,融合基因elo5-fad4在酿酒酵母中得到了表达.
- 刘艳如江贤章高媛媛田宝玉陈晓峰陈金卿黄建忠
- 关键词:破囊壶菌二十二碳六烯酸共表达
- 一种杀灭水产病原菌的方法
- 本发明涉及杀菌技术领域,特别是涉及一种杀灭水产病原菌的方法。方法包括以下步骤:用甘油水溶液处理水产病原菌。本发明用甘油水溶液处理杀灭水产病原菌的独特优势在于不采用任何具有毒副作用的抗生素等抗菌药物,这在根本上杜绝了耐药菌...
- 高媛媛邢亚芹付新苗
- 用电影写诗:特伦斯·马利克电影研究
- 特伦斯·马利克(Terrence Malick,1943年11月30日-)是一位美国电影导演、制作人、编剧。特伦斯·马利克的作品为电影史上的经典,特别是《穷山恶水》与《天堂之日》。他也因《红色警戒》(又名《细细的红线》)...
- 高媛媛
- 关键词:诗意电影存在主义殖民主义
- 低离子休克提高氨基糖苷类抗生素杀灭持留菌效率的方法
- 本发明公开了低离子休克提高氨基糖苷类抗生素杀灭持留菌效率的方法。本发明方法是将抗生素采用等渗溶液或无菌水溶液配制成一定浓度的抗生素预处理液,所述等渗溶液为0.3M的甘油溶液或0.9%Nacl溶液,所述无菌水溶液为双蒸水。...
- 付新苗陈钟毓高媛媛
- 文献传递