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何孔旺: 作品数：518 被引量：1,764H指数：22; 供职机构：江苏省农业科学院更多>>; 发文基金：江苏省农业科技自主创新基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>

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猪链球菌2型及其毒力因子检测多重PCR的建立与应用被引量：27: 2006年; 根据相关文献设计并合成引物,建立了能同时检测猪链球菌2型(cps)及其重要毒力因子溶菌酶释放蛋白(mrp)和细胞外因子(epf)的多重PCR方法。目的片段的大小分别为885bp(mrp)、675bp(cps)和443bp(epf)。对参考菌株、人工攻毒病料和临床收集病料的检测结果显示,该多重PCR特异性强、敏感性高,可直接从临床病料中检测出猪链球菌2型,并能鉴定其毒力因子表型。; 马清霞何孔旺陆承平; 关键词：猪链球菌2型毒力因子多重PCR

检测猪流行性腹泻病毒抗体的ELISA试剂盒: 本发明提供了一种检测猪流行性腹泻病毒抗体的ELISA试剂盒，属于生物技术领域。该试剂盒是以纯化的重组猪流行性腹泻病毒N蛋白作为包被抗原的ELISA板条。RT-PCR方法扩增获得猪流行性腹泻病毒N基因，定向插入pET-28...; 李彬孙冰何孔旺杜露平郭容利倪艳秀温立斌俞正玉张雪寒茅爱华吕立新胡屹屹周俊明王小敏祝昊丹于洋; 文献传递

产肠毒素性大肠杆菌主要毒力因子研究概况: 产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)是引起仔猪腹泻的主要病原之一,该菌的致病性与其毒力因子密切相关.ETEC的毒力因子包括粘附素、肠毒素、水肿病毒素、内毒素、溶血素以及EatA.其中粘附素和肠毒素无论是从发病学还是免疫学角度来...; 袁万哲何孔旺陆承平孙继国陈立功; 关键词：粘附素肠毒素毒力因子产肠毒素性大肠杆菌仔猪腹泻; 文献传递

柴胡皂苷a和柴胡皂苷d疫苗免疫佐剂用途: 本发明公开了柴胡皂苷a和柴胡皂苷d作为疫苗佐剂的用途，采用本发明的佐剂，可以提高兽医临床动物疫苗的使用效果，治疗动物免疫抑制性疾病，全面增强动物免疫功能和防御疾病的能力。; 胡屹屹何孔旺李彬; 文献传递

一种大肠杆菌O157:H7胶体金免疫检测试剂盒及其应用: 本发明提供一种大肠杆菌O157:H7胶体金免疫检测试剂盒及其应用，涉及生物技术领域。该试剂盒包括LAMP引物组和胶体金试纸；所述LAMP引物组包括引物ZF3、ZB3、ZFIP、ZBIP、ZFLP和ZBLP，所述引物ZFL...; 张雪寒张碧成王警郭芸芸周俊明祝昊丹俞正玉李彬倪艳秀温立斌范宝超朱雪娇汪伟胡屹屹郭容利肖琦周金柱何孔旺; 文献传递

一种检测猪输血传播病毒2型抗体的间接ELISA试剂盒: 本发明涉及一种用于检测猪输血传播病毒2型（TTV2）抗体的间接ELISA试剂盒，属于生物技术领域。包括抗原重组蛋白的制备、间接ELISA的建立、判定标准及临床血清学检测的应用。所述的抗原重组蛋白是利用pcoldI原核表达...; 何孔旺王小敏张文文倪艳秀温立斌俞正玉张雪寒郭容利吕立新李彬周俊明茅爱华叶青汪伟周萍沈江萍; 文献传递

猪流行性腹泻病毒嵌套式RT-PCR检测方法的建立被引量：2: 2004年; Two pairs of primers were designed according to the N gene sequence of PEDV-CV777 strain in Genebank (No. AF353511). PCR amplification product of outer-primers was 1328bp, and the inter-primers amplification product was 538bp. With the primers, a nested PCR assay was established to detect PEDV. This method was sensitive and specific and could be used in PEDV diagnosis and epidemiological investigation.; 张素芳贾赟王敏秀倪艳秀何孔旺陈溥言; 关键词：猪流行性腹泻病毒 PED 分子生物学技术

检测猪链球菌2型的溶菌酶释放蛋白(MRP)的PCR方法的建立被引量：25: 2001年; 根据猪链球菌 2型的mrp基因自行设计和合成了一对可扩增长度为 885bp目的片段的引物 ,成功地建立了检测溶菌酶释放蛋白 (MRP)的PCR方法。用XbaⅠ内切酶进行酶切 ,获得了与预期一致的 5 78bp和 30 7bp的 2个片段。并进行了PCR的特异性试验和敏感性试验。对马链球菌兽疫亚种、猪丹毒杆菌、猪肺疫巴氏杆菌和猪肺炎支原体的PCR检测结果均呈阴性 ;检测的敏感度可达 10 0个细菌。另外 ,对 9株从病猪体内分离的猪链球菌 2型菌株进行了检测 ,8株呈阳性 ;对 15份正常屠宰猪扁桃体分离物的检测结果是 1份为阳性。结果表明此法特异性和敏感性均很高 ,可作为MRP快速诊断和流行病学调查的手段。; 倪艳秀何孔旺王继春何家惠还红华陆承平姚火春; 关键词：猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白 PCR

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒野毒株持续性感染细胞模型的建立被引量：2: 2012年; 旨为建立高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)野毒株持续性感染细胞模型。通过将HP-PRRSV野毒株JX143感染Marc-145细胞,感染的细胞经连续传代35代,建立了稳定的PRRSV持续感染的细胞模型,获得了JX143-Marc-145-P35细胞株。应用RT-PCR、免疫荧光、空斑形态分析等技术跟踪观察了JX143-Marc145细胞株连续传代过程中病毒在细胞内的存在和生物学特性的变化。为了进一步分析病毒持续性感染过程中基因的特征性变化,通过RT-PCR扩增出JX143-Marc145-P35的全基因,并进行测序和序列分析。结果表明,在细胞模型建立的过程中,细胞病变(Cytopathic effect,CPE)的产生经历了从慢到快又到慢的过程,RT-PCR检测和免疫荧光证实JX143-Marc-145细胞中PRRSV持续稳定存在,表现出病毒持续感染的基本特征。该细胞与正常的Marc145细胞相比,细胞周期无显著差异,但JX143-Marc-145-P35的空斑形态与亲本病毒JX143相比略大。通过序列比较分析,JX143-Marc-145-P35v与亲本猪JX143的同源性为99.4%,存在38个非同义突变,其中,31个位于非结构蛋白,7个位于结构蛋白。试验成功建立了稳定的PRRSV持续性感染细胞模型,细胞周期与正常细胞无显著差异,但病毒在持续性感染过程中无论是基因还是表型都发生了变异,且在体外持续性感染建立的过程中,对于氨基酸突变的选择压力很可能施加于病毒的非结构蛋白和主要糖蛋白。该模型的建立对深入研究病毒与细胞间的相互作用,尤其是PRRSV持续性感染的机制具有重要意义。; 王小敏李燕华蔺涛刘闰夏何孔旺童光志袁世山; 关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞模型

新西兰孕兔人轮状病毒Wa株宫内感染的初探被引量：3: 1999年; 目的观察孕免人轮状病毒（ＨＲＶ）血症是否会导致富内感染。方法在新西兰孕兔妊娠的不同阶段，经耳静脉注射入轮状病毒Ｗａ株，造成孕兔的病毒血症（血浓度为５×１０７／Ｌ），然后用ＲＴ／ＰＣＲ技术；检测出生仔兔肠道组织内ＨＲＶ抗原。结果在孕兔妊娠的早、中，晚期，ＨＲＶ都能通过血胎屏障进入宫内在仔兔肠道内定居。结论提示仔免存在ＲＶ宫内感染的可能性。这将为研究人类ＲＶ宫内感染提供依据。; 赵枫谢孟坤姚英民何孔旺; 关键词：宫内感染

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