何春梅
- 作品数：27 被引量：246H指数：9
- 供职机构：湖南大学生物医学工程中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部科学研究基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学一般工业技术理学更多>>
- 喉癌相关基因LCRG1蛋白的细胞亚定位及生物学特性研究被引量：6
- 2001年
- 目的:研究我们实验室最近克隆的喉癌相关基因LCRG1编码蛋白的细胞亚定位以及其是否具有抑瘤功能。方法:采用绿色荧光蛋白(GFP)荧光定位的方法,研究该基因编码蛋白的细胞亚定位;通过绘制细胞生长曲线,以及运用转染细胞软琼脂集落形成试验和裸鼠致瘤试验,研究喉癌相关基因LCRG1在喉癌细胞系Hep-2中的生物学特性。结果:喉癌相关基因LCRG1编码的蛋白定位在细胞核内;将LCRG1cDNA导入到不表达该基因的喉癌细胞系Hep-2中,观察到明显的生长抑制作用,表现为抑制Hep-2细胞的停泊非依赖性生长和抑制裸鼠致瘤性。结论:喉癌相关基因LCRG1具有一定的抑瘤功能。
- 李友军关勇军谢海龙陈主初何春梅段朝军
- 关键词：喉肿瘤生物学特性
- 肺癌组织和肿瘤细胞系中BRG1的表达分析被引量：10
- 2007年
- BRG1(brahma-related gene1)是进化上高度保守的SWI/SNF染色质重塑复合物的成员之一.研究表明:BRG1具有抑瘤基因的特征,可能与肿瘤的发生发展有关.我们采用RT-PCR、Northern杂交和Westernblotting证实:肺腺癌细胞系A549和鼻咽癌细胞系HNE2、HNE3、CNE1中无BRG1的表达,而肺鳞癌细胞系NCI-H520、永生化正常人支气管上皮细胞系HBE和鼻咽癌细胞系HONE1、HNE1、CNE2中有BRG1的表达.同时,通过RT-PCR检测10例肺癌组织标本,发现60%(6/10)的肺癌组织中BRG1的mRNA水平明显下调,而配对正常肺组织中BRG1的mRNA表达未见改变.对29例肺癌组织和10例配对正常肺组织切片进行免疫组化染色,结果显示:肺癌组织中BRG1蛋白表达的阳性率为37.9%(11/29),配对正常肺组织中BRG1蛋白表达的阳性率为90%(9/10),两者的差异有显著性(P<0.05).这提示BRG1确实在肺癌组织及多种肿瘤细胞系中表达下调或缺失,在肺癌发病过程中可能起一定的作用.
- 关勇军蔡秀梅李友军何春梅何琼琼程瑞雪陈主初
- 关键词：肺癌肿瘤细胞系
- 新型有机荧光染料嵌合的核壳荧光纳米材料的研制被引量：40
- 2003年
- 采用油包水的反相微乳液方法 ,首次以羊抗人免疫球蛋白 ( Ig G)标记的异硫氰酸荧光素 ( FITC)为核材料 ,成功地制备了 FITC的核壳荧光纳米颗粒 ,克服了采用传统方法制备核壳荧光纳米颗粒中存在的荧光染料泄露的问题 .制备的这种核壳荧光纳米颗粒比细胞小很多 ,且具有生物亲和性 ,可为纳米生物传感器件提供新型材料 .基于该核壳荧光纳米颗粒的标记方法也为生物医学提供了一种新型的非同位素分析方法 .
- 段菁华王柯敏谭蔚泓何晓晓何春梅刘斌李杜黄杉生羊小海莫远尧
- 关键词：核壳结构
- 人鼻咽癌细胞系HONE1的蛋白质双向凝胶电泳分析被引量：16
- 2001年
- 目的 :研究人鼻咽癌细胞系HONE1的蛋白质表达特征。方法 :抽提鼻咽癌细胞系HONE1总蛋白 ,双向凝胶电泳 (2 DE)分离、银染显色 ,用凝胶成像仪和PDQUEST软件获取HONE1总蛋白的 2 DE图像 ;根据获得的 2 DE凝胶图像 ,从胶上切取分辨良好、染色较浓的蛋白质点 ,用胰蛋白酶原位水解 ,所获酶解肽段经基质辅助激光解吸飞行时间质谱 (MALDI TOF MS)测定Mr;以测得的肽段Mr为肽质量指纹 (PMF) ,通过PepIdent软件搜索SWISS PROT和TrEMBL数据库而识别该点对应的蛋白质。结果 :建立了双向凝胶电泳分离总蛋白、质谱鉴定银染蛋白质点的方法 ,并鉴定出人鼻咽癌细胞系HONE1中表达较强的 10个点相应的蛋白质。结论 :本研究为建立人鼻咽癌细胞HONE1的 2 DE参考图和蛋白质数据库提供了有用的基础性研究资料 ,为进一步识别鼻咽癌特异性的蛋白质奠定了实验基础。
- 李峰关勇军谢锦云何春梅陈平陈主初梁宋平
- 关键词：鼻咽癌细胞系双向凝胶电泳蛋白质
- 加热联合维拉帕米对人舌癌耐药细胞株Tca8113/BLM耐药性的影响
- 2009年
- 目的研究加热(hyperthermia,HT)联合逆转剂维拉帕米(verapami,Vera)对人舌癌耐药细胞Tca8113和耐药细胞Tca8113/BLM耐药性的影响。方法采用MTT法检测40℃加热1h后联合Vera对人舌癌亲本细胞Tca8113和耐药细胞Tca8113/BLM化疗药物的敏感性;流式细胞仪(FCM)检测细胞内阿霉素(Doxorubicin ADM)浓度聚积以及细胞膜上P-gp和MRP的表达。结果与单独Vera作用细胞相比,加热40℃1h联合5μmol/LVera作用细胞后,Tca8113、Tca8113/BLM细胞的IC50显著下降(P<0.01),且各组之间差异均有显著性(P<0.01),ADM浓度在两种细胞中明显增加(P<0.01),细胞膜上的P-gp和MPR荧光强度显著下降(P<0.01)。结论加热联合Vera能更好提高细胞内药物浓度的聚积,降低细胞膜上的耐药蛋白P-gp和MRP的表达,逆转人舌癌耐药细胞Tca8113/BLM对BLM的耐药现象。
- 何春梅段朝军邓柯
- 关键词：维拉帕米P-GPMRP舌癌
- 吲哚美辛对结肠癌细胞CDK_2、CDK_4、p21^(WAF1/CIP1)、Bcl-2及Bax蛋白表达的影响被引量：17
- 2002年
- 目的 非甾体类抗炎药通过环氧合酶途径是抑制肿瘤的机制之一。是否还有其他途径抑制细胞增殖及诱导凋亡。探讨吲哚美辛抗肿瘤的作用机制 ,为其临床应用提供实验依据。方法 不同浓度的吲哚美辛作用于结肠癌细胞株HCT116细胞 2 4h ,通过Western蛋白印迹技术检测CDK2 、CDK4 、p2 1WAF1/CIP1、Bcl 2及Bax蛋白表达。结果 吲哚美辛降低细胞周期素依赖蛋白激酶CDK2 、CDK4 及抗凋亡蛋白Bcl 2的表达 ,上调细胞周期素依赖蛋白激酶抑制剂p2 1WAF1/CIP1蛋白 ,而对促凋亡蛋白Bax的表达无影响。结论 吲哚美辛通过降低CDK2 、CDK4 、Bcl 2蛋白 ,上调 p2
- 徐美华张桂英谢兆霞何春梅
- 关键词：吲哚美辛结肠癌细胞凋亡相关蛋白
- p53及p21^(waf1)蛋白表达与人舌癌细胞多药耐药性的关系被引量：6
- 2006年
- 目的探讨p53及p21waf1蛋白表达与人舌癌细胞系Tca8113多药耐药性(MDR)的关系。方法采用脂质体介导的转染技术,将野生型p53(wt-p53)基因导入人舌癌耐药细胞系Tca8113/BLM;分子信标(Molecular Beacon)法检测人舌癌细胞系Tca8113及其耐药细胞系Tca8113/BLM中p53基因的mRNA水平;W estern blot检测亲本、耐药细胞和转染细胞中p53、p21waf1、P-gp和MRP蛋白的表达变化;MTT法检测不同细胞的药物敏感性,流式细胞仪检测细胞周期的改变,激光共聚焦显微镜观察细胞凋亡。结果在人舌癌耐药细胞系Tca8113/BLM中p53基因的表达明显下调,并且未检测到p21waf1蛋白的表达;转染了wt-p53的耐药细胞Tca8113/BLM/p53中p53和p21waf1蛋白表达均显著上调,而P-gp和MRP的蛋白表达则明显下调,其对药物BLM的敏感性增加10.1倍(P<0.01);转染细胞的周期也发生改变,G2期细胞增加,G1和S期细胞减少,转染细胞明显出现凋亡。结论人舌癌耐药细胞系Tca8113/BLM多药耐药性的产生,可能通过p53和p21waf1的表达下调使得多药耐药性相关蛋白P-gp和MRP表达上调来实现。
- 何春梅刘斌王柯敏唐红星何丽芳李惠敏
- 关键词：舌肿瘤蛋白质P53
- BRG1在肺癌组织和肿瘤细胞系中表达下调原因初探
- 2007年
- 前期的研究表明:在肺癌及多种肿瘤细胞系中,BRG1(brahma-related gene 1)的mRNA和蛋白质表达下调或缺失,但影响BRG1表达下调的原因并不清楚.因此,用PCR-SSCP(single strand conformation polymor-phism)方法检测18例肺癌组织和15株肿瘤细胞系DNA,并经测序证实:其中有1例肺癌组织的BRG1外显子25第3590位碱基存在T→C的点突变,其编码的BRG1蛋白第1171位氨基酸相应地由Val(缬氨酸)→Ala(丙氨酸),该突变位于BRG1蛋白最重要的功能区(依赖DNA的ATP酶区),提示BRG1突变在肺癌发生中可能起一定的作用.同时,对未检测到BRG1mRNA表达的6例肺癌组织和9株肿瘤细胞系还进行了DNA甲基化分析,结果发现:这些肺癌组织和肿瘤细胞系中BRG1启动子区均无异常甲基化.这说明BRG1在肺癌中表达下调的机制尚需进一步研究.
- 关勇军蔡秀梅李友军何春梅陈主初
- 关键词：肺癌突变检测甲基化分析
- 肺癌相关基因HLCDG1的克隆和表达分析被引量：6
- 2003年
- 背景与目的:比较基因组杂交和微卫星多态性位点全基因组扫描结果显示肺癌患者在染色体3p、5q、6q、9p、10q、11p、13q、17p、19p等区域存在高频率的杂合性缺失,提示可能有多个未知的易感基因或抑癌基因与肺癌的发生、发展相关。本研究选用在mRNA差异显示研究中获得的在肺癌组织中表达下调且代表新基因的表达序列标签(expressedsequencetag,EST)LXDD1为进一步研究对象,克隆其全长cDNA。方法:采用Northern杂交验证LXDD1在肺癌中的表达差异,并用MTN(MultipleTissueNorthernBlotsTM)膜检测其在正常组织中的表达及其所代表基因的转录本大小;克隆其全长cDNA,并利用生物信息学对该序列进行初步分析;用差异RT-PCR检测新基因在肺癌组织、配对癌旁非癌组织、肺癌细胞系和其它肿瘤细胞系中的表达。结果:成功地克隆了一个在肺癌中表达下调的新基因HLCDG1(humanlungcarcinomadeletedgene1),GenBank登录号为AF447582,全长cDNA为3.113kb,预测其开放阅读框编码一个含166个氨基酸的跨膜蛋白质,通过电子-聚合酶链反应(electric-polymerasechainreaction,e-PCR)将该基因定位于5q33。结论:HLCDG1基因是一个在肺癌中表达下调的新基因,这提示HLCDG1可能与肺癌的发生、发展相关。
- 谢海龙陈主初何春梅李友军邹飞雁关勇军
- 关键词：肺癌基因克隆基因表达基因组杂交微卫星基因多态性
- 肿瘤坏死因子、干扰素在舌癌细胞体外化、放疗中的协同作用研究被引量：2
- 2001年
- 目的 观察肿瘤坏死因子 (TNF)、干扰素 (IFN)在舌癌综合治疗中的地位及可行性 ,探讨舌癌治疗的新途径。方法 采用MTT法检测TNF ,IFN对舌鳞状细胞癌 (Tca8113)细胞株的体外抑制作用及其对化、放疗的影响。结果 ⑴TNF ,IFN对Tca8113的抑制作用均存在明显的量效关系 ,二者合用时抑制作用比单用时明显增加 (P <0 0 5 ) ;⑵TNF ,IFN能明显增强低剂量Taxol、DDP、PLM等化疗药物对Tca8113的生长抑制作用 (P <0 0 5 )或P <0 0 1) ;⑶TNF能增强 2～ 8Gy放疗剂量下对Tca8113杀伤作用 (P <0 0 1)。结论 TNF、IFN可能提高舌癌 (Tca8113)化、放疗效果 ,降低其毒性 ,在舌癌的综合治疗中存在广阔的应用前景。
- 欧新荣沈子华贺智敏何春梅
- 关键词：舌癌放疗
