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刘云海: 作品数：103 被引量：220H指数：7; 供职机构：北京农学院动物科学技术学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金北京市教育委员会科技发展计划北京市教育委员会科技发展计划面上项目更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生哲学宗教更多>>

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不同发情阶段的绵羊血清对绵羊精子获能和体外受精的影响被引量：1: 2009年; 为比较不同发情阶段和不同浓度的绵羊血清在绵羊体外受精过程中对绵羊精子体外获能及存活时间、受精效果的影响,试验以绵羊输卵管合成液(SOF)为基础获能液,在其中分别添加发情当天、发情结束和发情间期的绵羊血清,血清浓度分别为0%、2%、5%、10%和20%。利用金霉素荧光染色(CTC,chlortetracycline)法及体外受精2种方法检测不同血清及其浓度对绵羊精子获能的影响。结果表明:1)当在获能液中添加发情当天绵羊血清时,在10%和20%血清浓度下作用45 min的获能效果最好,其获能而且未完成顶体反应的精子率(45.28%和44.52%)显著高于0%、2%和5%血清浓度组(30.14%、28.71%和35.49%,P<0.05);2)当在获能液中添加发情结束时或发情间期的绵羊血清时,在含不同浓度的这2种血清的获能液中作用45 min后,各浓度组引起的获能精子百分率变化均不显著(P>0.05);3)在含20%发情当天绵羊血清的获能液中,精子的存活时间(18 h)显著高于含20%发情结束和发情间期的绵羊血清的获能液(11 h;11 h);4)在不同血清诱导获能后进行的体外受精的试验中,添加发情当天绵羊血清组的卵裂率和囊胚率(62.5%和26.25%)均显著高于发情结束时血清组(42.22%和11.11%,P<0.05)和发情间期血清组(37.36%和15.38%,P<005)。以上结果表明:在进行绵羊体外受精试验中,采用20%发情当天绵羊血清作用45 min比采用发情结束和发情间期的绵羊血清能更好地诱导精子获能。; 刘烈琴刘云海郭勇杨飞鸽倪和民; 关键词：绵羊精子获能体外受精

冻融后小鼠休眠胚胎超微结构的变化被引量：5: 2014年; 目的从亚细胞超微结构的角度揭示其抗冻能力优于正常孵化胚胎的原因。方法利用透射电子显微镜观察小鼠休眠胚胎与正常孵化期胚胎在细胞连接和各细胞器形态与分布上的差异,以及冻融培养后的变化,并进行相关比较分析。结果通过亚细胞结构对比分析发现:冷冻前小鼠休眠胚胎为紧缩状,处于能量代谢较低的"基态",通过冻融后培养,细胞器结构恢复与正常孵化胚胎冷冻前相似;而正常孵化胚胎经过冻融后,线粒体数量减少,细胞核松散,异染色质增多。结论小鼠休眠胚胎与正常孵化胚胎冻融后相比,其细胞状态更有利于物质储存及能量代谢,表明小鼠休眠胚胎从亚细胞超微结构的角度比其正常孵化胚胎更具抗冻性。; 顾美超卢天罡刘云海倪和民张劭俣翟椿东邢书涵郭勇; 关键词：小鼠超微结构冻融

影响绵羊胞质内单精子注射结果相应因素的分析: 2013年; 本实验探讨了绵羊卵母细胞成熟以及胞质内单精子注射的相应影响因素,以期优化绵羊ICSI的操作技术和体外成熟体系。本研究分别设定3组卵母细胞成熟时间（19~21 h,23~25 h,28~30 h）,同时比较6、12点和7、11点注射位置对胞质内单精子注射后胚发育的影响。结果表明,绵羊卵母细胞在成熟23~25 h之间进行单精子注射后,其囊胚率显著高于19~21 h和28~30 h[（6.30±0.59）%vs（4.05±0.63）%,（3.59±0.29）%],研究注射位置对胚胎发育影响时研究结果显示,在6、12点注射后其胚胎的卵裂率（54.17±3.24）%vs（46.40±3.22）%和囊胚率（5.88±0.30）%vs（2.77±0.15）%均明显高于7、11点。因此,应尽量使用成熟23~25 h的绵羊卵母细胞进行胞质内单精子注射,同时注射时应选择6、12点的位置,从而利于胚胎的后期发育。; 朴学娇郑雪莹曹玉桃张帆翟春东刘云海倪和民郭勇; 关键词：体外成熟胞浆内单精子注射胚胎发育

PMSG和FSH同期发情处理对小鼠子宫、卵巢和输卵管中雌激素α受体分布的影响被引量：1: 2010年; 目的从雌激素α受体(estrogen receptorα,ERα)的角度探讨孕马血清促性腺激素(pregnant mareserum gonadotropin,PMSG)和促卵泡激素(follicle-stimulating hormone,FSH)处理小鼠的卵巢、输卵管和子宫中,ERα分布是否有显著性差异。方法 10只8周龄母鼠,随机分为处理方式不同的两个组:PMSG组和FSH组,两组均在处理第48小时取其卵巢、输卵管和子宫样固定,采用免疫组织化学法分别观察组织中ERα分布情况。结果免疫组化结果显示,两个处理组小鼠卵巢、输卵管和子宫内膜的细胞中都有ERα表达;PMSG处理组卵巢中的初级卵泡和成熟卵泡上ERα阳性率和平均吸光度均显著高于FSH处理组;FSH处理组的输卵管中ERα阳性率和平均吸光度均高于PMSG处理组;FSH处理组子宫基质和腺上皮细胞中ERα的阳性率显著高于PMSG组,其中PMSG组基质中的平均吸光度显著高于FSH组,而子宫内膜上皮细胞的阳性率和平均吸光度两处理组间差异无显著性。结论 PMSG和FSH同期发情诱导由于其特性可不同程度地影响小鼠卵巢、输卵管和子宫中ERα的分布,使之在不同组织中产生差异性变化。; 林自力高雅邓桂馨梁鸿斌张鸿波刘云海倪和民郭勇王志刚; 关键词：小鼠卵巢输卵管子宫

冷冻速率和解冻温度对猪精液冷冻效果的影响被引量：11: 2012年; 为优化冷冻和解冻方法,提高冷冻效果,本试验比较了不同冷冻速率(-100℃10min、-120℃10min、-140℃10min)和不同解冻温度(37℃30s、45℃30s、52℃30s、60℃30s)对猪精液冷冻效果的影响。结果表明,采用-120℃熏蒸10min,解冻后精子活力为0.36,质膜完整率和顶体完整率也优于其他2组,且差异显著(P<0.05)。采用37℃30s方法解冻,精子活力、质膜完整率显著高于其他3组,顶体完整率也高于其他3组,但差异不显著(P>0.05),其畸形率最低和60℃30s组差异明显(P<0.05),但与45℃30s组和52℃30s组差异不显著(P>0.05)。因此,采用-120℃平衡10min冷冻,37℃30s水浴解冻方法更为适合0.25mL细管猪冻精解冻。; 梁鸿斌姚学军李维华邵慧朱金清邬纯鸿倪和民刘云海郭勇; 关键词：精液冷冻体外受精

利用超数排卵方法高效获取小鼠休眠胚胎被引量：3: 2007年; 目的为提高小鼠休眠胚胎的制备效率,尝试用超数排卵方法获取小鼠休眠胚胎。方法超排小鼠在注射孕马血清促性腺激素(PMSG)后,按照是否注射抗孕马血清(anti-PMSG serum或A-PMSG)以及注射的不同时间分为5组:在母鼠合笼前注射A-PMSG、在母鼠见栓后注射A-PMSG、在见栓第四天卵巢摘除手术后注射A-PMSG、不注射A-PMSG的超排组和不超排组。结果见栓后注射抗PMSG组的平均出胚数(9.4枚/只)最高,显著高于其他实验组。结论常规超排处理结合注射抗PMSG血清法能有效提高小鼠休眠胚胎的回收率。; 芦天罡倪和民曲杨燕赵雁伟张鸿波邵丹华刘云海; 关键词：小鼠超排卵

FSH对绵羊卵母细胞体外核成熟的影响被引量：13: 2008年; 为了探讨FSH对绵羊卵母细胞核成熟的影响,本试验将绵羊卵母细胞体外成熟24 h,并在成熟过程中的4个不同时间段内添加FSH,统计各个时间段卵母细胞的生发泡破裂（germinal vesicle break down,GVBD）及第一极体排出情况。结果显示：①在体外成熟培养的前4 h或前8 h添加FSH,经体外成熟的卵母细胞其生发泡破裂率与不添加FSH组无显著差异;②在体外成熟的4-24 h或8-24 h添加FSH,其第一极体排出率与不添加FSH组有极显著差异。说明,在本试验条件下,FSH对绵羊卵母细胞体外成熟具有显著的促进作用,是在减数分裂的恢复后到减数分裂完成之间的某一阶段起的促进作用。; 曲杨燕赵雁伟李凯刘云海郭勇倪和民; 关键词：绵羊卵母细胞 FSH 体外成熟

小鼠休眠胚胎与正常胚胎冻融后体内外发育潜力的比较: 2019年; 目的检验小鼠休眠胚胎冻融后的质量及体内外发育潜力,为胚胎休眠技术的生产应用提供必要的参考。方法采用常规冷冻方法将正常孵化期胚胎和休眠胚胎进行冷冻,之后分别进行体外复苏培养实验和胚胎移植实验。随后利用双重荧光染色的方法分别对冻融前后的小鼠休眠胚胎与正常孵化期胚胎进行细胞计数,观察两种胚胎冻融前后的质量变化。结果休眠胚胎的冷冻解冻回收率、发育率均极显著高于孵化期胚胎(72.1%vs 50.2%,P<0.01;94.2%vs 73.9%,P<0.01)。休眠胚胎的移植妊娠率显著高于孵化期胚胎(40.8%vs 30.1%,P<0.05)。休眠胚胎的内细胞团细胞数显著高于孵化期胚胎(27.83 vs 19.53,P<0.05),滋养层细胞数差异不显著。冻融培养后休眠胚胎的内细胞团数,滋养层细胞数均显著高于孵化期胚胎(25.18 vs 14.68,P<0.05;114.09 vs 73.88,P<0.05)。结论小鼠休眠胚胎冻融后胚胎质量及体内外发育潜力均优于小鼠正常孵化期胚胎。; 陈超磊芦天罡倪和民盛熙晖王相国齐晓龙邢凯刘云海郭勇; 关键词：胚胎冷冻胚胎移植小鼠

孕酮对绵羊精子体外获能的影响: 本文为了探讨孕酮对绵羊精子体外获能的影响,将绵羊精子分别加到含不同浓度(1、5、10μmol/L)孕酮的输卵管合成液(SOF)中,作用不同时间后分别取出部分精子样本进行金霉素荧光染色(Chlortetracycline,...; 薛君忠刘云海郭勇刘烈琴张宏杨飞鸽倪和民; 关键词：精子获能孕酮; 文献传递

3个品种绵羊超数排卵处理后卵巢上促黄体素受体表达差异的研究被引量：6: 2011年; 本研究旨在探讨在具有不同超数排卵效果的绵羊品种中,在进行超排处理后其卵巢上的促黄体素受体(LH receptor,LHR)分布情况,为进一步研究二者的相关性以及据此为改进超排效果奠定基础。根据超数排卵效果的优劣依次选择3个我国地方绵羊品种:小尾寒羊、白滩羊和乌珠穆沁羊。在常规超排最后一次注射FSH后的8、16和24h分别各取3只绵羊的卵巢,采用免疫组织化学法观察3个品种绵羊卵巢上LHR的分布情况。结果表明:LHR存在于3个地方品种绵羊卵巢有腔卵泡的颗粒细胞和膜细胞上,但在早期卵泡上不表达;各品种绵羊的近成熟卵泡上LHR阳性细胞率都显著高于相应的次级卵泡(P<0.05);3品种绵羊近成熟卵泡中LHR的阳性变化率存在显著差异,从高到低依次为小尾寒羊>白滩羊>乌珠穆沁羊(P<0.05)。籍此可以得出以下结论:LH对绵羊早期卵泡发育的诱导可能不需要通过其特异性受体起作用;3品种绵羊近成熟卵泡中LHR的阳性变化率与超排效果是一致的,表明超数排卵的效果可能与绵羊卵巢上的LH受体分布存在一定的联系。; 倪和民张鸿波刘云海邓桂馨芦天罡郭勇; 关键词：绵羊超数排卵免疫组织化学染色

刘云海

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