刘建青
- 作品数:23 被引量:40H指数:3
- 供职机构:包头师范学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金内蒙古自治区高等学校科学研究项目内蒙古自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生文化科学化学工程更多>>
- 雌二醇完全抗原及多克隆抗体的制备被引量:5
- 2012年
- 目的改造雌二醇半抗原,合成雌二醇完全抗原,并经免疫家兔得到抗雌二醇多克隆抗体,为建立雌二醇的酶联免疫吸附方法及其在动物性食品安全快速检测中的应用奠定基础。方法改造雌二醇-3-羧甲基醚(E2-3-CME),碳二亚胺(EDC)法合成免疫原(E2-BSA)和包被原(E2-OVA),采用SDS-PAGE电泳和质谱(MS)对其鉴定,免疫家兔2只,制备多克隆抗体;间接ELISA测定效价、灵敏度和特异性。结果成功合成雌二醇免疫原和包被原,6次免疫后E2-T1和E2-T2抗血清的效价分别达到1∶128 000和1∶32 000,E2-T1抗体和E2-T2抗体的半数抑制浓度(IC50)分别为44.00 ng/ml和45.59 ng/ml,与雌二醇类似物没有明显交叉反应。结论合成的雌二醇完全抗原具有较好的免疫原性,产生的抗雌二醇多克隆抗体具有较好的特异性。
- 陈翠翠刘建青吕志强周彩虹刘晶柳明宁保安高志贤
- 关键词:雌二醇
- 大肠杆菌O157志贺毒素1胶乳凝集试剂的研制被引量:2
- 2006年
- 根据大肠杆菌933W志贺毒素1(STX1)基因的序列,设计合成寡核苷酸引物,以国内分离的大肠杆菌O157菌株94H的DNA为摸板,经PCR扩增志贺毒素1A亚基基因,扩增的基因克隆到原核表达载体pET-28a,在E.coliBL21中进行表达。用表达的STX1A产物免疫兔子,制备STX1A抗血清,从中提取IgG。合成胶乳,用提取的IgG与胶乳交连反应,研制出了敏感和简便的检测大肠杆菌O157STX1产生的胶乳检测试剂。
- 刘建青周志江韩烨郑峰薄清如
- 关键词:大肠杆菌O157A亚基原核表达
- 百草枯完全抗原及多克隆抗体的制备被引量:5
- 2014年
- 目的改造百草枯(Paraquat PQ)半抗原,制备百草枯完全抗原及多克隆抗体,为建立酶联免疫吸附方法及其在食品安全快速检测中的应用奠定基础。方法改造半抗原PQ-hap,混合酸酐法合成免疫原(PQ-BSA)和包被原(PQ-OVA),采用SDS-PAGE电泳和质谱对其鉴定,免疫家兔2只,制备多克隆抗体;间接ELISA对其进行效价、灵敏度和特异性检测。结果成功合成百草枯免疫原和包被原,6次免疫后2只家兔血清的效价分别达到1∶40 000和1∶160 000,抗体的半数抑制浓度(IC50)分别为281.6 ng/ml和98.4 ng/ml,与百草枯类似物没有明显交叉反应。结论合成的百草枯完全抗原具有较好的免疫原性,产生的抗百草枯多克隆抗体具有较好的灵敏度和特异性。
- 刘建青白家磊孙思明吕志强宁保安高志贤
- 关键词:百草枯多克隆抗体特异性
- Lipocalin核糖体展示文库的构建及雌二醇特异性模拟抗体的筛选
- 2013年
- [目的]构建Lipocalin核糖体展示文库,并筛选雌二醇特异性模拟抗体。[方法]以Lipocalin蛋白家族中的BBP(胆汁三烯结合蛋白)为模板,设计包含16个随机突变位点的引物,合成BBP基因文库;引入核糖体展示所必需的全部组件,采用重叠PCR技术将BBP库与核糖体展示组件进行拼接,构建核糖体展示Anticalin模拟抗体库;再将构建的Anticalin文库进行体外转录与翻译,产生模拟抗体-核糖体-mRNA三联复合体文库。以小分子抗原雌二醇为靶标,采用固相亲和方法筛选抗雌二醇抗体,通过改变Mg2+浓度将模拟抗体-核糖体-mRNA三联复合体解离,得到与模拟抗体对应的mRNA,经过RT-PCR得到筛选后的DNA文库并重新引入核糖体展示元件进行下一轮淘筛。[结果]通过5轮生物淘筛,模拟抗体得到富集,获得高特异性抗雌二醇抗体。其中有一株克隆的亲和力为54 mmol/L(Kon=4.975 6×104个/M·S;Koff=0.002 7个/S)。IC50与LOD值分别为50和0.071 ng/ml。[结论]获得的雌二醇模拟抗体可以作为抗体并用于检测动物体内雌二醇的残留。
- 刘建青宁保安高志贤
- 关键词:雌二醇核糖体展示
- 一种β-雌二醇模拟抗体的制备方法及其用途
- 本发明涉及一种β-雌二醇模拟抗体的筛选方法及其应用,属于生物技术领域,该模拟抗体是由核糖体展示anticalin模拟抗体库中筛选出来的并进行了可溶性功能表达。本发明还涉及应用核糖体展示技术筛选雌二醇模拟抗体的方法。本发明...
- 宁保安刘建青彭媛孙亚楠白家磊柳明高志贤孙思明
- 文献传递
- 发酵球藻对蛋鸡生产性能、肝脏脂质和肠道菌群的影响被引量:1
- 2020年
- 本研究旨在考察日粮添加不同水平的发酵球藻对蛋鸡生产性能、蛋品质、肝脏脂肪组成及肠道微生物菌群的影响。试验选择504只产蛋率一致的80周龄海兰褐壳蛋鸡,随机分为3组,每组6个重复,每个重复28只鸡,各处理分别在基础日粮中添加0、500和1000 mg/kg的发酵球藻,试验共进行42 d。结果:日粮添加不同水平的发酵球藻对蛋鸡平均日采食量、产蛋率、平均蛋重和蛋重无显著影响(P>0.05),但随着日粮发酵球藻添加水平的升高,蛋黄颜色和哈夫单位表现为显著线性升高(P<0.05)。日粮添加不同水平的发酵球藻对肝脏、脾脏、腹脂相对重量及血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性无显著影响(P>0.05)。随着日粮球藻添加水平的升高,肝脏游离胆固醇含量有线性降低趋势(P=0.06),而肝脏甘油三酯含量随日粮发酵球藻添加水平的升高表现为显著线性降低(P<0.05)。盲肠乳酸杆菌数量随发酵添加水平的升高表现为显著线性和二次曲线升高(P<0.05)。结论:发酵球藻对蛋鸡产蛋率、蛋黄颜色、哈夫单位单位、肝脏甘油三酯含量均有改善作用,并对盲肠菌群有积极影响。
- 刘建青孔垚张爱琳
- 关键词:蛋鸡
- 一种化学检测试剂盒
- 本发明属于化学检测技术领域,具体涉及一种化学检测试剂盒,包括盒体,所述盒体内设置有第一隔板,第一隔板将盒体内部划分为试剂存储区和加样反应区;加样反应区内包括溶解区和混合区;溶解区设置有置物件,以置物件为中心,在溶解区的侧...
- 刘建青张爱琳张欣
- 一种农药兽药残留检测试剂盒
- 本实用新型公开了一种农药兽药残留检测试剂盒,涉及农药检测技术领域。本实用新型包括试剂盒本体和试剂架,试剂盒本体内壁的两侧面设置有限位槽,限位槽内安装有限位块,限位块连接有置物板,置物板上表面设置有滑槽和竖板,滑槽内安装有...
- 刘建青张爱琳
- 芦荟提取液抑菌效果的研究被引量:3
- 2015年
- 对芦荟提取液的抑菌作用进行初步研究,结果表明:芦荟提取液对供试的几种主要危害食品卫生、安全和对临床医学等具有重要影响的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的生长均有一定抑制作用,但在杀菌实验中,芦荟的提取液对上述几种菌均无明显的杀菌效果。在不同浓度的抑菌效果中,30%的芦荟提取液对供试菌种的抑制效果最强,对供试菌种的最低抑菌浓度金黄色葡萄球菌为10%;大肠杆菌为9%;枯草芽孢杆菌为11%。芦荟提取液能耐受高温短时的热处理。
- 刘建青周志江
- 关键词:抑菌圈抑菌效果
- 初中生物实验教学现状调查及对策——以山东省郓城县为例被引量:13
- 2020年
- 文章以山东省郓城县两所中学的师生为调查对象,采用了文献研究法和问卷调查法,分析了初中生物实验教学现状,然后阐述了初中生物实验教学策略,包括教育主管部门和学校加强重视、教师应转变生物实验教学观念、学生转变思想观念等。
- 马宏妍仝倩孙垚刘建青
- 关键词:初中生物实验教学实验室