周亚竟
- 作品数：12 被引量：14H指数：2
- 供职机构：江苏大学生命科学研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 跨损伤合成途径中真核生物DNA聚合酶δ转换机制的研究进展被引量：1
- 2018年
- 为维护染色体结构的完整性和遗传稳定性,除了各种分工明确的损伤修复途径外,细胞还进化出一种跨损伤修复的损伤耐受机制,涉及一种被广为深入研究的有错跨损伤合成途径,即通过低保真跨损伤合成聚合酶临时取代复制聚合酶Polδ,旁路通过受损碱基,使DNA损伤导致S-期暂停的复制叉进程得以恢复,这种复制聚合酶与跨损伤合成聚合酶之间的转换构成了有错跨损伤修复途径的核心,但对该途径聚合酶转换的激活机制存在争议。就真核生物DNA聚合酶δ的结构和功能以及在跨损伤合成途径聚合酶转换的激活机制等方面进行综述。
- 陈炜周亚竟
- 关键词：泛素化修饰
- 应用昆虫激素提高昆虫杆状病毒系统外源基因的表达量
- 本发明提供一种利用昆虫激素提高昆虫/杆状病毒表达系统外源基因表达效率的方法，包括应用昆虫蜕皮激素(MH)、昆虫保幼激素(JH)及蜕皮激素MH和保幼激素JH的联合使用以提高外源基因和多角体蛋白基因在昆虫/杆状病毒表达系统中...
- 张志芳何家禄王厚伟肖庆利李卫国周亚竟
- 文献传递
- 哺乳动物DNA聚合酶δ分离纯化研究进展被引量：1
- 2020年
- 哺乳动物DNA聚合酶δ(DNA polymeraseδ,Polδ)是由p125、p68、p50及p124个亚基组成的异源四聚体,具有5′-3′聚合酶活性和3′-5′核酸外切酶活性,在染色体DNA复制和多种DNA损伤修复过程中起着关键作用。自1976年首次从兔的骨髓红细胞质中分离出Polδ以来,相继从小牛胸腺和多种哺乳动物细胞中分离纯化出Polδ酶复合物,但其纯化过程极其烦琐,操作周期长,得率低,且难以获得具有生物活性的Polδ多亚基蛋白复合体,严重阻碍了对哺乳动物Polδ酶学特性的后续研究。随着昆虫-杆状病毒表达系统的发展和完善,近期利用该系统成功制备了重组真核生物Polδ多亚基蛋白复合体,极大地方便了对该酶的酶学及生化特性的研究。就国内外DNA聚合酶δ分离纯化及其多亚基复合体制备的研究进展进行简要综述。
- 杨玉龙周亚竟
- 关键词：DNA聚合酶Δ分离纯化
- 昆虫激素与CTAB对杆状病毒复制和相关基因启动子活性的影响
- 该文应用杆状病毒表达载体系统(BEVS)和瞬间表达分析系统(TRANSIENT EXPRESSION ASSAY SYSTEM),通过向感染了野生型或重组杆状病毒、或转染了含受控于家蚕杆状病毒极早期基因IE-1启动子的荧...
- 周亚竟
- 关键词：昆虫细胞家蚕启动子
- 文献传递网络资源链接
- 应用昆虫激素提高昆虫杆状病毒系统外源基因的表达量
- 本发明提供一种利用昆虫激素提高昆虫/杆状病毒表达系统外源基因表达效率的方法，包括应用昆虫蜕皮激素(MH)、昆虫保幼激素(JH)及蜕皮激素MH和保幼激素JH的联合使用以提高外源基因和多角体蛋白基因在昆虫/杆状病毒表达系统中...
- 张志芳何家禄王厚伟肖庆利李卫国周亚竟
- 文献传递
- 人源DNA聚合酶Pol δ小亚基p12的抗体制备及应用
- 2012年
- 人源DNA聚合酶δ(Polδ)是由p125、p50、p68和p12四个亚基组成的异源四聚体,小亚基p12在Polδ参与DNA复制与损伤修复过程中起着至关重要的作用。为了获得具有高度特异性和灵敏性的抗p12抗体,利用PCR技术成功扩增p12基因,通过酶切、连接、转化等常规分子克隆方法构建重组原核表达质粒pGEX-5X-3-p12,经转化大肠杆菌BL21,诱导表达的可溶性融合蛋白经Glutathione Sepharose 4B柱和FPLC Mono Q柱纯化、Factor-Xa酶切,获得不带GST标签的p12蛋白作为抗原;免疫新西兰大白兔制备抗血清并用Protein A/G亲和层析柱纯化多克隆抗体。经Western blot和细胞免疫荧光分析测试,所获得的抗体不但能够特异性识别细胞内源p12,而且观察到p12能够与PCNA共定位到DNA复制叉,首次在亚细胞水平上证明了p12与PCNA的粘连互作反应。高度特异和灵敏的抗p12抗体的获得为深入研究小亚基p12如何调控Polδ的酶学功能、为从人类癌症发病的起因上阐明由于Polδ功能改变而引起遗传基因组不稳定进而导致肿瘤发生的机制提供了重要的手段。
- 李骁刘留张磊周亚竟
- 关键词：DNA聚合酶Δ蛋白纯化PCNA
- 人源DNA聚合酶δ研究进展
- 2013年
- 在真核生物染色体DNA复制过程中主要涉及三种DNA聚合酶:α(Polα),δ(Polδ)和ε(Polε)。人源DNA聚合酶δ是p125,p68,p50,p12四个亚基构成的异源四聚体,属于DNA聚合酶B家族,具有5’-3’聚合酶催化活性和3’-5’核酸外切酶活性,是染色体DNA复制过程中最主要的复制酶,同时还参与多种形式的损伤修复,在保证基因组结构的完整性和遗传稳定性方面具有重要的意义。由于其重要的生物学功能,目前引起人们更多的关注和重视。对人源DNA聚合酶δ的分离纯化方法及涉及DNA复制和损伤修复过程中酶学功能等方面的最新研究进展进行综述。
- 张磊陈慧卿周亚竟
- 关键词：DNA聚合酶Δ分离纯化DNA复制DNA损伤修复
- 家蚕杆状病毒DNA聚合酶在Bac-to-Bac系统的表达及活性检测
- 2016年
- DNA复制是杆状病毒生活史中最重要的事件,其中DNA聚合酶是病毒复制过程的关键酶。从家蚕杆状病毒(Bm NPV)基因组PCR扩增获得DNA聚合酶基因Bm NPV-pol的序列,利用Bac-to-Bac系统构建重组杆状病毒v Bm NPV-POL,并感染家蚕5龄幼虫,通过SDS-PAGE和Western blotting检测重组Bm NPV-POL蛋白在蚕体内成功表达,经Ni-NTA柱纯化获得了纯度较高的重组Bm NPV-POL蛋白。以poly(d A)/oligo(d T)为模板,比较在原核细胞和家蚕杆状病毒表达系统获得的重组Bm NPV-POL蛋白的酶活性,结果表明在家蚕幼虫体内表达并纯化的重组Bm NPV-POL的酶活性明显较高。利用家蚕杆状病毒表达系统简便、快速获得重组Bm NPV-POL蛋白,有助于后续对Bm NPV复制机制的研究。
- 陈慧卿楚茨周亚竟
- 关键词：DNA聚合酶重组蛋白酶活性
- 利用家蚕生物反应器生产广适性、高比活植酸酶和酸性磷酸脂酶的方法
- 本发明提供一种利用重组杆状病毒在昆虫体内表达、生产广适性、高比活植酸酶appA方法，包括：广适性、高比活植酸酶基因与杆状病毒载体进行重组；用重组病毒感染昆虫宿主；被感染的昆虫宿主进行植酸酶和酸性磷酸脂酶的表达；收集含植酸...
- 张志芳何家禄姚斌周亚竟陈寅易咏竹
- 文献传递
- 家蚕肠液对昆虫杆状病毒感染性的影响被引量：5
- 2002年
- 用电击法取 5龄第 4天的家蚕肠液 ,加入家蚕核多角体病毒 (BombyxmoriNucleopolyhedrosisVirus)和宿主域扩大的苜蓿尺蠖核多角体病毒 (HybridAutographacalifornicaNucleopolyhedrosisVirus)的多角体或游离病毒粒子 ,分别作用 70min和 4 0min后 ,感染家蚕细胞Bm 5和秋粘虫细胞Sf 2 1,发现病毒粒子已经被家蚕肠液灭活。进一步用BmNPV多角体喂饲 2龄蚕后 ,收集 2 4h内的蚕粪 ,用培养基浸泡后 ,抽提液中亦不含有具感染性的病毒粒子。上述结果说明家蚕肠液对昆虫杆状病毒的病毒粒子具有很好的灭活作用。因而 ,在家蚕核多角体病毒病预防上 ,提高蚕的健康水平、注意起蚕处理和饲养密度、及早发现和隔离病蚕是有效的防治措施。
- 易咏竹周亚竟张志芳林旭瑷何家禄
- 关键词：家蚕肠液昆虫杆状病毒感染性血液型脓病
