夏铁安
- 作品数：82 被引量：994H指数：16
- 供职机构：北京大学第一医院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 健康人群血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C与肌酐分布及其评价慢性肾脏病患者肾小球滤过功能的比较研究被引量：180
- 2006年
- 目的建立人半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（Cystatin C）和血肌酐（Scr）的参考值，比较两者与^99mTc-DTPA清除率测定的肾小球滤过率（GFR）的相关性及其在诊断慢性肾脏病（CKD）患者肾小球滤过功能下降中的敏感度和特异性。方法研究对象包括1201名健康人和265例CKD患者。血清Cystatin C采用颗粒增强散射免疫比浊法测定，Scr采用苦味酸动力学法测定，以^99mTc-DTPA清除率测得的GFR作为评价的金标准，用受试者工作特征（ROC）曲线评价两指标检测肾小球滤过功能下降的敏感度和特异度。结果健康人群血清Cystatin C、Scr各年龄组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。以99％双侧范围为标准，Cystatin C的参考值范围：男性为0．60～1．02mg/L，女性为0．47～0．97mg/L；Scr的参考值范围男性为63～110μmol／L，女性为53～93μmol／L。265例慢性肾脏病患者相关分析结果显示Cystatin C与金标准的相关系数（r=-0．660，P〈0．001）大于Scr的相关系数（r=-0．534，P〈0．001）。不同CKD分期结果显示在GFR正常（≥80ml／min）时，Cystatin C已经有42．2％的异常，Scr的异常率仅为13．3％，轻、中度下降期Cystatin C诊断GFR下降的敏感度均优于Scr。ROC曲线分析显示Cystatin C、Scr的曲线下面积（AUC）分别为0．907、0．862，两者差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论Cystatin C可准确反映肾脏滤过功能的改变，与Scr相比其对肾小球滤过功能受损的诊断具有理想的敏感度和特异度，推荐作为反映GFR的新的内源性检测指标。
- 李海霞张春丽徐国宾王学晶李淑葵李志艳张旭初夏铁安
- 关键词：半胱氨酸蛋白酶抑制剂肾小球滤过率
- 人肌酸激酶MM同工酶在大肠杆菌中的高效可溶性表达及纯化研究被引量：6
- 2006年
- 目的构建肌酸激酶MM同工酶原核表达系统,纯化重组酶蛋白并对其稳定性进行研究,为其作为参考品或校准品应用于临床奠定基础。方法提取胎儿心肌组织总RNA,反转录扩增人肌酸激酶M亚基基因,构建pET-15b-CK、E.coliBL21(DE3)pLysS原核表达系统,以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达。利用重组蛋白的组氨酸标签(H is-tag)进行金属螯合亲和层析纯化,观察重组酶在不同保存条件下的稳定性。结果重组质粒经酶切及测序鉴定与预期相符,诱导表达后细菌裂解液上清酶活性可达280 000 U/L,纯化后SDS-PAGE在分子量45 000处显示单一蛋白条带,在-20℃加入70g/L BSA、1 mmol/L DTT、2 mmol/L EDTA的PBS(pH 7.4)保存体系中,重组酶活性在30 d观察期内基本不变。结论成功表达并纯化了人肌酸激酶MM同工酶,重组酶稳定性良好,初步具备了作为基因工程人源酶校准品的基本特点。
- 黄燕杨文双徐国宾夏铁安
- 关键词：校准品金属螯合亲和层析稳定性
- 缺血修饰性白蛋白——一种新的心肌缺血标志物被引量：9
- 2004年
- 李志艳徐国宾夏铁安
- 关键词：缺血修饰性白蛋白心肌缺血白蛋白钴结合试验急性冠状动脉综合征
- 人血清假性胆碱酯酶连续监测法测定方法学的建立及其在肝功能评价中的应用被引量：3
- 2003年
- 目的 建立一种稳定的人血清假性胆碱酯酶速率测定方法。方法 测定反应的初速度 ,对反应体系的最佳pH、离子强度、底物用量进行选择 ,并对所建立方法的性能 ,包括试剂的稳定性进行评价。结果 采用双试剂连续监测法测定假性胆碱酯酶的活性 ,试剂I的最适组成 :含 0 .2 5mmol/LDNTB的磷酸盐缓冲液 (80mmol/L ,pH 7.7) ;试剂II的最适组成为 :含 6 0mmol/L碘化正丁酰硫代胆碱水溶液。液体试剂于 4℃储存至少可以稳定一年。本法测定线性可达 12 0 0 0U/L ,批内和天间变异小于 2 .5 % ,和Roche公司出品的假性胆碱酯酶测定试剂所测参考值和对患者测定结果有很好的一致性。结论 本法操作简便 ,试剂配制容易而且稳定性好 ,推荐作为常规测定的方法。
- 杨宏云徐国兵夏铁安
- 关键词：人血清肝功能
- 人肌酸激酶MM同工酶在大肠杆菌中的高效可溶性表达及纯化研究
- 目的: 构建肌酸激酶MM同工酶原核表达系统,纯化重组酶蛋白并对其稳定性进行研究,为其作为参考品或校准品应用于临床奠定基础.
方法: 提取胎儿心肌组织总RNA,反转录扩增人肌酸激酶M亚基基因,构建pET-15b-C...
- 黄燕杨文双徐国宾夏铁安
- 关键词：可溶性表达重组酶大肠杆菌
- 文献传递
- 肾功能与N末端B型钠尿肽原的关系及其在慢性心力衰竭诊断中的应用被引量：17
- 2006年
- 目的通过观察人血清预测肾小球滤过率(eGFR)与N末端B型钠尿肽原(NT-proBNP)之间的关系,比较慢性心力衰竭(简称心衰)患者不同eGFR水平NT-proBNP的诊断界值(cut-off值),研究肾功能对NT-proBNP应用于心衰诊断的影响。方法选择我院2003年10月至2004年4月明确诊断为心衰的住院患者106例(心衰组)以及同期正常对照191名(对照组)。采用电化学发光法测定受试者血清NT-proBNP浓度,应用Levey改良的饮食校正公式计算eGFR。结果肾功能异常者[eGFR<60ml·(min·1·73m2)-1]的NT-proBNP中位数水平显著高于肾功能正常者[eGFR≥60ml·(min·1·73m2)-1],无论是在心衰组(829·1ng/Lvs·227·2ng/L,P<0·01)还是对照组(85·5ng/Lvs·50·4ng/L,P<0·01)。将NT-proBNP与eGFR进行对数转换后,二者呈负相关(心衰组r=-0·271,P<0·01;对照组r=-0·353,P<0·01)。NT-proBNP诊断肾功能正常心衰患者的cut-off值为162·3ng/L,敏感度为68·3%,特异度为98·1%,阳性预测值(PPV)为94·9%,阴性预测值为(NPV)85·3%,AUC为0·901;而诊断肾功能异常心衰患者的cut-off值明显升高,为238·8ng/L,敏感度为70·8%,特异度为100%,PPV为100%,NPV为84·1%,AUC为0·863。结论肾功能与NT-proBNP呈微弱相关,肾功能异常时NT-proBNP诊断心衰的cut-off值升高,可以作为合并肾功能不全心衰的诊断指标。
- 史晓敏徐国宾夏铁安
- 关键词：心钠素心力衰竭充血性肾小球滤过率
- 糖尿病患者红细胞膜Na^+-K^+ATP酶的改变被引量：3
- 1993年
- 测定了34例无并发症的非胰岛素依赖型糖尿病患者红细胞膜Na^(+)-K^(+)ATP酶活性,并与20例年龄相匹配的正常人作比较。结果表明糖尿病患者红细胞膜Na^(+)-K^(+)ATP酶活性比正常人明显降低,该酶活性与馒头餐胰岛素释放试验的最高胰岛素水平和胰岛素曲线下面积呈明显正相关,而与空腹血糖和糖化血红蛋白无明显相关。糖尿病者红细胞超氧化物歧化酶含量明显降低,但与Na^(+)-K^(+)ATP酶活性之间无明显相关。提示糖尿病时Na^(+)-K^(+)ATP酶活性受血中胰岛素水平的调节。
- 卢桂芝高妍夏铁安段中平李淑葵马家珠
- 关键词：糖尿病非胰岛素依赖型钠钾ATP酶超氧化物歧化酶
- 重组人α_1-微球蛋白在毕赤酵母中的高效分泌性表达被引量：4
- 2006年
- 目的获得可溶、稳定、高纯度的α1-微球蛋白(α1-microglobulin,α1-MG),为临床检测标准品、质控品制备奠定基础。方法制备构建重组人毕赤酵母真核分泌表达质粒,并对重组α1-MG进行诱导表达、纯化和鉴定。应用PCR方法扩增重组人α1-MG pET-15b质粒,得到N端带有6个组氨酸“标签”(6×His-tag)的α1-MG融合基因,将该基因插入到真核酵母分泌表达质粒pPIC9中,筛选得到正确序列的重组分泌表达质粒pPIC9-MG、并转化毕赤酵母菌菌株GS115(Pichia pastoris GS115);用甲醇进行重组人α1-MG的诱导表达,摇瓶发酵,上清α1-MG含量测定;目的蛋白采用硫酸铵沉淀、一步亲和层析纯化并通过免疫学含量测定、PAGE电泳、Western blot以及生物质谱进行鉴定;初步进行稳定性观察。结果成功构建了重组人α1-MG真核酵母表达载体,核酸测序与预测一致,并在毕赤酵母中实现了重组人α1-MG的分泌性表达,表达量可达73 mg／L,约占总蛋白的30％。经纯化及鉴定,得到了可溶性的、具有天然蛋白生物学活性的PAGE纯目的蛋白。结论首次在毕赤酵母中实现重组人α1-MG的高效分泌性表达,表达目的蛋白具有良好的生物学活性、稳定性好、易纯化等优点。
- 谈春荣徐国宾夏铁安
- 关键词：Α1-微球蛋白毕赤酵母基因表达
- 人尿中α_1微球蛋白的分离纯化和鉴定被引量：2
- 2003年
- 陆学军徐国宾夏铁安
- 关键词：纯化肾小管损伤蛋白质
- 血液透析和腹膜透析患者血浆游离和总肉毒碱水平的观察
- 血液透析和腹膜透析患者普遍存在肉毒碱缺乏，血液透析患者随着透析程的延长，缺乏越严重。静脉给予左旋卡尼汀可有效纠正血液透析患者循环肉毒碱的下降。本文观察了血液透析和腹膜透析患者血浆总肉毒碱(TC)和游离肉毒碱(FC)的水平...
- 焦莉莉周福德徐国宾王学晶董捷李海霞夏铁安
- 关键词：肉毒碱肾透析腹膜透析
