帅江冰
- 作品数：19 被引量：38H指数：4
- 供职机构：浙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金浙江省重大科技专项基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 减毒沙门氏菌作为原核表达宿主菌和真核表达载体的研究(英文)被引量：5
- 2006年
- 本研究以增强型绿色荧光蛋白(eGFP)为报告基因,探讨了减毒沙门氏菌作为原核表达宿主菌和真核表达载体的可行性.通过多功能分光光度仪测定细菌的OD600和eGFP在大肠杆菌和减毒沙门氏菌中的表达量,结果表明:eGFP在沙门氏菌中的表达量依赖于IPTG的浓度,最佳浓度为0.5 mmol?L-1,增加浓度至0.75 mmol?L-1不能增加eGFP的表达量;而该现象在大肠杆菌中不明显.当IPTG浓度等于或大于0.5 mmol?L-1时,沙门氏菌中eGFP的表达量显著高于大肠杆菌.若以相对荧光度(1个OD600单位的荧光值,即eGFP相对表达量)表示,两种宿主菌的最佳诱导时间均为3 h.Hela细胞侵袭力试验表明该减毒沙门氏菌仍具有侵袭力,同时以脂质体转染为对照,将携带重组质粒pcDNA3-eGFP的减毒沙门氏菌转染Hela细胞,48 h后可观察到绿色荧光,表明了该菌可作为载体将重组质粒携带到细胞内,并使外源基因得到表达.此外,利用基于微孔板的多功能分光光度仪可直接检测荧光强度和OD值,能快速、准确地进行多样本检测,可用于GFP在不同宿主菌或相同宿主菌在不同试验条件下,甚至不同表达载体在相同宿主菌中表达等方面的研究.
- 迪卡陈雪燕帅江冰陈宁方维焕
- 关键词：减毒鼠伤寒沙门氏菌重组质粒增强型绿色荧光蛋白
- 中华鳖脾淋巴细胞体外转化的实验条件研究
- 2008年
- 为确定MTT(四甲基偶氮唑盐)法检测中华鳖脾淋巴细胞体外转化的条件,对脾淋巴细胞浓度和培养时间、丝裂原种类和浓度等影响因素进行优化.结果显示:2×106cells?mL-1的脾淋巴细胞用10μg?mL-1Con A(伴刀豆蛋白A)诱导培养120 h或用5μg?mL-1PHA(植物血凝素)诱导培养144 h,能获得良好的检测效果.研究表明,采用MTT法测定中华鳖脾淋巴细胞体外转化方便可行,可为中华鳖脾淋巴细胞体外转化方面的研究提供参考.
- 李肖梁刘刚张彦明帅江冰方维焕
- 关键词：中华鳖脾淋巴细胞丝裂原MTT法
- RNA干扰的研究方法被引量：1
- 2005年
- RNA干扰(RNA i)技术是把与内源mRNA编码区同源的小片段外源双链RNA(doublestranded RNA)导入细胞中,导致特定基因表达沉默的一种技术。本文简要描述了RNA i的起源、原理、在动物方面的应用领域;主要叙述了RNA i技术的机制以及siRNA试验步骤,包括siRNA的设计、合成、检测方法等;比较了各种方法的特点。
- 杨宗照帅江冰Mudasser Habib
- 关键词：RNAISIRNA
- 猪肉安全质量控制关键技术研究与示范
- 刘媛宋厚辉帅江冰张明洲张晓军张晓峰徐海明方维焕李森李丽萍李肖梁王旻子程昌勇许明曙陈健舜
- 该项目以“食品冷链流通质量安全控制与溯源技术研究及产业化示范”和“食品主要致病微生物控制技术研究与开发”国家科技支撑计划(子课题)、单核细胞增多性李斯特菌应激相关转录组学研究(国家自然科学基金)等课题为依托，以猪肉品质安...
- 关键词：
- 关键词：猪肉试剂盒
- 家蚕微孢子虫荧光定量PCR检测方法及诊断试剂盒
- 基于为蚕种生产与流通贸易提供快速、灵敏、准确检测家蚕微孢子虫方法的目的，以家蚕微孢子虫小亚单位核糖体RNA基因66 bp片段作为靶标，设计特异性PCR引物和TaqMan探针，构建重组质粒制备标准品，进行荧光定量PCR扩增...
- 何永强李光才董强吴姗鲁兴萌张弘邱海洪帅江冰王素华张晓峰徐国群
- 关键词：家蚕微孢子虫荧光定量PCR诊断试剂盒
- 日本血吸虫重组蛋白Sj22.6、LHD-Sj23、2LHD-Sj23表达和抗原性比较13
- 日本血吸虫膜相关蛋白Sj22.6和Sj23大亲水区多肽(LHD-Sj23)都具有良好的抗原性，可用于日本血吸虫病的免疫学诊断，本研究通过RT-PCR技术扩增了Sj22.6和LHD-Sj23基因片段，重叠PCR方法融合了2...
- 付媛石团员舒琦艳卢福庄莫虹斐曾若雪金晨晨张雪娟帅江冰杨富文何永强
- 关键词：日本血吸虫DOT-ELISA
- 对虾白斑综合征病毒的分子生物学研究进展被引量：8
- 2005年
- 傅玲琳帅江冰许梓荣
- 关键词：对虾白斑综合征病毒分子生物学病理机制重组疫苗
- 转基因植物疫苗研究进展被引量：2
- 2005年
- 众多研究表明,病毒的抗原决定簇及细菌毒素亚单位均能在转基因植物中成功表达,并保持良好的免疫原性。与现有的疫苗生产体系相比,植物生产疫苗具有安全、经济、稳定、高效等优势。本文概述了利用不同受体植物生产疫苗的研究现状、免疫原性评价及免疫原基因的优化表达策略。
- 傅玲琳帅江冰Jha Rajeev Kumar许梓荣
- 关键词：转基因植物疫苗免疫原性
- 单核细胞增多性李斯特菌牛奶分离株弱毒的分子基础
- 为探讨单核细胞增多性李斯特菌H4株弱毒的分子基础,我们在分析其表型的基础上,对其主要毒力相关基因进行了系统测序和分析。体外试验表明:分离株H4与10403S菌株相比具有相似的溶血活性和细胞侵袭力,但具有更强的细胞黏附力、...
- 江玲丽徐晶靓陈宁帅江冰方维焕
- 文献传递
- 犬细小病毒HZ0761株的分离与鉴定被引量：5
- 2008年
- 采集疑似细小病毒(CPV)感染犬的粪便,采用同步培养法接种胎猫肾细胞(F81)进行病毒分离鉴定。通过PCR检测、HA试验、IFA鉴定、电镜观察和空斑纯化,获得1株犬细小病毒,并命名为HZ0761。感染的F81细胞48h后出现明显的细胞病变;在病料和感染的F81细胞中均扩增出CPV VP2基因的特异性片段(221 bp);病毒液可凝集猪红细胞,血凝价为1∶28,其血凝性能被特异性抗体抑制;IFA可见特异性亮绿色荧光;电镜观察感染的F81细胞核内可见20 nm左右的病毒颗粒;病毒液的TCID50为10-4.8/mL,VP2基因序列分析显示该毒株为CPV-2 a型。
- 魏巍李肖梁帅江冰陈宁刘刚方维焕
- 关键词：犬细小病毒
