张大为
- 作品数:41 被引量:54H指数:4
- 供职机构:南京医科大学第二附属医院更多>>
- 发文基金:南京医科大学科技发展基金江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- EB病毒潜伏膜蛋白1胞外区融合蛋白的表达及其在血清学检测中的应用
- 鼻咽癌(Nasopharyngeal Carcinoma,NPC)是鼻咽上皮来源的恶性肿瘤,在我国南方具有很高的发病率,对NPC的血清学和组织活检及EB病毒(Epstein-Barr Virus,EBV)的基因表达检测都...
- 张大为
- 关键词:血清学组织活检EB病毒
- 文献传递
- 人源抗鼻咽癌LMP1胞外区抗体Fab-丝裂霉素C免疫毒素的制备及其靶向治疗的实验研究
- 陈仁杰朱进冯振卿张大为
- 鼻咽癌是来源于鼻咽上皮的高度恶性肿瘤,肿瘤进展极易侵犯颅底等重要结构,并较早发生颈部淋巴结转移和远处转移。鼻咽癌表现为种族和地区分布的特点,是中国十大高发恶性肿瘤之一,其发病率为20/100,000,已引发严重健康问题。...
- 关键词:
- 关键词:鼻咽癌
- 第三代LMP1 CAR-T细胞的制备方法及其应用
- 本发明利用基因工程技术,以具有高亲和力的全人源抗LMP1 Fab为模板,构建靶向LMP1的嵌合抗原受体的胞外区LMP1 scFv段。重组LMP1 CAR的胞外区LMP1 scFv段与信号肽CD8α、跨膜区CD8<Sup>...
- 陈仁杰冯振卿朱进唐奇陈渊张舒张大为
- 文献传递
- 第三代LMP2A CAR-T细胞的制备方法及其应用
- 本发明利用基因工程技术,以具有高亲和力的全人源抗LMP2A Fab为模板,构建靶向LMP2A的嵌合抗原受体的胞外区LMP2A scFv段。重组LMP2A CAR的胞外区LMP2A scFv段与信号肽CD8α、跨膜区CD8...
- 陈仁杰冯振卿朱进唐奇陈渊张舒张大为
- 文献传递
- 人源抗Met基因工程抗体scFv的改造与特性分析
- 2009年
- 目的:将已制备的抗Met单链抗体基因与人IgGFc基因片段融合,表达有活性的融合蛋白分子,以增强单链抗体的可溶性。方法:从人淋巴细胞提取总RNA,经RT-PCR扩增并制备人IgG的Fc基因片段,并克隆于已构建好的pBAD-scFv原核表达载体中,转化大肠杆菌Top10,经阿拉伯糖诱导表达融合蛋白scFv-Fc。所表达的可溶性蛋白经亲和层析纯化、SDS-PAGE、Westernblot分析鉴定,并用ELISA检测抗体效价。结果:序列分析表明重组质粒pBAD-scFv-Fc基因序列正确;SDS-PAGE分析表明,scFv-Fc融合蛋白分子量为60ku,且为可溶性蛋白;该蛋白经过His亲和层析纯化、ELISA检测,结果表明,该融合蛋白能够与抗原分子Met特异性结合。结论:改造后的抗体融合蛋白scFv-Fc能与人Met特异性结合,增加了抗体蛋白溶解度,有利于抗体的大量制备。
- 熊林张爱霞李芸茜张大为曹伯良朱进唐荣才
- 关键词:MET基因工程抗体融合蛋白
- EB病毒潜伏膜蛋白1胞外区融合蛋白的表达及纯化被引量:14
- 2008年
- 目的:在大肠杆菌中表达EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)胞外肽段与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白,并用该融合表达蛋白检测EB病毒相关鼻咽癌(NPC)患者血清中的特异性抗体。方法:用BamHⅠ和EcoRⅠ将含LMP1胞外区重组基因的质粒pMD18-LMP1双酶切后,克隆到pGEX-4T-2中。重组质粒经酶切鉴定、核酸序列分析后转化大肠杆菌BL21(DE3),以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白,表达的蛋白经谷胱甘肽S-转移酶柱亲和层析纯化,纯化的蛋白经Westernblot法检测鉴定。结果:重组表达质粒经酶切鉴定为阳性,核酸序列分析正确。SDS-PAGE和Western blot结果显示表达的重组蛋白分子质量约为32.2ku,此抗原能够与鼻咽癌患者血清中抗体特异性结合。结论:成功获得了LMP1胞外区重组基因表达的蛋白,并证明原核表达的LMP1胞外肽段保持了原有的抗原性,能够与EBV相关鼻咽癌患者血清中的抗体特异性结合。
- 张大为朱进陈仁杰冯振卿
- 关键词:EB病毒LMP1胞外区重组基因
- EB病毒潜伏膜蛋白1胞外区融合蛋白的表达及纯化
- 目的 在大肠杆菌中表达EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)胞外肽段与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白,并用该融合表达蛋白检测EB病毒相关鼻咽癌(NPC)患者血清中的特异性抗体.方法 用BamH Ⅰ和EcoRⅠ将含LMP1...
- 张大为朱进陈仁杰冯振卿
- 鼻内镜直视下低温等离子技术在儿童腺样体肥大手术中的应用被引量:2
- 2013年
- 目的探讨鼻内镜直视下使用低温等离子腺样体切除术治疗儿童腺样体肥大的临床疗效。方法对152例腺样体肥大患儿采用70°鼻内镜直视下低温等离子腺样体切除术,观察其疗效及并发症。结果本组患儿在手术后进食、体温均正常,未出现较为明显的出血和疼痛现象。1次治愈全部患儿,其中51例合并腭扁桃体肥大患儿在手术刚结束的一段时间内吞咽时存在轻度疼痛,但张口呼吸、打鼾、鼻塞等症状都得到了缓解,临床症状在7~10d后基本消失,半个月后恢复正常。随访1~3个月无并发症及复发。结论鼻内窥镜直视下低温等离子腺样体切除术治疗儿童腺样体肥大采用,视野清晰,增加了手术的安全性和准确性,操作方便,术中损伤小,手术疗效显著。
- 俞祖华张大为林旸
- 关键词:鼻内镜腺样体肥大低温等离子
- 非典型宫颈腺细胞在宫颈细胞学中的应用被引量:1
- 2020年
- 目的探讨非典型宫颈腺细胞(AGC)在宫颈细胞学中的应用情况。方法2012年1月~2019年8月选取南京医科大学第二附属医院病理科经液基薄层细胞检测检查的AGC病例34例,与其组织学结果进行对照并分析。结果宫颈腺上皮异型增生7例(20.59%),宫颈腺癌2例(5.88%),子宫内膜腺癌4例(11.76%),高度鳞状上皮内病变累及腺体9例(26.47%),低分化鳞状细胞癌2例(5.88%),宫颈管内膜慢性炎7例(20.59%),子宫内膜息肉2例(5.88%),宫颈腺上皮微腺型增生1例(2.94%)。根据病变类型,分为腺上皮病变组(13例)和鳞状上皮病变组(11例),两组年龄构成比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论AGC在宫颈组织学对照中,若为良性或者癌前病变,多数为宫颈管腺上皮异形增生以及较大比例的需要鉴别的高度鳞状上皮内病变累及腺体;若为恶性,则多数为宫颈腺癌或子宫内膜腺癌及需要鉴别的低分化鳞癌。此外,不同病变类型可能与年龄有关系,40岁以上是腺上皮病变的高发年龄段。
- 熊林王焱何风霞王丛阳张大为金宁
- 关键词:宫颈细胞学液基细胞学
- 36例颈深部感染的临床分析被引量:3
- 2011年
- 目的探讨颈深部感染患者的临床特征、诊断及治疗方法。方法对2005年1月~2010年12月收治的36例颈深部感染患者的临床资料进行回顾性分析。结果颈深部感染伴有扁桃体炎20例,伴有牙源性感染9例,糖尿病伴感染患者8例。不合并糖尿病患者病程为3d~2周,平均6d,合并糖尿病患者病程10d~3周,平均14d。19例脓液细菌培养,其中5例培养阳性。36例颈深部感染患者中17例未形成脓肿的患者经大剂量抗生素全身用药治疗均治愈;其他19例(52.7%)患者通过CT检查确定脓肿形成,其中8例糖尿病患者有7例患者有脓肿形成,采用脓肿切开引流术加多联抗生素联合治疗,36例患者痊愈出院,伤口愈合好,无并发症。结论颈深部感染继发于咽部或口腔感染引起。与不合并糖尿病患者相比,合并糖尿病患者疗程长、进展快,较易发生脓肿及严重并发症。CT检查应成为深颈部感染患者的常规检查,颈深部感染一经确诊:应合理应用抗生素;对于脓肿形成的患者,应尽早行脓肿切开引流术;合并糖尿病积极控制血糖,是控制感染的重要条件。
- 张大为陈仁杰
- 关键词:颈深部