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两株中和性抗hTNFα单抗可变区与hTNFα相互作用的计算机模拟及实验研究: 2000年; 在SGI图形工作站上,用同源蛋白结构预测的方法,建立了2株中和性抗hTNFα小鼠单抗(1C3E6,3F6A10)可变区的三维结构模型;并在实验研究2株单抗表位特异性的基础上,根据2株单抗与hTNFα分子表面的形状、静电性、疏水性、氢键等性质,对2株单抗可变区与hTNFα分子的可能结合模式进行了模拟和分析。再根据结合模型,设计并制备了2个hTNFα突变体,然后从实验与计算机模拟两方面着手,对比研究了hTNFα突变前后与两株单抗的结合能力与结合方式的变化。对比研究结果支持了结合模型,该结合模型的建立,为下一步的抗体人源化或小分子化改造等打下了基础。; 陈建军孙苗方佳刘惠陈常庆王德宝; 关键词：HTNFΑ 单克隆抗体

金属螯合四肽单克隆抗体可变区基因在噬菌体中的表达: 1996年; 目的：在噬菌体中表达金属螯合四肽单克隆抗体可变区基因，为筛选小肽半抗原作准备，方法：将该基因克隆入噬菌体ｐＣｏｍｂ３中，以融合表达的降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）Ｎ端十三肽作为标记，并用酶标抗体进行检测。结果：ＥＬＩＳＡ检测呈阳性反应。结论：在噬菌体中能够表达该基因，且表达产物能与金属螯合四肽半抗原较强的结合。; 韩丽英方佳陈常庆苏成芝; 关键词：抗体酶单克隆抗体可变区基因噬菌体

MTT比色法测定7株抗hIL-5mAb对TF-1细胞的增殖抑制活性: 1998年; 利用人红白血病细胞系（ＴＦ－１）细胞具有对ｈＩＬ－５依赖生长的特性，采用四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）法〔１〕对所制备的抗ｈＩＬ－５ｍＡｂ进行活性测定。１材料与方法１．１细胞和试剂ＴＦ－１由中国科学院上海生物工程研究中心保存，ｈＩＬ－５标准品为英国Ｐｅｒｏ...; 史皆然方佳孙滨卢芳陈常庆; 关键词：单克隆抗体免疫活性比色法

MTT比色法与^3H—TdR掺入法测定rhIL—3和rhEPO生物学活性的比较被引量：6: 1996年; 本文在利用ＴＦ－１细胞检测ｒｈＩＬ－３和ｒｈＥＰＯ生物学活性中，对ＭＴＴ比色法与３Ｈ－ＴｄＲ掺入法的测活结果进行了比较，认为两种方法的测活结果无显著差异（Ｐ＞０．０５），从而为简化这两种细胞因子的测活步骤提供了一定的理论依据。; 方佳陈常庆; 关键词：RHIL-3 RHEPO 生物学活性 MTT比色法细胞因子

hsTR55/TR75-preS1融合蛋白的表达与应用: 2001年; 目的简化测定hTNFα及其突变体的受体竞争结合活性的方法。方法将乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)前区(preS1)肽段(2～50)编码区,分别融合于hsTR55和hsTR75基因的C末端组成融合受体分子基因,并利用细小RNA病毒属脑炎心肌炎病毒EMCV的内核糖体进入位点(internalribosomeentrysite,IRES),构建了hsTR55/hsTR75以及它们与preS1组成的融合受体分子hsTR55hsTR75-preS1基因和新霉素抗性(neoR)基因的双顺反子表达载体,转染BHK-21细胞后用G-418持续筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株。结果RT-PCR及ELISA均证实,两种融合受体分子表达,并且表达上清对hTNFα的活性均具有一定的中和作用。在对表达上清进行ELISA定量后,我们还用Biosensor方法测定了这些可溶性受体分子与hTNFα的结合常数。结果表明,在融合preS1肽段前后,hTNFα与受体分子的解离常数变化不大。结论利用表达的两种融合受体分子,成功地建立了一种检测hTNFα及其突变体的受体竞争结合活性的ELISA法,并利用该法测定了野生型hTNFα及其4种突变体的受体竞争结合活性,所获结果与利用125I-hTNFα测定的结果具有相当的可比性。; 方佳卢芳陈常庆; 关键词：人肿瘤坏死因子可溶性受体 PRES1

人IL-5片段的化学合成及单克隆抗体的制备: 1998年; 目的：利用人工合成的hIL－5多肽片段制备抗IL-5单克隆抗体．方法：从初始原料起，采用固相连接肽等方法，合成了人IL-5羧基端19肽，并耦联到载体蛋白BSA上，以此作为抗原免疫小鼠，采用细胞融合法制备单克隆抗体．结果：成功地合成了hIL－5多肽，获得了七株单抗杂交瘤细胞系，对其中ZH10mAb性质及亚类等特性进行了鉴定．结论：可利用人工合成的多肽作为IL－5的替代物制备其单克隆抗体．; 史皆然方佳成志恒陈常庆孙滨; 关键词：白细胞介素5 化学合成单克隆抗体

人肿瘤坏死因子受体的研究: 该文首先构建了一系列分别及同时表达两种肿瘤坏死因子受体hTR55和hTR75的幼仓鼠肾(BHK-21)细胞.发现hTNFa引发对BHK-21细胞的细胞毒效应需要有hTR75受体分子的过量表达;进而利用这些细胞株从hTNF...; 方佳

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方佳