李芬 作品数:49 被引量:137 H指数:7 供职机构: 河南师范大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 河南省高校科技创新团队支持计划 河南省教育厅自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 农业科学 文化科学 更多>>
人Elp3在毕赤酵母中的分泌表达及HAT活性测定 2012年 人Elp3蛋白(human Elongator protein 3,hElp3)是组蛋白乙酰转移酶(Histone acetyltranferase,HAT)Elongator复合物的催化亚基,可参与组蛋白乙酰化修饰与基因转录延伸,其功能异常与人类多种疾病相关.目前对其羧基末端高度保守的第二功能域研究较少.以pYES2hElp3质粒为模板,PCR获hElp3基因全长,插入改造的毕赤酵母表达载体pPIC9KH,转化巴斯德毕赤酵母菌GS115菌株.经表型鉴定、PCR分析和G418筛选得到Mut+型多拷贝整合菌.0.5%的甲醇诱导hElp3高效分泌表达,Ni-NTA纯化及Western印迹证实获目的蛋白.OPA法测得其拥有良好的HAT活性,为体外测定其第二结构域是否拥有催化活性奠定了基础,对筛选抑制其HAT活性的小分子药物用于疾病治疗研究至关重要. 胡岩岩 李玉会 白雪 陈百宝 刘鸣宇 李芬关键词:ELP3 毕赤酵母 分泌表达 活性测定 延蛋白复合体的生物学功能 2007年 延蛋白(elongator)是具有组蛋白乙酰转移酶活性的六亚基复合体,目前已在几种真核生物中发现其同源物,延蛋白在真核生物中高度保守。已有的研究结果表明,延蛋白与基因转录延伸、胞外分泌以及tRNA修饰等生物学功能相关。新近发现延蛋白还有一个Fe4S4活性中心,预示延蛋白还有一些其他的未知功能。 刘洪梅 李芬 张卫林关键词:生物学功能 GPER与细胞增殖的研究进展 被引量:2 2015年 G蛋白偶联雌激素受体(G protein-coupled estrogen receptor,GPER)是一种与经典雌激素受体(ER)不同的新型雌激素受体,自20世纪90年代末期被发现以来,一直受到研究者的广泛关注。越来越多的证据表明GPER与癌症和心血管疾病的发生和发展关系密切,可能成为疾病治疗的新靶点,但目前对GPER的某些功能认知尚存争议。本文在简单介绍GPER的发现、结构、定位、特异性配体及参与的信号转导途径的基础上,着重就GPER与不同细胞增殖及其与相关疾病之间的关系进行阐述,以期进一步理解GPER及其在信号传导、细胞增殖及疾病防治中的作用。 任向波 李芬关键词:GPER 细胞增殖 癌症 心血管疾病 “问题教学法”在细胞生物学实验教学改革中的尝试 被引量:5 2012年 在细胞生物学实验教学改革过程中,我们在转变观念、加大投资力度、优化实验内容等基础上,尝试“问题教学法”,并以改革考核办法相配合,使学生经由探索研究过程系统掌握细胞生物学理论和实验技能,进而培养其创新思维和从事科研工作能力,教学效果良好。 李芬关键词:细胞生物学 实验教学改革 问题教学法 啤酒大麦极限糊精酶的研究进展 被引量:7 1998年 介绍了大麦极限糊精酶研究的最新进展,及其在制麦芽和啤酒酿造过程中的作用.阐述了大麦极限糊精酶的提纯、特点、检测方法及最新发现的两个抑制蛋白. 李芬 朱筱娟 王兴智关键词:极限糊精酶 麦芽 啤酒 酿造 大麦 表观遗传修饰与干细胞分化调控 被引量:1 2007年 干细胞具有自我更新和多种分化潜能的特性。干细胞向分化细胞的转变涉及到基因表达模式的改变,与自我更新有关的基因关闭,与细胞特化有关的基因激活。表观遗传调控机制,包括DNA甲基化、组蛋白修饰和微RNA(microRNA)介导的基因调控,在多个层面上控制发育过程中基因表达。近年研究表明,动态的表观遗传调控机制在干细胞自我更新和分化中起关键作用。 马克学 席兴字 李芬关键词:干细胞 DNA甲基化 组蛋白修饰 微RNA 人Elongator复合物Elp3亚基基因可显著补偿酵母elp3缺失菌株的生长缺陷 被引量:2 2005年 从HeLa细胞中分离的人的Elongator复合物在组成及与RNAPⅡ的作用方式上与酵母的E- longator复合物十分相似,但对其功能研究极少。为了研究人的Elongator复合物催化亚基Elp3的功能,将人elp3等基因转入酵母elp3基因缺失的突变菌株(elp3Δ菌株),并对转化菌株进行功能互补实验和ssa3和pho5基因表达分析,结果表明人elp3基因可显著恢复突变菌株对高温和Caffeine的敏感性,在低磷条件下显著补偿了突变株pho5基因表达延迟的缺陷,并可在热激条件下提高ssa3基因的表达。含酵母elp3非HAT区和人elp3 HAT区的融合yhelp3对上述缺陷有着更强的补偿能力。而HAT区催化结构域缺失的yhelp3HAT没有任何补偿能力,表明人Elp3亚基可能与酵母的该亚基功能相似,人Elp3的HAT活性也为其行使功能所必需。 李芬 韩秋菊 陆军 黄百渠关键词:基因缺失 催化亚基 复合物 烟草NtTkr尾部T1084缺失和替换突变原核表达载体的构建及诱导表达 2019年 已知烟草驱动家族新成员NtTkr尾部第3个卷曲螺旋(Coiled-coil,CC3)第1084位苏氨酸(T1084)对靶蛋白的结合至关重要,通过对NtTkr尾部的酵母双杂交筛选得到多个与Ntkr互作的候选蛋白。为确定T1084缺失(T1084d)或替换(T1084A)突变对NtTkr与这些候选蛋白体外互作的重要性,首先以pBI121-NtTkr为模板,通过重叠延伸PCR扩增得到烟草NtTkr尾部T1084d、T1084A片段并将其克隆入质粒pUC19,经蓝白斑筛选、SmaⅠ-BamHⅠ双酶切鉴定后送去测序,获得正确的T1084缺失和替换的NtTkr尾部;然后将重组的pUC19-T1084d、pUC19-T1084A与pMXB10进行NotⅠ-NdeⅠ双酶切,回收目的片段和载体片段并连接,连接产物转化大肠杆菌感受态DH5α,筛选得到重组子,进行NotⅠ-NdeⅠ双酶切鉴定,最终成功构建pMXB10-NtTkr-T1084A和pMXB10-NtTkr-T1084d原核表达载体;最后将原核表达载体pMXB10-T1084d和pMXB10-T1084A转入BL21(DE3)中,分别经0.05,0.06mmol/LIPTG浓度诱导,12%SDS-PAGE电泳检测蛋白质表达情况,结果证明获得了NtTkr-T1084d-1317和NtTkr-T1084A-1320的成功表达,且IPTG浓度大于0.06mmol/L时,均可高效表达约77ku的NtTkr-T1084A-1320和76.2ku的NtTkr-T1084d-1317蛋白量。 童文艳 胡孟可 徐林娜 乔慧聪 李芬关键词:烟草 啤酒大麦发芽过程中极限糊精酶变化规律的研究 被引量:8 2002年 以 5个不同品种的大麦为材料 ,运用底物分析法检测极限糊精酶的活性和耐热性 ,对发芽过程中几种形式的极限糊精酶的动态变化、温度对该酶的影响及不同大麦品种极限糊精酶的差异进行了研究 。 梁秀梅 李芬 王洪振 王兴智关键词:啤酒大麦 发芽过程 极限糊精酶 人Elongator复合物及其组蛋白乙酰转移酶活性在基因表达调控中的功能研究 真核生物DNA紧密包装成染色质结构,影响了包括转录、复制和修复等在内的以DNA为模板的每一个生物过程。其mRNA的合成是个多步骤的复杂过程,由控制该过程的多个辅因子协助RNAPⅡ完成。一个完整的转录循环包括RANPⅡ和通... 李芬关键词:ELP3 基因表达 文献传递