杨美玲
- 作品数:42 被引量:111H指数:7
- 供职机构:山西大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金山西省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学环境科学与工程医药卫生更多>>
- 注射dsRNA对飞蝗Knickkopf基因在mRNA和蛋白水平的沉默效率被引量:2
- 2016年
- 【目的】本研究旨在评估dsRNA对飞蝗Locusta migratoria Knickkopf(Knk)基因mRNA和蛋白表达的沉默效率,以期为基于RNAi技术探索飞蝗体内基因功能的研究提供基础资料。【方法】选择飞蝗2龄第1天的若虫,将体外合成的飞蝗Knk基因dsRNA注射进入飞蝗体腔内,注射后48,72和96 h分别解剖试虫的腹部表皮,一半用于RT-q PCR方法检测其mRNA表达;另一半用于Western blot法检测其蛋白的表达量。【结果】dsRNA注射进入飞蝗体腔内48,72和96 h后,与对照相比,Knk mRNA水平相对表达量分别降低78.3%,96.2%和95.1%;Knk蛋白表达量分别降低61.2%,33.3%和52.9%。【结论】注射ds Knk能显著沉默飞蝗Knk基因mRNA水平和蛋白水平的表达,但mRNA水平的沉默效率高于蛋白水平。
- 于荣荣丁国伟杨美玲马恩波张建珍
- 关键词:飞蝗基因沉默DSRNABLOTRT-QPCR
- 铜对秀丽隐杆线虫毒性效应的研究被引量:2
- 2012年
- 为了阐明铜(Cu)对秀丽隐杆线虫Caenorhabditis elegans长期作用的毒性效应,对实验室多代筛选的耐铜型秀丽隐杆线虫进行了寿命、衰老、发育、生殖和运动等生物学指标的研究。结果显示耐铜型秀丽隐杆线虫与野生型秀丽隐杆线虫相比其寿命缩短、衰老提前、个体发育受到抑制,且出现繁殖率降低、生殖能力减弱、运动行为存在障碍等一系列生理变化。本文为理解与阐明Cu的毒性效应提供了实验资料,有助于深入开展Cu毒性机理的研究。
- 杨慧敏韩焱宋少娟杨美玲马恩波郭亚平
- 关键词:秀丽隐杆线虫生物学指标
- 秀丽小杆线虫耐铜性筛选及其耐铜机制探讨被引量:5
- 2008年
- 为了阐明铜的长期作用对生物体生存状况和生理特性的影响,本文以秀丽小杆线虫Caenorhabditis elegans为材料,在培养基中加入一定浓度的铜(CuSO4.5H2O),最终得到具有Cu2+耐性的线虫(TT),其繁殖率显著降低,丙二醛(MDA)含量显著升高,超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽硫转移酶(GST)比活性显著降低,与重金属络合能力强的柠檬酸含量则显著升高。
- 宋少娟郭亚平阴琨吴海花张小民杨美玲马恩波
- 关键词:秀丽小杆线虫铜耐受性生物学特性生理学特性
- 几丁质合成抑制剂除虫脲对中华稻蝗的毒性效应研究被引量:3
- 2008年
- 为研究几丁质合成抑制剂除虫脲对不同龄期中华稻蝗若虫的毒性效应,将除虫脲用丙酮溶解,稀释至不同浓度,点滴法处理试虫。结果表明除虫脲对2、3龄中华稻蝗若虫具有一定的毒性效应,试虫出现因蜕皮困难而死亡的现象,且影响其进食和增重。
- 曾慧花张建珍杨美玲郭亚平马恩波
- 关键词:中华稻蝗几丁质合成抑制剂除虫脲
- SX1近交系小鼠的DNA分子标记及其应用
- 本发明通过筛选SSR分子标记,获得山西省自行培育的SX1近交系小鼠特异的4个SSR位点条带,经对其克隆、测序和同源比较,获得该小鼠4个SSR位点的DNA序列,该序列可作为分子遗传学标记,用于SX1近交系小鼠的鉴定。本发明...
- 张建琴杨美玲任连生张建珍马恩波闻建华
- 不同中华稻蝗种群对马拉硫磷的敏感性及乙酰胆碱酯酶特性的比较被引量:6
- 2007年
- 采用生物测定方法,对采自山西省晋源区和陕西省长安县的中华稻蝗种群对马拉硫磷的敏感性及其乙酰胆碱酯酶(AChE)进行了研究。结果表明,长安种群比晋源种群对马拉硫磷的敏感性低4.79倍。动力学研究表明,晋源种群的动力学参数米氏常数(Km值)和最大反应速度(Vmax值)均比长安种群的高。体外抑制结果表明,两个种群中华稻蝗对所选用的3种有机磷杀虫剂的敏感性从高到低依次为:氧化毒死蜱>对氧磷>甲基内吸磷,且长安种群的双分子速率常数(ki值)比晋源种群的低。体外抑制结果与生物测定的结果相一致,但动力学研究结果与生物测定存在差异。由此可见,两种群对马拉硫磷的敏感性差异的原因之一可能是乙酰胆碱酯酶的不敏感性,而与酶活性的升高没有明显相关性。
- 吴海花杨美玲郭亚平陈月开马恩波
- 关键词:中华稻蝗酶动力学
- 飞蝗3个细胞色素P450基因的分子特性及功能被引量:2
- 2014年
- 【目的】研究飞蝗(Locusta migratoria)细胞色素P450(CYP450)第四家族(CYP4)中3个基因的功能。【方法】以飞蝗为材料,依据飞蝗EST数据库P450基因预测序列设计引物,利用RT-PCR技术克隆飞蝗细胞色素P450基因的cDNA全长序列,命名为CYP4C69、CYP4C73和CYP4DH1(GenBank登录号:KF857162、KF857163和KF857164)。采用实时定量PCR技术分析CYP4C69、CYP4C73和CYP4DH1在飞蝗各发育阶段以及不同组织中mRNA的表达水平。应用RNA干扰技术沉默CYP4C69、CYP4C73和CYP4DH1,实时定量PCR技术检测基因的沉默效率。应用农药点滴技术测定2龄若虫期飞蝗对马拉硫磷、毒死蜱和溴氰菊酯杀虫剂的毒力,通过SPSS软件分析得出3种杀虫剂的LC30,同时应用该技术研究dsRNA干扰过的飞蝗对马拉硫磷、毒死蜱和溴氰菊酯杀虫剂的敏感性。【结果】克隆获得了飞蝗CYP450基因CYP4C69、CYP4C73和CYP4DH1的cDNA全长序列,其中CYP4C69开放阅读框1 518 bp,编码506个氨基酸;CYP4C73开放阅读框1 521 bp,编码507个氨基酸;CYP4DH1开放阅读框1 512 bp,编码504个氨基酸。对飞蝗不同龄期定量PCR结果分析,发现CYP4C69在若虫末期表达量高于成虫期,CYP4C73和CYP4DH1在飞蝗整个发育阶段均有表达,在若虫初期和末期以及成虫期表达量较高;不同组织的定量PCR结果表明CYP4C69、CYP4C73和CYP4DH1均在胃盲囊高表达,CYP4C69和CYP4DH1在脂肪体中高表达。通过RNA干扰,发现CYP4C69、CYP4C73和CYP4DH1均可以被显著沉默。马拉硫磷、毒死蜱和溴氰菊酯对2龄若虫期飞蝗的毒力测定表明2龄若虫期飞蝗对3种杀虫剂的LC30剂量,分别为59.438、8.215、0.759μg·mL-1。飞蝗对马拉硫磷、毒死蜱和溴氰菊酯杀虫剂敏感性试验结果表明,双链RNA沉默CYP4C69、CYP4C73和CYP4DH1后,飞蝗点滴马拉硫磷、毒死蜱和溴氰菊酯杀虫剂后的死亡率与注射dsGFP的对照组相比,没有显著提高。【结论】获得飞蝗CYP450基因CYP4C69、CYP4C73和CYP4DH1的cDNA
- 任晓宇杨美玲高翠娥张建珍马恩波
- 关键词:细胞色素P450飞蝗RNA干扰杀虫剂
- RNA沉默转基因技术在植物抗病虫害研究中的作用被引量:5
- 2020年
- RNA沉默技术由于其简便、高效及高特异性在各种模式和非模式生物系统中得到了广泛的应用。植物转基因技术是将植物、动物或微生物中分离到的目的基因,通过各种手段整合到植物基因组上,使其稳定遗传并赋予植物新的优良性状的生物技术。RNA沉默在植物转基因工程领域的研究十分广泛,目前已经成功研究培育出许多抗病毒、抗虫转基因植物,为农业病虫害的防控提供了新的思路和方法。本文重点综述了近年来植物转基因介导RNA沉默在抗虫与抗病毒研究方面的进展,加深人们对转基因植物抗虫与抗病毒研究的认识。
- 杨美玲李琦陈佳琦张晓明
- 关键词:RNA沉默转基因技术植物抗虫植物抗病毒
- 中华稻蝗若虫不同龄期酯酶的特性被引量:12
- 2006年
- 对中华稻蝗Oxya chinensis(Thunberg)1~4龄若虫的酯酶特性进行了比较研究.结果表明,不同龄期中华稻蝗的蛋白含量不同,随着龄期的增长,蛋白含量也随之增加,但各龄期增长的比例不同,2龄到3龄若虫蛋白含量增长的比例最大.不同龄期酯酶的总活力和比活力也不同,表现出相同的趋势,即随着龄期的增长,酯酶的总活力和比活力也随之增加,但在2龄到3龄期酯酶的活力增长最快.不同龄期酯酶动力学研究表明,不同龄期酯酶的Km值相近,无显著差异,Vmax值随着龄期的增长逐渐增大,这表明中华稻蝗若虫不同龄期酯酶活性的变化主要是量的变化,而非质的变异.中华稻蝗酯酶对3种底物亲和力的差异表明,α-NA是酯酶的最适底物.
- 吴海花杨美玲郭亚平马恩波
- 关键词:中华稻蝗若虫龄期酯酶
- 昆虫几丁质合成酶1基因片段及其dsRNA和应用
- 本发明提供一种昆虫几丁质合成酶1的基因片段及其dsRNA的应用,通过对中华稻蝗几丁质合成酶1的克隆和测序,得到核苷酸序列为SEQ ID NO:1的几丁质合成酶基因1,从中选出序列为SEQ ID NO:2的几丁质合成酶基因...
- 张建珍刘晓健马恩波杨美玲郭亚平
- 文献传递