汪洁 作品数:27 被引量:38 H指数:4 供职机构: 广东药科大学 更多>> 发文基金: 广东省医学科学技术研究基金 国家自然科学基金 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
新型融合多肽HTPP-MDC体外抑制HBV复制活性及亚细胞定位 被引量:4 2013年 目的:研究肝细胞靶向穿膜肽-家蝇天蚕素(HTPP-MDC)融合多肽体外对乙型肝炎病毒(HBV)的抑制作用及其在肝细胞中的定位。方法:不同浓度HTPP-MDC分别与HepG2.2.15细胞和Chang liver细胞共培养,用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测药物对细胞的毒性作用,应用ELISA和实时荧光定量PCR技术定量研究HTPP-MDC对HepG2.2.15细胞系分泌HBsAg、HBeAg及HBV DNA复制的影响。应用激光共聚焦技术研究HTPP-MDC在肝细胞中的定位。结果:HTPP-MDC在体外能有效抑制HepG2.2.15细胞系分泌HBsAg和HBeAg,对HBVDNA的复制亦有显著抑制作用。激光共聚焦显微镜观察显示HTPP-MDC进入细胞内部。结论:HTPP-MDC在体外对HBV复制有较强的抑制作用,并能快速透过细胞膜进入细胞内,有望用于临床治疗慢性乙型肝炎相关疾病。 卢雪梅 黄演婷 汪洁 金小宝 朱家勇美洲大蠊肠道菌株WA5-1-7的初步鉴定及其抗菌活性成分的研究 2024年 目的对具有抗白念珠菌活性的美洲大蠊肠道来源菌株WA5-1-7进行形态学和分子生物学鉴定,并对其次级代谢物进行分离纯化,从中筛选具有抗菌活性的单体化合物。方法采用染色法和扫描电子显微镜观察菌株形态;利用PCR技术扩增菌株16S rRNA,通过其基因序列与NCBI数据库进行BLAST比对并采用N-J法构建系统发育树。菌株发酵后经乙酸乙酯溶剂萃取获得粗提物,粗提物经硅胶柱层析、葡聚糖凝胶柱层析、HPLC分离纯化,获得单体化合物,经核磁共振、质谱数据与文献比对鉴定化合物结构,并检测化合物的抗菌活性。结果菌株WA5-1-7初步鉴定为环圈链霉菌(Streptomyces anulatus),从粗提物中分离出10个化合物,分别为SF2738F(1)、SF2738D(2)、环(脯氨酸-亮氨酸)二肽(3)、SF2738A(collismycin A,4)、环(苯丙氨酸-脯氨酸)二肽(5)、SF2738C(6)、1H-吲哚甲醛(7)、大豆黄酮(8)、放线菌素X2(9)、放线菌素D(10),其中化合物4、9和10有较强抗菌活性。结论本研究从美洲大蠊肠道来源链霉菌次级代谢产物中分离出具有抗菌活性的单体化合物,为深入探索美洲大蠊肠道菌奠定了基础。 汪洁 余田甜 陈雪琴 赵嘉怡 刘文彬 马艳 金小宝关键词:美洲大蠊 链霉菌 次级代谢产物 抗菌活性 培养创新应用型人才为导向的海洋药物学教学模式探索 被引量:1 2021年 海洋药物学是一门系统介绍海洋药物及其物质基础的交叉课程,是海洋药学专业的核心特色课程之一。在建设海洋强国战略背景下,为实现培养海洋药学应用型人才的综合教学目标,该文围绕思政进课堂、主体思考式学习以及复合考核机制的设立,对海洋药物学课程进行了整体教学模式的改革探索。 沈娟 沈娟 刘文彬 汪洁关键词:创新应用型人才 课堂教学 教学模式探索 地高辛探针检测重组肝靶向干扰素宿主DNA残留量的研究 被引量:5 2014年 目的:建立检测重组肝靶向干扰素宿主DNA残留量的方法,根据此法检测3批重组肝靶向干扰素每人份剂量宿主DNA残留量。方法:以重组肝靶向干扰素工程菌基因组DNA为模板,并制备探针,用此标记探针对3批重组产品进行DNA残留量检测。结果:3批次重组肝靶向干扰素原液每人份剂量宿主DNA残留量均小于10 ng。结论:地高辛标记探针斑点杂交检测DNA残留量具有特异性强,灵敏度高,重现性好,操作简单,能快速高效检定重组肝靶向干扰素原液并对其制备过程进行质量监控。 汪洁 卢雪梅 黄演婷 金小宝 朱家勇关键词:地高辛 斑点杂交 疟原虫环子孢子蛋白多肽CSP I-plus在制备抗肝炎病毒药物中的应用 本发明涉及一种已知蛋白的新用途,属于医药生物技术领域,具体涉及疟原虫环子孢子蛋白多肽CSPI-plus在制备抗肝炎病毒药物中的应用。本发明通过将肝细胞与疟原虫环子孢子蛋白多肽CSPI-plus预孵后,再加入肝炎病毒攻击,... 朱家勇 卢雪梅 金小宝 汪洁文献传递 重组肝靶向干扰素工程菌菌株的遗传稳定性研究 被引量:6 2013年 研究重组肝靶向干扰素工程菌菌株的遗传稳定性,为重组肝靶向干扰素产业化提供依据。在有选择压力(Amp+)条件下,采用平板划线传代法,将重组肝靶向干扰素工程菌菌株连续传代50代,观察菌落和菌体形态,进行生长速度、质粒稳定性、PCR鉴定、限制性内切酶酶切图谱、测序和表达量检测。结果显示:此工程菌在连续传代过程中,保持了大肠杆菌的典型特征,生长速度与原始种子库无明显差异;各代质粒的PCR和酶切图谱正确,传50代后质粒稳定性接近100%,DNA测序未见基因变异。重组肝靶向干扰素表达水平及菌体蛋白的SDS-PAGE图谱均无显著差异。说明肝靶向干扰素工程菌株具有良好的遗传稳定性,为重组肝靶向干扰素的应用奠定了基础。 卢雪梅 黄演婷 汪洁 金小宝 朱家勇丙型肝炎病毒入胞抑制剂的研究进展 被引量:3 2015年 丙肝感染是全球性的公共卫生问题之一,目前尚无预防丙肝病毒感染的疫苗,联合应用靶向丙肝不同复制阶段的药物,即所谓的"鸡尾酒"疗法可能会有更好的疗效。丙肝病毒进入宿主细胞的过程是药物干预的重要环节,这个过程是由丙肝病毒的包膜蛋白与宿主因子作用介导的,其中病毒的包膜蛋白包括E1、E2,宿主因子包括硫酸乙酰肝素(Heparan sulfate,HS)、膜蛋白CD81、B族I型清道夫受体(Scavenger receptor class B type I,SR-BI)、两种紧密连接蛋白Occludin(OCLD)和Claudin(CLDN)、低密度脂蛋白受体(Low densitity lipoprotein receptor,LDLR)、树突细胞特异性细胞间黏附分子-3-结合非整合素分子(Dendritic cell-specific ICAM-3-grab-bing nonintegrin,DCSIGN)、肝/淋巴细胞特异性细胞间粘附分子-3-结合整合素分子(Liver/lymph node specific ICAM-3-grabbing integrin,L-SIGN)和转铁蛋白1受体(Transferrin receptor 1,TfR1)等。病毒的包膜蛋白和这些宿主因子都可以作为靶向丙肝入胞抑制剂的作用靶点,许多研究表明丙肝入胞抑制剂作为一种新颖和有发展前景的化合物与作用于复制阶段药物联合应用能够更有效的治疗丙肝。本文综述了自20世纪90年代以来发现的靶点和靶向丙肝病毒进入宿主细胞的化合物。 曾文婷 卢雪梅 汪洁 金小宝 朱家勇关键词:丙型肝炎病毒 包膜蛋白 肝靶向干扰素对小鼠免疫毒性的初步研究 被引量:2 2015年 目的评价肝靶向干扰素(interferon-circumsporozoite protein,IFN-CSP)的免疫毒性作用。方法实验设IFN-CSP低、中、高剂量组(分别为1.87×107IU/kg,5.6×107IU/kg,1.68×108IU/kg),溶剂对照组(生理盐水),阳性对照组(环磷酰胺),小鼠经皮下注射给药2周,迟发型超敏反应检测细胞免疫功能,溶血空斑试验检测体液免疫的功能。结果环磷酰胺阳性对照组与溶剂对照组的小鼠比较,肿胀度、脾指数、胸腺指数明显下降(P<0.05),低、中、高剂量组与溶剂对照组相比,肿胀度、脾指数、胸腺指数没有显著差异。环磷酰胺阳性对照组的空斑数与溶剂对照组相比明显下降(P<0.05),而低、中、高剂量组与溶剂对照组相比,空斑数没有显著差异。结论 IFN-CSP对小鼠的细胞免疫功能及体液免疫功能均无明显影响,这为进一步的安全性评价提供了依据。 曾文婷 卢雪梅 汪洁 金小宝 朱家勇关键词:迟发型超敏反应 一种重组肝靶向干扰素的制备工艺 本发明公开了一种重组肝靶向干扰素的制备工艺。本发明对整合有重组肝靶向干扰素基因的原核工程菌发酵条件进行优化,然后破菌提取包涵体、洗涤、变性溶解、梯度透析复性、重组Enterokinase酶切、HisTrap?HP柱和Hi... 朱家勇 卢雪梅 黄演婷 金小宝 汪洁文献传递 一种肝癌细胞靶向抗菌肽嵌合体M27-39-HTPP及其应用 本发明公开了一种肝癌细胞靶向抗菌肽嵌合体M27‑39‑HTPP及其应用,该肝癌细胞靶向抗菌肽嵌合体M27‑39‑HTPP由Musca domestica cecropin的第27~39位融合肝靶向穿膜肽HTPP而得,氨基... 卢雪梅 陈朝霞 桂水清 张伦 刘阿龙 唐亚男 汪洁 刘文彬 金小宝 朱家勇文献传递