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人纤溶酶原激活剂抑制物2型在胃癌组织中的分布与表达: 1999年; 目的探讨人纤溶酶原激活剂抑制物２型（ＰＡＩ－２）基因在胃癌组织中表达与分布的作用。方法采用ＡＢＣ方法检测发生和未发生淋巴结转移的胃癌组织中ＰＡＩ－２、ｕＰＡ和ＰＡＩ１的表达，各３０例。结果ＰＡＩ－２主要在平滑肌细胞中表达，ｕ－ＰＡ和ＰＡＩ－１主要在肿瘤细胞中表达（Ｐ＜０．０１）。ＰＡＩ－２在胃癌组织中的分布以及表达程度与肿瘤的淋巴结转移相关。肿瘤的淋巴结转移与肿瘤细胞是否表达ＰＡＩ－２无关（Ｐ＞０．０５）。但在有ＰＡＩ－２表达的病例中，肿瘤的淋巴结转移却与肿瘤细胞ＰＡＩ－２的表达程度呈正相关，而与平滑肌细胞ＰＡＩ－２的表达程度呈负相关（Ｐ＜０．０１）。; 田昱沈俊卿宋后燕朱运松; 关键词：胃肿瘤 PAI-2 基因表达

人纤溶酶原激活剂抑制物2型(PAI-2)在大肠杆菌中的表达和分离纯化被引量：3: 1998年; 用ＰＣＲ方法从ｐＰＡＩＪ．７中扩增人纤溶酶原激活剂抑制物２型（ＰＡＩ－２）ｃＤＮＡ，与ｐＵＣ１８重组，经限制性内切酶片段分析与核苷酸序列分析，获得全长人ＰＡＩ－２ｃＤＮＡ．ＰＡＩ－２ｃＤＮＡ与原核表达载体重组，构建原核表达质粒并转化大肠杆菌．经温度诱导表达，重组ＰＡＩ－２占全菌总蛋白的１４％，以可溶性形式存在，具纤溶抑制活性．工程菌发酵、压榨后，用硫酸铵分级沉淀，沉淀物经分子筛、离子交换和疏水性色谱的分离，每升菌液可获得约３０ｍｇ纯度达９０％的蛋白质，比活性为１１８６６ＡＩＵ／ｍｇ蛋白质，得率为１９．２％．; 田昱沈俊卿李平宋后燕朱运松; 关键词：原核表达分离纯化 PAI-2 大肠杆菌

人微小纤溶酶原基因的克隆和表达被引量：6: 1997年; 用ＰＣＲ方法扩增人微小纤溶酶原（Ｍｉｃｒｏｐｌａｓｍｉｎｇｅｎ，ｍＰｌｇ）基因，再与表达载体重组，构造ｍＰｌｇ原核表达质粒并转化大肠杆菌。阳性克隆ｐＳＳＥｍＰｌｇ经温度诱导表达，ＳＤＳＰＡＧＥ等方法证明表达产物的分子量约为２９ｋＤａ，占全菌总蛋白的２４％左右，并在菌内形成包涵体。经半胱氨酸再氧化法和空气氧化法复性，表达产物ｒｍＰｌｇ经ＳＫ作用后显示纤溶活性。同时对蛋白质浓度。; 沈俊卿宋后燕; 关键词：基因克隆基因表达

抗菌肽ABP3基因的克隆及其在Pichia pastoris中的表达被引量：16: 1999年; 用化学合成法合成以植物偏爱密码子编码的新抗菌肽ＡＢＰ３基因片段，合成片段拼接后，与ｐＵＣ１９重组，经限制酶片段分析与核苷酸序列分析，获得抗菌肽ＡＢＰ３基因。ＡＢＰ３基因与表达载体ｐＰＩＣ９重组，构建受乙醇氧化酶１基因（ＡＯＸ１）的启动子与转录终止区控制的酵母表达质粒，转化ＧＳ１１５宿主菌，经表型筛选，阳性克隆用甲醇诱导表达，重组ＡＢＰ３以分泌型表达，具抗菌活性，且符合ＡＢＰ３; 沈俊卿屈贤铭田昱; 关键词：抗菌肽酵母表达克隆

大肠杆菌表达的重组人PAI-2的纯化及其生物化学特性被引量：2: 1998年; 目的研究建立大肠杆菌表达的重组人ＰＡＩ－２（ｒｈＰＡＩ－２）的纯化方法，并对ｒｈＰＡＩ－２蛋白进行理化和生物学性质的研究。方法工程菌被高压匀浆后，经硫酸铵分级沉淀，用分子筛、离子交换和疏水性色谱进行分离，得到了ｒｈＰＡＩ－２蛋白。对ｒｈＰＡＩ－２进行了复性，对ｒｈＰＡＩ－２的温度、ｐＨ、盐浓度、氧化剂敏感性、二级速率常数及抗ＳＤＳ复合物形成等理化性质和生物学特性进行了测定。结果每升菌液可获得约３０ｍｇ纯度达９０％的蛋白质，比活性为１１８６６ＡＩＵ／ｍｇ，得率为１９．２％。当温度高至６０℃时，ｒｈＰＡＩ－２迅速失活；当ｐＨ小于３时，ｒｈＰＡＩ－２完全失活；当盐浓度和Ｈ２Ｏ２浓度分别在１．５和０．５ｍｏｌ／Ｌ时，ｒｈＰＡＩ－２的活性仍维持在９０％以上；ｒｈＰＡＩ－２可与尿激酶形成抗ＳＤＳ复合物。结论成功地从大肠杆菌中分离纯化了ｒｈＰＡＩ－２。ｒｈＰＡＩ－２与天然ＰＡＩ－２在理化性质和生物学特性上基本一致。; 田昱沈俊卿蔡晓燕李平宋后燕朱运松; 关键词：纯化大肠杆菌 PAI-2

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沈俊卿