- 脂氧素A4对脂多糖活化小鼠巨噬细胞NF-κB和TNF-α转化酶的影响
- 2007年
- 目的 研究脂氧素A4（LXA4）对脂多糖（LPS）活化的小鼠巨噬细胞NF-κB及TNF-α转化酶的影响。方法 小鼠RAW 264．7巨噬细胞株培养于细胞培养板,随机分为空白对照组、LPS处理组（LPS 1μg/ml）和LPS＋LXA4组（LPS 1μg/ml＋LXA4 10^-7mol/L）。酶联免疫吸附法测定上清液TNF-α水平,提取细胞总蛋白,Western blot法测定NF-κB p65、IκB-α及TNF-α转化酶含量,荧光素酶报告质粒测定NF-κB活性。结果 LXA4抑制LPS活化的RAW 264．7巨噬细胞IκB-α降解、NF-κB p65核转位及NF-κB活性,同时抑制TNF-α蛋白表达和上调TNF-α转化酶蛋白表达。结论 LXA4通过抑制NF-κB活性和下调TNF-α转化酶表达而减少LPS活化的RAW264．7巨噬细胞分泌TNF-α。
- 金胜威张力叶笃筠吴萍周晓燕熊维姚尚龙
- 关键词：脂氧素类脂多糖类NF-ΚB金属蛋白酶类
- 脂氧素对巨噬细胞表面免疫抑制分子和共刺激分子表达的影响被引量：3
- 2007年
- 目的研究脂氧素A4(LXA4)对RAW264.7巨噬细胞免疫功能的影响。方法体外培养小鼠RAW264.7巨噬细胞,分为空白对照组、脂多糖(LPS)组和LXA4组。各组处理预设时间后,RT-PCR检测PIR-A和PIR-B基因表达水平,总一氧化氮检测试剂盒检测一氧化氮含量,流式细胞仪检测细胞表面MHC-Ⅱ分子、CD80(B7-1)、CD86(B7-2)的表达量。结果LXA4显著上调PIR-B,而几乎不影响PIR-A的基因表达水平;明显促进一氧化氮分泌(P<0.01);抑制LPS活化巨噬细胞表达MHC-Ⅱ和CD86(P<0.05),但对CD80的表达无明显影响(P>0.05)。结论LXA4促进巨噬细胞表达免疫抑制分子PIR-B和一氧化氮,抑制巨噬细胞的抗原提呈能力。
- 周晓燕张力吴萍熊维李咏生叶笃筠
- 关键词：脂氧素一氧化氮共刺激分子
- 金属硫蛋白对人宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响被引量：7
- 2007年
- 目的探讨金属硫蛋白(metallothionein,MT)对人宫颈癌细胞HeLa增殖和凋亡的影响并初步分析其机制。方法以不同浓度的MT(0.001、0.01、0.1和1ng/ml)干预HeLa细胞,MTT法测定其对细胞增殖的促进作用,流式细胞仪分析凋亡率,免疫细胞化学法和RT-PCR法测定p53和PCNA的表达。结果(1)MT对HeLa细胞增殖表现出浓度依赖性的促进作用,以1ng/ml时作用最明显(P<0.05)。(2)MT可抑制细胞凋亡,其浓度为0、0.01和1ng/ml时,凋亡指数(AI)分别为(6.35±1.08)%、(4.45±0.95)%和(2.15±0.77)%。(3)MT作用后细胞p53表达显著减弱,PCNA表达显著增强,两者均呈浓度依赖性。结论MT对人宫颈癌HeLa细胞具有显著地促进增殖和抑制凋亡作用,其机制可能与抑制p53基因表达有关。
- 李天熊维濮德敏汪辉
- 关键词：金属硫蛋白宫颈癌细胞增殖细胞凋亡
- 脂氧素对粒细胞集落刺激因子表达的影响及其机制初探
- 2007年
- 体外培养小鼠巨噬细胞RAW264．7，实验分为空白组、脂多糖（LPS）组（1mg／L LPS）及脂氧素A4（LXA4）处理组（1mg／L LPS与0．1～1000nmol／L LXA4共同温育）。处理预设时间后，实时荧光定量聚合酶链反应和酶联免疫吸附实验分别检测粒细胞集落刺激因子（G—CSF）基因表达和蛋白质分泌水平，免疫印迹法检测IχBα。降解和NF—χB转位情况，荧光素酶报告质粒检测NF-χB转录活性。结果表明：LPS诱导G—CSF表达（P〈0．01），LXA4抑制G-CSF基因表达和蛋白质分泌，其中10nmol／LLXA4作用最明显（抑制率为39．8％）（P〈0．01）；10nmot／L LxA4明显抑制IχB。降解（P〈0．05）、NF-χB转位（P〈0．05）以及LNF-χB的转录活性（P〈0．05）。这提示LXA4可能通过抑制NF-χB的转位和转录活性而抑制LPS诱导RAW264．7巨噬细胞分泌G—CSF。
- 周晓燕张力吴萍熊维李咏生叶笃筠
- 关键词：脂氧素粒细胞集落刺激因子脂多糖巨噬细胞
- 脑心通胶囊联合丹红注射液治疗急性脑梗死的临床疗效及其机制探讨被引量：36
- 2016年
- 目的观察脑心通胶囊联合丹红注射液治疗急性脑梗死的临床疗效,探讨其作用机制。方法选取2013年10月~2014年12月在武汉市中心医院神经内科住院的急性脑梗死患者90例,随机分为3组：对照组单纯应用抗血小板聚集、降脂、护脑及对症等常规治疗;治疗组在常规治疗同时给予脑心通胶囊治疗;联合用药组在常规治疗基础上加用脑心通胶囊和丹红注射液治疗。观察治疗前后三组患者的临床疗效、血液流变学、血脂代谢指标、炎症因子的变化。结果治疗组治疗前后神经功能缺损评分明显改善,且优于对照组（均P〈0.05）,联合用药组改善更明显（均P〈0.05）,治疗组和联合用药组总有效率均高于对照组（均P〈0.05）,联合用药组与治疗组总有效率差异无统计学意义（P〉0.05）,治疗组对降低脑梗死患者纤维蛋白原、血浆粘度、肿瘤坏死因子α（TNF-α）及白介素1β（IL-1β）作用明显强于对照组（均P〈0.05）;联合用药组降低纤维蛋白原、血浆粘度、TNF-α及IL-1β作用较治疗组更强（均P〈0.05）。血脂代谢方面,联合用药组与治疗组降总胆固醇及三酰甘油的作用相当,两者均高于对照组（均P〈0.05）。结论脑心通胶囊对急性脑梗死患者有较好的疗效,联用丹红注射液的疗效更佳,其可能作用机制为脑心通联合丹红注射液能降低患者血液纤维蛋白原、血浆粘度,降低TNF-α、IL-1β炎症因子的水平。
- 熊维常飞
- 关键词：脑梗死血脂代谢肿瘤坏死因子白介素1Β脑心通胶囊丹红注射液
- 脂氧素A_4对Jurkat T细胞游离钙浓度变化及增殖的影响
- 2006年
- 目的研究脂氧素A4(LXA4)对Jurkat T细胞内游离钙离子浓度变化及细胞增殖的影响。方法钙离子荧光探针Fluo-3/AM负载细胞后,用激光共聚焦扫描显微镜动态检测活细胞内游离钙离子浓度的变化;CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况,并结合流式细胞仪进行细胞周期分析。结果①采用含钙细胞外液时,LXA4降低正常Jurkat T细胞内游离钙离子浓度,而用无钙细胞外液时,细胞内游离钙离子浓度下降不明显;②LXA4呈剂量依赖性抑制钙池操纵钙通道(SOC)激活剂thapsigargin(TG)引起的Jurkat T细胞内游离钙离子浓度的增高,100 nmol/L LXA4也能抑制抗CD3单抗(a-CD3)引起的细胞内钙离子浓度的增高,SOC阻滞剂2-Aminoethoxydiphenylborate(2-APB)能显著抑制TG引起的钙内流;③LXA4呈剂量依赖性抑制a-CD3和抗CD28单抗(a-CD28)诱导的Jurkat T细胞增殖,细胞周期分析发现LXA4阻止Jurkat T细胞由G1期进入S期,降低S期细胞比例、细胞增殖指数(P I)和DNA含量。结论LXA4可能通过抑制Jurkat T细胞钙池操纵的钙通道引起的胞质内游离钙浓度的升高而抑制其增殖。
- 熊维吴萍张力周晓燕李咏生叶笃筠
- 关键词：脂氧素A4JURKATT细胞细胞增殖
- 脂氧素A_4通过抑制Jurkat T细胞钙池操纵的钙通道电流而抑制其激活和增殖被引量：3
- 2007年
- 目的通过研究脂氧素A4（LXA4）对Jurkat T细胞内游离钙离子浓度变化、钙池操纵的钙通道电流（Isoc）及细胞激活和增殖的影响，初步探讨其对T细胞的调节作用及机制。方法钙离子荧光探针Fluo-3／AM负载细胞后，用激光共聚焦扫描显微镜技术动态检测活细胞内游离钙离子浓度的变化；全细胞膜片钳技术记录Isoc；ELISA测IL-2水平；3^H-TdR掺入法测细胞增殖情况，并结合流式细胞仪进行细胞周期分析。结果（1）用含钙细胞外液时，LXA4降低正常Jurkat T细胞内游离钙离子浓度，而用无钙细胞外液时则无显著差异；（2）LXA4呈剂量依赖性抑制钙池操纵的钙通道（SOC）激活剂thapsigargin（TG）引起Jurkat T细胞内游离钙浓度的增高，100nmol／L LXA4也能抑制anti-CD3或植物血凝素（PHA）引起的细胞内钙离子浓度的增高，SOC阻滞剂2-aminoethoxydiphenylborate（2-APB）能显著抑制TG引起的钙内流；（3）膜片钳结果显示，LXA4抑制正常Jurkat T细胞Isoc，TG能显著增大Isoc，而LXA4呈剂量依赖性抑制TG引起的Isoc的升高；（4）LXA4剂量依赖性抑制anti-CD3和anti-CD28诱导的Jurkat T细胞IL-2表达及细胞增殖，细胞周期分析发现LXA4阻止Jurkat T细胞由GI1期进入S期，降低S期细胞比例。结论LXA4可能通过抑制Jurkat T细胞Isoc引起的胞质内游离钙离子浓度的升高而抑制其激活和增殖。
- 熊维李天张临洪张力吴萍周晓燕李咏生叶笃筠
- 关键词：脂氧素A4JURKATT细胞膜片钳
- 钙池操纵的Ca^(2+)通道对炎症的调控被引量：8
- 2006年
- 钙池操纵的Ca2+通道(store-operated Ca2+ channels,SOC)广泛存在于细胞膜上,是非兴奋性细胞胞外钙内流的主要通道之一,参与多种生理和病理生理过程。参与炎症和免疫反应的主要细胞多为非兴奋性细胞,SOC对它们的功能维系作用日益为人们所重视。
- 熊维金胜威叶笃筠
- 关键词：炎症中性粒细胞致炎因子
- 脂氧素对Jurkat T细胞增殖和白细胞介素-2／白细胞介素-2受体表达的影响被引量：5
- 2008年
- 目的:研究脂氧素对JurkatT细胞增殖和白细胞介素-2表达的影响。方法:体外培养JurkatT细胞,anti-CD3(2mg/L)和anti-CD28(2mg/L)单抗刺激Jurkat细胞活化,加入不同浓度脂氧素(0.1nmol/L-100nmol/L)共同孵育24h后,加入[3H]-TdR继续孵育6h,液闪仪测放射性活度;或收集培养上清,ELISA测IL-2水平,收集细胞,流式细胞仪检测细胞表面IL-2受体α亚单位CD25表达,PI染色后经流式细胞仪进行细胞周期分析。结果:脂氧素剂量依赖性抑制anti-CD3和anti-CD28活化的Jurkat T细胞增殖(P<0.05);细胞周期分析发现脂氧素处理组S期细胞比例减少;脂氧素显著降低培养上清中IL-2含量(P<0.05)但对CD25表达无明显影响(P>0.05)。结论:脂氧素能抑制活化Jurkat T细胞增殖和白细胞介素-2表达;脂氧素可通过影响T淋巴细胞的活化增殖进而发挥免疫负性调节作用。
- 张力吴萍万敬员周晓燕熊维袁萍李咏生叶笃筠
- 关键词：脂氧素白细胞介素2
- 槲皮素对离体乳头肌收缩功能的影响被引量：2
- 2008年
- 李继刘如黄浩李咏生张力吴萍周晓燕熊维张小玲叶笃筠
- 关键词：槲皮素异丙肾上腺素一氧化氮普萘洛尔
