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肺炎链球菌疫苗研究进展被引量：8: 2012年; 肺炎链球菌疫苗接种是抵抗肺炎链球菌病的最主要策略之一。此文阐述了后7价肺炎链球菌结合疫苗接种时代的肺炎链球菌病的临床和流行特征、新批准的2种肺炎链球菌结合疫苗的应用以及基于蛋白的肺炎链球菌疫苗的研发现状。; 王剑虹江丽君; 关键词：肺炎球菌疫苗接种

18～60岁健康人群肺炎链球菌IgG抗体水平调查被引量：2: 2016年; 目的了解18~60岁健康人群肺炎链球菌IgG抗体水平,为肺炎链球菌性疾病的预防与控制提供参考依据。方法选取甘肃、宁夏健康献浆员为调查对象,分为18~30、31~40、41~50、51~60岁4个年龄组,共调查347人。采用WHO推荐的标准化酶联免疫吸附试验检测12种肺炎链球菌血清型IgG抗体水平,并计算IgG抗体阳性率和几何平均浓度（Geometric mean concentration,GMC）。结果质控血清QC907的IgG抗体浓度均值与参考值之间的误差百分数均未超过±40%,测定值符合其参考值范围,各血清型抗体浓度检测结果的CV均〈30%。347份血清样品肺炎链球菌IgG抗体总阳性率为64.8%~96.0%,GMC为0.37~2.24μg/m L。不同血清型间IgG抗体GMC差异具有统计学意义（P〈0.05）。不同年龄组同种血清型IgG抗体阳性率及GMC均无统计学意义（P〉0.05）。除19F型外,不同地区同种血清型IgG抗体阳性率均有统计学意义（P〈0.05）;除4、7F、14和18C型外,不同地区同种血清型IgG抗体GMC间差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 18~60岁健康人群肺炎链球菌IgG抗体水平普遍较高,对肺炎链球菌主要流行血清型均具有一定的保护力。; 张轶熊明郁张新庄任珍芸刘倩张丽芝任克明王玺陈晓航王剑虹沈荣; 关键词：肺炎链球菌抗体水平酶联免疫吸附试验

响应面法优化14型肺炎链球菌荚膜多糖的超滤工艺被引量：1: 2013年; 目的利用响应面法优化14型肺炎链球菌荚膜多糖的超滤工艺。方法选择跨膜压力、切向流量及多糖浓度为自变量,膜包处理能力为响应值,采用Box-Behnken设计分析各自变量及其交互作用对膜包处理能力的影响;利用Design Expert软件对数据进行回归分析,得到回归方程的预测模型,取3批14型肺炎链球菌荚膜多糖水溶液,对优化的工艺参数进行验证;按照最佳超滤工艺对3批14型肺炎链球菌荚膜多糖水溶液进行等体积透析,确定超滤终点;并对纯化的荚膜多糖进行各项检定。结果优化的14型肺炎链球菌荚膜多糖超滤工艺为:跨膜压力12.8 Psi,切向流量66 L/h,多糖浓度0.86 g/L,最适透析倍数为5倍,在该条件下,膜包处理能力的理论值为91.7 g/(h·m2),实际值为91.9 g/(h·m2)。3批纯化的14型肺炎链球菌荚膜多糖水溶液的多糖组分均符合《欧洲药典》7.0版相关规定,均未检出残余脱氧胆酸钠和乙醇,3批多糖的相对分子质量均大于420 000,抗原性良好,且抗原物质成分无差异。结论响应面法优化的14型肺炎链球菌荚膜多糖超滤工艺显著提高了工作效率,降低了生产成本,为14型肺炎链球菌荚膜多糖的规模化生产提供了实验依据。; 任克明张轶王剑虹王玺白贵杰沈荣; 关键词：肺炎链球菌多糖超滤响应面

多价肺炎链球菌荚膜多糖结合物对小鼠免疫应答的影响: 2009年; 目的探讨多价肺炎链球菌荚膜多糖结合物对小鼠免疫应答的影响。方法分别用单一载体(破伤风类毒素)和混合载体(破伤风类毒素和白喉类毒素)作为多糖结合物的载体蛋白,制备5～9价肺炎链球菌荚膜多糖结合物,免疫NIH小鼠,采用间接ELISA法测定免疫小鼠血清中抗荚膜多糖特异性IgG抗体水平。结果多价肺炎链球菌荚膜多糖结合物的免疫效果优于相应的单价结合物;随着结合物配制价数的增高,小鼠的免疫应答能力趋于下降;多价结合物中使用两种载体能缓解此现象,但载体含量过高时,依然会抑制免疫应答。结论多价肺炎链球菌荚膜多糖结合物免疫小鼠后,随着载体剂量的增高,会出现载体诱导的表位抑制现象,使小鼠的免疫应答反应减弱。两种载体蛋白同时使用能缓解此现象。; 任克明陈晓航张轶刘爱萍陈美华王剑虹沈荣; 关键词：结合物破伤风类毒素白喉类毒素免疫应答

核磁共振氢谱分析法在肺炎球菌荚膜多糖疫苗质量控制中的应用被引量：3: 2015年; 目的：将一维核磁共振氢谱（~1H-NMR）法分析应用于肺炎球菌荚膜多糖（Pn Ps）的质量控制。方法：用~1H-NMR法检测供试品Pn Ps,对部分特征信号进行归属,判断供试品化学结构是否与文献公布结果一致。对图谱异常的Pn Ps22F、23F的1H-NMR图谱进一步分析,辨认其水解特征信号。分析样品中是否有C-多糖（3.23ppm）、乙酸盐（1.92ppm）和Tris（3.73 ppm）等残留。结果：~1H-NMR分析结果显示Pn Ps14,6B,1,12F和33F结构与分析文献公布结果一致,样品中均含有少量的C多糖残留。图谱异常的Pn Ps22F和Pn Ps23F分别有部分脱氧乙酰基和部分脱磷酸甘油酯基团。3型中含有Tris残留。结论：1H-NMR检定方法快捷、所需样品量少、结果直观,可用于Pn Ps的质量控制。; 王玺李阿妮张轶张新庄任克明王剑虹沈荣; 关键词：肺炎球菌荚膜多糖核磁共振

肺炎球菌结合疫苗诱导的抗荚膜多糖抗体活性研究: 2003年; 目的研究肺炎球菌荚膜多糖-蛋白结合物在小鼠体内诱导产生的功能性抗体活性。方法用荚膜多糖及其结合物免疫BALB/c小鼠,用ELISA法测定小鼠血清IgG抗体,用KSCN解离法测定IgG抗体的亲和力,用体外调理吞噬实验测定血清的调理吞噬滴度。结果 18C-TT、19F-TT免疫小鼠后,抗体滴度显著升高,有免疫记忆反应,18C-TT第1针和第3针免后的抗体亲和指数(AI)分别为22.3％±4.8％和49.7％±1.8％,调理吞噬滴度分别达到16和32;19F-TT免后AI分别为52.6％±3.0％和61.6％±3.4％,调理吞噬滴度则分别为32和64。结论18C-TT和19F-TT免疫小鼠后,能有效地产生再次免疫应答,其IgG有良好的亲和力和补体依赖的调理吞噬功能,能有效地清除肺炎链球菌的感染。; 乔瑞洁王剑虹王欣茹陈美华任克明陈晓航张勇赵萍孙述学; 关键词：肺炎球菌结合疫苗抗体活性

沙门菌载体疫苗研究进展: 2009年; 近年来沙门菌作为外源抗原的送递系统的研究取得很大进展，沙门菌已成为理想的外源抗原载体。此文概述了研发沙门菌载体疫苗所采用的抗原载运平台、Red重组酶系统以及其他新技术。; 王剑虹江丽君史久华; 关键词：沙门菌属遗传学技术疫苗

肺炎链球菌培养及其荚膜多糖的制备被引量：4: 2004年; 　肺炎链球菌荚膜多糖是肺炎疫苗的有效组分,采用自制培养基以15L立瓶和100L发酵罐对流行肺炎链球菌进行培养,探讨其生长和荚膜多糖产生情况.结果表明肺炎链球菌以上述两种方式大量培养均生长良好.采用7～9h的培养物上清液经超滤浓缩,以乙醇沉淀法制备荚膜多糖,所获多糖基本符合《欧洲药典》规定要求.立瓶培养的6B、18C、19F及23F荚膜多糖产量分别达112mg/L、123mg/L、115mg/L及103mg/L,这些数据均高于欧洲专利Yavordios所述72mg/L的产量.用立瓶培养时多糖收量较低的1、5和14型(收量分别为40mg/L、43mg/L及25mg/L)肺炎链球菌进行发酵罐培养的多糖收量与立瓶培养的相似.; 王剑虹乔瑞洁王欣茹沈荣赵萍; 关键词：肺炎链球菌荚膜多糖纯化

肺炎链球菌荚膜多糖分子大小及分子量分析方法的比较被引量：9: 2015年; 目的 3种方法分析10个血清型肺炎链球菌荚膜多糖（pneumococcal capsular polysaccharides,Pn Ps）样品的分子大小及分子量,并对这3种方法进行比较。方法采用Sepharose CL-4B凝胶排阻层析（SEC）技术检测1型、2型、4型、8型、9N型、12F型、14型、18C型、19A型和23F型Pn Ps各2～3批次样品在色谱柱中的分配系数（KD）和样品组分特征;采用高效凝胶排阻色谱-示差折光检测器（high performance size-exclusion chromatography with refractive index,HPSEC-RI）法建立Pullulan标准品分子量标准曲线,计算各Pn Ps样品的重均分子量（weight-average molecular weight,Mw）;采用高效凝胶排阻色谱-多角度激光光散射仪/示差折光检测器联用技术（high performance size-exclu-sion chromatography with multi-angle laser light scattering and refractive index,HPSEC-MALLS/RI）检测各Pn Ps样品的Mw、数均分子量（number-average molecular weight,Mn）、多分散水平（Mw/Mn）及均方根旋转半径（root mean square ratio of gyration,Rg）;对HPSEC-RI法和HPSEC-MALLS/RI法检测Pullulan分子量标准品的结果进行比较。结果 SEC技术不同化学方法检测的同批次Pn Ps样品的KD值十分接近,且主峰形态也比较近似,个别批次Pn Ps不同化学方法获得的峰形有差别。经HPSEC-RI检测Pullulan分子量标准品获得的回归方程为y=-0.278 x＋10.13,r2=0.998,各Pn Ps样品的分子量为1.812×105～1.246×106。HPSEC-MALLS/RI联用技术检测的各批Pn Ps样品的Mw分布于9.898×105～1.471×105,Rg为84.9～25.4 nm,同一血清型不同批次样品Rg间的大小关系与其Mw间的大小关系具有较好一致性。结论结合多种方法检测多糖样品的分子大小和分子量,可更客观、全面地了解Pn Ps分子的各种性质。; 张轶张新庄王玺刘倩陈晓航任克明白贵杰王剑虹沈荣; 关键词：分子大小分子量

肺炎链球菌荚膜多糖-破伤风类毒素结合疫苗两种免疫途径对小鼠抗体应答的比较: 2006年; 目的比较肺炎链球菌荚膜多糖-破伤风类毒素结合疫苗两种免疫途径对小鼠的抗体应答。方法选NIH小鼠,分别经皮下和腹腔途径免疫3次同等剂量的结合疫苗,每次间隔2周,用ELISA方法检测两种途径免疫小鼠的血清抗体滴度。结果结合疫苗经腹腔免疫后的抗体滴度优于皮下免疫。小鼠经腹腔免疫3次后,血清抗体的几何平均滴度分别是第1次免疫的6·6倍和3·5倍。结论结合疫苗经腹腔免疫较皮下免疫获得的抗体应答水平高。; 沈荣陈晓航任克明孔素娟王剑虹张勇; 关键词：破伤风类毒素结合疫苗免疫原性

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