郑纪山
- 作品数：39 被引量：72H指数：5
- 供职机构：中国人民解放军南京军区军事医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金南京军区面上课题江苏省科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学理学更多>>
- 穿孔素/颗粒酶与病毒感染被引量：3
- 2010年
- 穿孔素和颗粒酶是细胞毒性细胞所具有的两类重要效应分子,在病毒感染的病原清除和靶细胞凋亡中发挥重要的作用。本文对穿孔素和颗粒酶表达在病毒性肝炎、HIV感染及其他病毒感染中的临床应用作一介绍。
- 郑纪山顾海涛张锦海
- 关键词：细胞毒性免疫病毒性疾病
- 抗人巨细胞病毒重组抗原gp52单克隆抗体的研制及应用研究被引量：3
- 2003年
- 目的 :为了获得抗人巨细胞病毒 (HCMV)单克隆抗体 (McAb) ,并将其用于人HCMV感染后的抗体检测。方法 :采用杂交瘤技术获得抗重组HCMV(rhCMV)gp 5 2蛋白的McAb。并用抗人 μ链抗体包被、rhCMVgp5 2蛋白作抗原和HRP -McAb作标记抗体 ,建立了检测抗HCMV抗体的捕获ELISA。用该法检测献血员、病毒性肝炎患者及疑似CMV感染的肝炎综合征患者血清共计 939份。结果 :最终获得 4株 (3E9,5A6 ,4G1 2 ,2H2 )能稳定分泌高效价抗rhCMVMcAb的杂交瘤细胞。它们分别识别gp5 2蛋白上的 2个不同抗原表位 ,2H2识别gp5 2蛋白上的一个表位 ,3E9,5A6和 4G1 2则共同识别另一个表位。用其建立的捕获ELISA ,gp5 2蛋白抗原最佳浓度为1 μg·mL- 1,酶标单抗的工作浓度为 1 :1 6 0 0 ,批内平均变异系数 3.7% ,批间平均变异系数 7.9%。6 34例献血员IgM抗体阳性 1 7例 (2 .7% ) ;2 88例病毒性肝炎患者 ,阳性 1 0例 (3.5 % ) ;1 7例肝炎综合征患者 ,阳性 1 1例 (6 4.7% )。均经免疫印迹法证实。结论 :用gp5 2蛋白及其单抗建立的捕获ELISA ,特异性强 ,灵敏度高 ,不受类风湿因子的影响 ,结果可靠 ,优于全病毒抗原构成的检测试剂 。
- 周宗安郑纪山邓小昭李越希何亮李鹤林王延茹
- 关键词：人巨细胞病毒感染抗体检测单克隆抗体
- 禽流感病毒H5N1抗原基因克隆及体外转录被引量：3
- 2010年
- 目的通过基因克隆和体外转录,获得H5N1禽流感病毒抗原基因的RNA全长片段,为病原学检测提供阳性定量标准品。方法设计H5N1禽流感病毒血凝素(HA)、神经氨酸酶(NA)及基质蛋白M(M)的基因克隆引物,RT-PCR从病毒RNA获得相应片段,分别连接至pGEM-T Easy质粒并筛选阳性重组质粒,测序鉴定后酶切线性化,用T7 RNA聚合酶进行体外转录,产物用DNase酶处理、纯化后测定浓度,RT-PCR验证。结果获得含H5N1禽流感病毒HA、NA、M全长基因序列的RNA片段,并可准确定量其拷贝数,质量浓度HA为503.9 ng/μL、NA为379.2 ng/μL、M为437.8 ng/μL。结论获得的RNA片段可作为H5N1禽流感病毒核酸快速检测方法的阳性定量标准品。
- 张锦海王忠灿郑纪山王平鲁娟东吕恒王长军
- 关键词：禽流感病毒H5N1亚型克隆体外转录
- 乙型肝炎病毒血清亚型的研究进展被引量：2
- 2003年
- 乙型肝炎是人类最重要的传染病之一,全球目前约有3.5亿慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者,其中75%分布在亚太地区.在我国HBV感染流行率为57.6%,乙型肝炎表面抗原(HbsAg)阳性率为9.75%(约1.2亿人).HBV感染可引起广泛的肝损害谱,从急性自愈性感染、暴发性肝炎、慢性肝炎、肝硬化到肝癌.全球每年约有100万人死于HBV感染的相关疾病[1].乙型肝炎表面抗原(HBsAg,即S蛋白)是最早发现的HBV血清学标志物[2].
- 时连华郑纪山
- 关键词：乙型肝炎病毒血清亚型
- 蛋白质缺乏对小鼠腹腔巨噬细胞的影响被引量：11
- 1993年
- 采用间接免疫荧光定性试验(IFAT),免疫酶染色试验(IEST)、荧光定量试验、巨噬细胞(Mφ)吞噬功能测定、扫描电镜(SEM)及免疫电镜(IEM)对蛋白质缺乏小鼠腹腔Mφ的免疫反应、超敛结构和吞噬功能进行了观察与研究。结果表明:小鼠在给予缺乏蛋白质饲料后,体重进行性下降。腹腔Mφ膜表面的荧光反应强度、免疫酶染色反应随之减弱;Mφ膜表面所结台的荧光抗体量减少;SEM下可见Mφ表面绒状突起变短;IEM显示细胞阳性反应率及反应程度下降,胞膜及核膜反应减弱;Mφ吞噬功能抑制。上述结果提示蛋白质缺乏对小鼠腹腔Mφ的免疫反应、结构及功能均可产生明显影响。
- 唐祖明赵凤举孔三囡苏长青郑纪山阙宁宁
- 关键词：蛋白质缺乏巨噬细胞免疫功能
- 抗重组人巨细胞病毒单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1
- 2001年
- 为了获得抗人巨细胞病毒 (HCMV)单克隆抗体 (McAb)。采用重组HCMV(rhCMV)gp5 2蛋白片段免疫Balb/c小鼠 ,将免疫鼠脾细胞与Sp2 /0细胞融合 ,经ELISA法筛选阳性克隆及测定效价 ,用免疫印迹法进行特异性鉴定。最终获得 4株 (3E9,5A6,4G12 ,2H2 )能稳定分泌高效价抗rhCMVMcAb的杂交瘤细胞。其培养上清的ELISA效价分别为 :1∶2 0 48,1∶10 2 4,1∶10 2 4,1∶5 12 ;腹水效价分别为 :1× 10 -7,1× 10 -7,1× 10 -6,2× 10 -6。它们分别识别gp5 2蛋白上的 2个不同的抗原表位 ,2H2 识别gp5 2蛋白上的一个表位 ,3E9,5A6和 4G12 识别另一个表位。
- 郑纪山周宗安邓小昭李越希何亮高健王永山李鹤龄
- 关键词：人巨细胞病毒单克隆抗体抗原表位
- 甲型肝炎病毒在3株细胞中的增殖和连续传代被引量：1
- 2001年
- 目的 :观察甲型肝炎病毒 (HAV )在 3个不同的细胞株中连续传代时的增殖特点。 方法 :将 HAV NJ- 3株先以常规传代方式适应不同的细胞株 :FRh K4细胞、PL C/ PRF/ 5细胞、2 BS,然后将适应病毒接种于细胞 ,并随细胞传代。用 EIA、IFA和激光扫描共聚焦显微镜观察带毒细胞连续传代中的病毒增殖。 结果 :1NJ- 3株 / K4细胞于第 5代 HAAg出现阳性 ,第 17、18代时达到高峰 ,2 4代直至 35代均为阴性。 2 NJ- 3株 / 2 BS细胞仅在第 6代出现一次弱阳性 ,传至 35代均呈阴性。 3NJ- 3株 / PL C则在第 3代即可测得 HAAg,第 7代 A值达 0 .80 2 ,P/ N值13.9,并保持此水平至少 70代以上。病毒产量稳定 ,细胞形态良好。冻存 10年的 HAV/ PL C株复苏后 ,仍保持良好的产毒性能。HAV/ PL C传代或收获的最佳周期为 5天。 结论 :HAV NJ- 3株能适应三种不同的传代细胞株 ,但只能在 PL C/ PRF/ 5细胞中长期随细胞传代 。
- 郑纪山何亮王宏周宗安邓小昭乔仁良
- 关键词：甲型肝炎病毒细胞培养连续传代
- 乙型肝炎病毒特异性细胞毒T细胞实验研究技术进展
- 2008年
- 由于乙型肝炎病毒(HBV)感染中抗原特异性细胞毒T细胞(CTL)在病毒清除和肝细胞损害中的重要作用,使其成为研究热点之一。本文对HBV抗原特异性CTL的实验研究技术进展作一综述。涉及的实验方法包括51Cr释放实验,乳酸脱氢酶释放法,有限稀释法,MHC-I类分子-肽四聚体,酶免疫斑点技术和流式细胞技术等。上述方法分别用于对HBV抗原特异性CTL表达频率,细胞毒功能,以及CTL表达与分泌细胞因子功能的测定。
- 郑纪山何长伦唐雨德
- 关键词：细胞因子
- 巴基斯坦意外伤害和今后的卫生政策被引量：1
- 2000年
- 意外伤害使国家经济和生产遭受重大损失 ,令受害者及其家庭蒙受极大痛苦和经济负担。全球因此致死的 2 / 3发生在发展中国家。人口 136 0
- 郑纪山南方
- 关键词：卫生政策
- 携带猪囊虫表位的嵌合蛋白疫苗的构建及其免疫学研究被引量：6
- 2006年
- 用PCR法将猪囊虫抗原表位n1、n2插入乙肝病毒核心蛋白（HBc）序列的第78～79位之间，将猪囊虫抗原表位n3接在149位之后，再将该序列克隆入pET28a载体中，构建了重组表达质粒pET28a—△c-3n，在大肠杆菌中表达出融合蛋白。命名为PCCE。将PCCE纯化后免疫小鼠，以ELISA检测小鼠的体液免疫应答，Western blot检测抗体的特异性．Dot ELISA验证所选表位的保护性。另用绦虫卵攻击免疫小鼠，以观察疫苗的保护作用。测序结果表明，重组质粒构建成功；SDS—PAGE显示，融合蛋白表达正确，电镜证实有蛋白颗粒形成。对免疫小鼠应用ELISA检测到高滴度抗体；Western blot结果表明。免疫鼠体内诱导出了3种特异性抗体；Dot ELISA结果表明，所逸表位对宿主可能具有保护性。绦虫卵攻击免疫小鼠试验表明，疫苗PCCE的相对保护率为89％。结论：成功地表达和纯化了以HBc为载体的携带3个猪囊虫表位的融合蛋白（PCCE），以PCCE作为疫苗免疫小鼠，能诱导较强的特异性体液免疫反应，免疫小鼠对绦虫卵攻击具有较好的免疫保护作用。
- 邓小昭周宗安刁振宇高健王元伦刘玉郑纪山
- 关键词：猪囊虫疫苗HBCAG免疫反应
