陈志华
- 作品数:88 被引量:409H指数:11
- 供职机构:中日友好医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划卫生部科技专项基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学自动化与计算机技术理学更多>>
- 同步辐射相衬成像对组织形态结构及相关抗原表达的影响被引量:4
- 2005年
- 利用北京同步辐射装置(BSRF)4W1A光束线提供的硬X射线,以类同轴全息法、衍射增强法(Diffractionenhancedimaging,DEI),对兔正常骨、骨缺损;小鼠正常肺、肺癌;大鼠正常肝、肝纤维化、肝硬化等固定样品进行了同步辐射硬X射线相衬成像观察。在此基础上,成像组织及空白对照组织均按常规方法制片后进行HE染色,在光学显微镜下观察组织细胞形态结构;采用免疫组织化学技术检测其相关抗原Ⅷ、S-100、FN、泛素的表达,并根据抗原表达强度进行半定量分析。结果显示,成像组与空白对照组的骨、软骨、肝、肺组织染色均匀,结构清晰,无细胞损伤;两组骨、肝、肺相关抗原表达无明显差异。表明在以同步辐射硬X射线相衬成像方法观察固定组织的过程中,不会对骨、软骨、肝、肺组织的形态结构及一些相关抗原表达造成损伤和影响。
- 潘琳陈志华黎刚孙伟朱佩平夏启胜周东辉赵天德陈惟昌姜晓明吴自玉唐劲天
- 关键词:抗原免疫组织化学
- 木黄酮对宫颈永生化上皮细胞的影响及其对细胞周期的调控机制被引量:1
- 2009年
- 目的:观察木黄酮对人宫颈永生化上皮细胞生长的抑制作用,并探讨其调控细胞周期的相关机制。方法:本研究采用人宫颈永生化上皮细胞系(H8细胞),应用磺酰罗丹明B(SRB)法,绘制细胞生长曲线,获得抑制50%细胞生长所需药物浓度(IC50)。应用流式细胞仪分析细胞周期。免疫荧光法检测细胞周期调控因子cyclin D1,cyclin B1,CDK4,cdc2和p21的蛋白表达,RT-PCR半定量法检测其mRNA表达。结果:不同浓度的木黄酮对H8细胞有生长抑制作用,并呈剂量依赖关系。木黄酮对H8细胞作用d5的IC50为55μM。木黄酮作用后使H8细胞阻滞于G2/M期。木黄酮作用3d后,开始显著下调H8细胞cdc2的mRNA和蛋白表达(P<0.05),其对H8细胞cyclin D1、cyclin B1、CDK4和p21的mRNA和蛋白表达均无影响(P>0.05)。结论:木黄酮可以抑制宫颈永生化上皮细胞的生长,其作用机制之一可能是通过下调其cdc2的表达。
- 陈庆云卞美璐刘军陈志华向青徐梅徐波
- 关键词:木黄酮宫颈肿瘤永生化细胞周期
- 宫颈癌癌前病变中人乳头状瘤病毒16整合状态的检测被引量:14
- 2005年
- 目的 探讨宫颈癌癌前病变中人乳头状瘤病毒(HPV)16DNA整合入宿主基因组的发生情况。方法 选取 108例细胞学为宫颈癌癌前病变的患者,应用多重聚合酶链反应 (PCR)同时检测液基细胞标本中的HPV16L1、E_2和E_6基因。采用通用引物GP_(5+) /GP_(6+)扩增HPVL1基因保守区的一个长 150bp的片断,以检测HPV的存在。E_2PCR引物目标是HPV整合时最常缺失的E_2开放阅读框(ORF)的特殊区域,E_6引物目标是E6ORF。在游离型中,E_2、E_6拷贝数比例相等;在整合型中,E_2缺失;在游离、整合的混合型中,E2的拷贝数少于E_6。对E_2、E_6的PCR产物凝胶电泳条带的面积灰度值进行半定量分析,从而确定HPV16的整合状态。结果 HPV感染者 62例 (57. 41% );HPV16感染者 32例 ( 29. 63% ),其中 15例 ( 46 .88% )为纯游离型; 13例 ( 40 .62% )为混合型; 4例(12. 50% )为纯整合型。HPV16DNA整合和 /或混合型的比例随宫颈病变级别升高而增加,不同病变之间差异有统计学意义(P<0 .01)。结论 HPV16整合入宿主基因组在部分宫颈上皮内瘤变中即已发生。多重PCR同时检测HPVL1、HPV16E_2、E_6基因以及E_2 /E_6比值,是一种在宫颈细胞学标本中同时检测HPV感染、HPV16感染和HPV16整合状态的简便方法。它可以作为细胞学筛查的一种补充手段。
- 陈庆云卞美璐陈志华刘军
- 关键词:HPV16感染人乳头状瘤病毒E6基因HPV感染拷贝数PCR产物
- 荧光蛋白、超顺磁氧化铁双标胎鼠神经干细胞建立被引量:3
- 2008年
- 目的建立绿色荧光蛋白(EGFP)、超顺磁氧化铁(SPIO)双标大鼠胚胎中脑神经干细胞。方法以质粒pEGFPN1转染大鼠胚胎中脑神经干细胞后用SPIO标记。荧光显微镜观察EGFP表达情况;普鲁士蓝染色、透射电镜鉴定SPIO标记;体外诱导分化,免疫细胞化学鉴定其分化能力。结果基因转染12h后EGFP开始表达;普鲁士蓝染色显示SPIO标记满意,透射电镜显示SPIO位于吞饮小泡和胞质内;体外诱导分化研究表明EGFP、SPIO双标不影响其增殖与分化。结论成功建立了EGFP、SPIO双标大鼠胚胎中脑神经干细胞。
- 刘如恩邓兴力郭京冯忠堂王武雷德强李红艳陈志华
- 关键词:超顺磁氧化铁中脑神经干细胞
- DAPT抑制Notch信号通路在姜黄素介导光动力治疗宫颈癌裸鼠移植瘤的机制研究被引量:3
- 2018年
- 目的以姜黄素为光敏剂的光动力治疗(PDT)宫颈癌裸鼠移植瘤的体内实验中,分析利用Notch受体阻断剂N-[N-(3,5-二氟苯乙酰基-L-丙氨酰基)]-(8)-苯基甘氨酸叔丁酯(DAPT)抑制Notch信号通路前后、Notch及通路下游节点分子NF—κB、VEGF表达的影响,探讨Notch信号通路在PDT治疗宫颈癌中发挥作用的可能机制。方法采用背部皮下接种人宫颈癌Me180细胞200μl建立裸鼠宫颈癌模型,造模成功后实验动物随机分为4组(模型组、姜黄素PDT组、单纯DAPT组、姜黄素+PDT4-DAPT组),每组12只。分析各组肿瘤体积变化,观察各组HE染色结果,利用RT—PCR、免疫组化、免疫印迹检测DAPT抑制Notch信号通路前后的肿瘤组织中Notch1及其下游NF-κB,VEGF的mRNA和蛋白表达情况。结果姜黄素PDT组、单纯DAPT组、姜黄素+PDT+DAPT组肿瘤体积在治疗后1—7d保持不变或略减小,与模型组相比差异均有统计学意义(均P〈0,05)。HE染色见姜黄素+PDT+DAPT组坏死最为明显。DAPT和姜黄素-PDT均可降低Notch1的mRNA表达水平,抑制率分别为42.17%和40.54%,且姜黄素+PDT+DAPT组对Notch1的表达抑制作用最强(79.22%)(P〈0.01),二者联用后有协同增效作用。但对Notch2的表达无明显抑制作用(P〉0.05)。DAPT和姜黄素。PDT均可抑制Notch1、NF-KB、VEGF的蛋白表达,二者联用后有协同增效作用。结论DAPT可有效阻断NOTCH信号通路的传导,抑制裸鼠体内宫颈癌移植瘤的生长。应用DAPT抑制Notch信号通路后进行光动力治疗,可达到协同增效作用,其作用主要与Notch1、下游NF-κB基因的表达下调有关,Notch信号通路可能是姜黄素-PDT的作用靶点之一。
- 贺桂芳牟天龙潘彦舒陈志华向青杨文艳张媛原亚莉孙霭萍
- 关键词:NOTCH信号通路DAPT光动力治疗姜黄素宫颈肿瘤
- 空间环境对恶性黑色素瘤血管生成拟态的影响
- 2008年
- 观察空间诱变后恶性黑色素瘤B16细胞株的在小鼠体内肿瘤组织中血管生成拟态数目的改变,并探讨可能的机理。应用细胞低温长期生存系统,将B16细胞株搭载于中国第20号返回式卫星,返地后单克隆化,从得到的110株单克隆空间诱变B16细胞株中随机选取7株,编号为38#~44#,常规培养6代后和对照细胞株在荧光倒置显微镜下观察肿瘤细胞的形态;同时采用MTT(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,又称噻唑蓝)法,检测细胞增殖情况,将增殖差异较大的39#和44#细胞株接皮下种于C57BL/6J小鼠,两周后颈椎脱臼法处死小鼠,取出瘤体,经福尔马林固定后,采用CD31和PAS套染的方法观测肿瘤组织血管生成拟态的情况,并推测其与肿瘤生长速度和转移可能关系。
- 柴大敏鲍正齐唐劲天向青房青徐梅徐波李红艳耿传营陈志华陶仪声
- 关键词:空间环境B16细胞诱变血管生成拟态
- 遗传密码格式的组合编码数分析
- 2002年
- 用N个密码子对m个编码对象进行编码的编码格式是m元N维空间中的一个顶点。64个密码子对20种氨基酸和终止密码子进行编码格式的组合编码数是一个十分巨大的数字。对多元高维编码空间的拓扑特性进行了分析和研究 ,并由此推导出m -N空间的特性三角的排列方式以及给出特性三角公式的数学证明。指出 ,目前的遗传密码的编码格式是21元64维编码空间的一个顶点。应用组合数学分析的方法 ,计算了遗传密码格式的最大组合编码数CM =4.19×1084 ,基因组遗传密码的组合编码数CG =1.13×1080 以及线粒体遗传密码的组合编码数CT =1.38×1079 等。分析结果表明 ,遗传密码的指定是一个小概率事件 。
- 陈惟昌陈志义陈志华王自强
- 遗传密码和DNA序列的高维空间数字编码被引量:23
- 2000年
- 二进制数字化编码是信息科学最基本的编码方式。用0(00)、1(01)、2(10)和3(11)4个数码对4种碱基(C、T、A、G)进行二进制数字编码 ,共有24种可能的编码组合 ,其中8种满足碱基互补法则 ,它们是拓扑等价的。按碱基分子量大小排列的编码格式 :0123/CTAG是最理想的编码格式。用二进制数对DNA的字符序列进行编码 ,有以下优点 :1)压缩信息冗余度 ,提高编码效率 ;2)可以对碱基的结构、功能基团、碱基互补、氢键强弱等性质进行编码 ;3)DNA序列的数字编码具有严格的大小顺序 ,即具有全序性质 ;4)DNA数字编码的对称性程度 ,与遗传密码简并度的对称性一致 ,并可得出氨基酸遗传密码的高维空间连通性简并法则 ;5)可以方便求出任意碱基重复单元的重复系列的数字编码法则 ;6)根据高维空间汉明编码距离的定义 ,可以确定任意多个DNA序列之间的信息距离和它们的交空间和并空间 ,对DNA序列生物信息学的分析研究有重要意义 ;7)DNA序列的数字编码可以方便进行各种数学运算和逻辑运算 ,对促进DNA生物计算机的发展 ,可有重大推动作用。
- 陈惟昌陈志华陈志义王自强邱红霞
- 关键词:DNA序列遗传密码高维空间
- 同步辐射光源相衬成像技术在形态学研究中的应用被引量:7
- 2006年
- 目的探讨同步辐射相位衬度成像在形态学研究中的应用前景。方法以北京同步辐射装置(BSRF)4W1A束线提供的硬X线,采用衍射增强成像(DEI)和类同轴成像法对经10%福尔马林固定的正常猪、大鼠、小鼠的肝、肾、肺、骨等组织进行成像,并与成像样品的相邻组织及成像后原位组织切片的光镜染色结果进行对比分析。结果衍射增强成像显示大鼠肝脏血管的逐级分支,走行方向清楚,最细可分辨直径为30μm的血管;猪肝脏中央静脉、肝小叶分界隐约可见;大鼠肾脏皮、髓质分界清楚,弓形动脉、静脉及髓质区集合管、乳头管结构清晰可见,最细可分辨直径为30μm的管道结构;小鼠肺支气管树分支清楚,重叠肺泡隐约可见。类同轴成像大鼠股骨头关节软骨及骨小梁结构清楚。结论利用同步辐射相位衬度成像方法,样品无需制片处理即可观察到光镜及其他影像学技术尚不能直接观察到的脉管系统模式结构及其与周围组织的结构关系,此外还可以观察到常规X线成像方法无法观察到的软骨影像,比较适合形态学研究。
- 潘琳陈志华黎刚郭艳茹夏启胜丛长虹王寯越朱佩平赵天德陈惟昌姜晓明吴自玉唐劲天
- 关键词:X线形态学
- 在交变磁场中筛选升温物质的方法
- 在交变磁场中筛选升温物质的方法,是一种在医学中探寻磁场加温治疗的热介质的方法,主要特征是,制作专用带有凹槽的石蜡模型,在凹槽内分别置入质量相同或体积相同的不同种被测固体金属或其化合物粉末,将装有所述粉末的石蜡模型置于交变...
- 唐劲天刘轩赵天德陈志华向青徐梅李红艳
- 文献传递