唐靖
- 作品数：33 被引量：182H指数：7
- 供职机构：南方医科大学南方医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- HPC2真核表达载体的构建及其在HEK293细胞中的表达被引量：1
- 2005年
- 目的构建在哺乳动物细胞中表达的HPC2真核表达载体,并分析其在HEK293细胞中的表达。方法从重组pcDNA3/HPC2载体上将HPC2cDNA序列亚克隆至带有flag标记的真核表达载体pcDNA3-flag上,经PCR、酶切和测序鉴定,将重组质粒pcDNA3-flag/HPC2用脂质体瞬时转染HEK293细胞,细胞裂解后,用Westernblot分析并观察HPC2在HEK293细胞中的表达情况。结果PCR、酶切和DNA测序结果均表明重组质粒pcDNA3-flag/HPC2构建正确,并可在HEK293细胞内高效表达。结论成功构建了pcDNA3-flag/HPC2真核表达载体,该载体能在哺乳动物细胞中有效表达,为进一步研究HPC2的功能提供了重要的实验材料。
- 谭康联李志杰刘靖华黄浩唐靖邓鹏姜勇
- 关键词：基因表达转染
- 乌司他丁对肝癌切除术患者炎症反应的影响被引量：3
- 2012年
- 目的观察乌司他丁在肝癌切除术中的抗炎效应。方法将美国麻醉医师协会体格情况分级Ⅰ～Ⅱ级行肝癌切除术的40例患者按随机数字表法分为乌司他丁组和生理盐水组,每组20例。实施静脉吸入复合全身麻醉诱导插管后,乌司他丁组以乌司他丁10 000 U.kg-1溶于20 mL生理盐水中,生理盐水组给予等量的生理盐水,于切皮即刻20 min内经外周静脉持续恒速泵入。分别于术前(T1)、术后(T2)、术后6 h(T3)、术后24 h(T4)抽取中心静脉血,分离血清后采用LiquiChip液相蛋白芯片系统检测血清细胞因子白细胞介素(IL)-6、IL-8、IL-10和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果组间比较显示,2组T1时IL-6、IL-8、IL-10及TNF-α比较差异均无统计学意义(P>0.05);2组间同一时间的IL-8、TNF-α水平差异均无统计学意义(P>0.05);T2、T3、T4时乌司他丁组的IL-6水平低于生理盐水组(P<0.05),IL-10水平高于生理盐水组(P<0.01),差异均有统计学意义。组内比较显示,2组各时点之间TNF-α水平差异均无统计学意义(P>0.05);T2、T3、T4时乌司他丁组和生理盐水组的IL-6、IL-8、IL-10水平均高于T1时点,差异有统计学意义(P<0.01);且IL-6、IL-8水平均随时间推移而升高,差异有统计学意义(P<0.05);而T2、T3、T4时点之间IL-10水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论肝癌切除术中存在炎症反应,乌司他丁可抑制血清促炎因子的生成,同时可促进抗炎因子的产生。
- 孙芬芬赵振龙唐靖古妙宁肖金仿
- 关键词：乌司他丁肝癌切除术炎症反应
- 丙泊酚对过氧化氢诱导入脐静脉内皮细胞超氧化物歧化酶1表达的影响
- 2011年
- 目的 探讨丙泊酚对过氧化氢（H2O2）诱导入脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVEC）超氧化物歧化酶1（superoxide dismutase-1,SOD1）表达的影响.方法 将体外培养24孔板中的HUVEC分为3部分：第1部分（分4组,每组6例）：①正常对照组（C组）;②H2O2刺激组（H组）：H2O2 200 μmol/L;③丙泊酚组（P组）：丙泊酚100μmol/L;④丙泊酚加H2O2刺激组（P＋H组）;第2部分（分5组,每组6例）：分别给予丙泊酚12.5、25、50、100、200 μmol/L预处理30 min后,再给予H2O2 200 μmol/L.第3部分（分5组,每组6例）：丙泊酚最佳浓度预处理30 min后,再给予H2O2 200μmol/L,分别培养6、12、24、36、48 h,采用Western blot观察HUVEC在H2O2刺激下,丙泊酚对HUVEC中SOD1表达影响的量效与时效关系.将96孔板中的HUVEC分为3组（每组5例）：①空白对照组（C组）;②H2O2刺激组（H组）;③丙泊酚＋H2O2组（P＋H组）,采用MTT法检测丙泊酚对HUVEC存活率的影响.结果 H2O2（200 μmol/L）刺激HUVEC后,能明显抑制HUVEC中SOD1的表达.丙泊酚预处理后,能部分逆转H2O2对HUVEC中SOD1的抑制作用.丙泊酚浓度为100μmol/L,H2O2刺激时间为24 h时,逆转效应达高峰.结论 丙泊酚可通过上调SOD1表达而减轻H2O2诱导HUVEC氧化应激损伤.
- 杨艳琴唐靖古妙宁
- 关键词：丙泊酚过氧化氢脐静脉内皮细胞
- 用FRET技术研究TLR4和MD-2的相互作用被引量：9
- 2006年
- 目的利用荧光共振能量转移(FRET)技术在活体细胞研究人Toll样受体(TLR)4与髓样细胞分化蛋白2(MD-2)的相互作用。方法用PCR方法扩增TLR4编码序列和MD-2编码序列(不包括信号肽序列)并分别亚克隆入带TLR4信号肽的增强型青色荧光蛋白和增强型黄色荧光蛋白表达载体(pECFP-C1-SP,pEYFP-C1-SP)中,重组质粒经酶切、序列鉴定分析后分别或共同转染HEK293细胞,用荧光显微镜观察荧光蛋白表达和分布情况,并用常规的方法和受体光漂白的方法对共表达青色荧光蛋白(CFP)-TLR4和黄色荧光蛋白(YFP)-MD-2的细胞进行FRET分析。结果重组质粒在HEK293细胞中得到表达,仅转染pECFP/TLR4或pEYFP/MD-2的细胞可见青色或黄色荧光主要分布在胞质内,以核周较多;而共转染pECFP/TLR4和pEYFP/MD-2的细胞可同时检测到青色和黄色荧光,主要分布在细胞膜,同时胞质也有少量表达。无论是用常规的方法还是受体光漂白的方法,对共表达CFP-TLR4和YFP-MD-2的细胞进行FRET分析结果表明有FRET现象的发生,提示TLR4和MD-2有相互作用并形成复合物。结论本研究为TLR4和MD-2在活体细胞中的相互作用提供了直接的证据。
- 刘亚伟刘靖华唐靖赵清李建军赵明哲李志杰王国军钟田雨邓鹏姜勇
- 关键词：TOLL样受体4荧光共振能量转移
- SLIPA^(TM)喉罩在全麻气道管理中的应用被引量：6
- 2009年
- 目的研究SLIPATM喉罩用于全身麻醉建立通气道的难易及维持通气的效果。方法选择28例ASAⅠ或Ⅱ级、择期全麻下手术的成年患者,建立SLIPATM喉罩通气道。从SLIPATM的插入时间、插入操作成功率、插入过程SpO2变化、术中维持机械通气等方面对气道建立的难易及维持通气的效果进行评价。结果96.4%的病人成功插入SLIPATM,一次插入操作的成功率为78.6%,71.4%的操作在30s内完成。插入过程及机械通气全程SpO2大于95%。结论SLIPATM喉罩通气道是一种操作简便、维持机械通气可靠的通气道。
- 徐建设陈辉唐靖
- 关键词：SLIPA喉罩全身麻醉
- 异丙酚重复镇静对大鼠空间学习记忆能力及其海马齿状回新生神经元的影响被引量：1
- 2014年
- 目的观察异丙酚重复镇静对大鼠海马齿状回新生神经元形态及对大鼠空间学习记忆能力的影响。方法48只成年SD大鼠分为异丙酚组和溶媒对照组,异丙酚组给予异丙酚重复镇静(100 mg/kg,2次/d,共7 d),溶媒对照组给予同等体积的溶媒(脂肪乳剂)。Morris水迷宫检测首次给予异丙酚28 d后大鼠空间学习记忆能力。首次给药后以BrdU进行标记,分别计数首次给药后1、14 d和28 d大鼠海马齿状回颗粒下区BrdU阳性细胞数。激光共聚焦显微镜观察首次给药后14 d SD大鼠海马齿状回新生神经元树突分枝数量和长度的变化。结果在使用异丙酚镇静28 d后,与溶媒对照组相比,成年大鼠发现隐藏物体的时间显著延长[异丙酚组(14.55±1.25)s,溶媒对照组(9.36±2.54)s,P<0.05]。与溶媒对照组相比,大鼠海马齿状回颗粒下区BrdU阳性细胞数在首次给药后1 d无明显变化,但在首次给药后14 d[异丙酚组(2 560.58±42.76)个,溶媒对照组(2 941.42±46.66)个,P<0.05]和28 d[异丙酚组(1 297.75±31.99)个,溶媒对照组(2 273.75±40.29)个,P<0.05]均显著减少。首次给药后14 d,异丙酚镇静组成年SD大鼠海马齿状回新生神经元树突的长度[(异丙酚组(267.25±14.20)μm,溶媒对照组(394.33±32.59)μm,P<0.05]和分枝数[异丙酚组(2.92±0.29)个,溶媒对照组(5.67±0.49)个,P<0.05]明显低于对照组。结论异丙酚重复镇静可损害成年大鼠的空间学习记忆能力和新生神经元的树突复杂度。
- 张静陶涛王云花唐靖古妙宁秦再生
- 关键词：异丙酚空间学习记忆
- 丝裂原活化的蛋白激酶在高迁移率族蛋白1诱导内皮细胞释放炎性细胞因子中的作用被引量：5
- 2009年
- 目的研究重组人高迁移率族蛋白1(HMGB1)诱导内皮细胞释放趋化因子白介素-8(IL-8)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的规律及其与脂多糖(LPS)的协同作用;探讨丝裂原活化的蛋白激酶(MAPK)信号通路在上述作用中的地位。方法用LiquiChip液相蛋白芯片系统检测不同浓度重组HMGB1(0~75ng/ml),或者HMGB1(15ng/ml)刺激后不同时间点人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分泌IL-8、MCP-1的水平变化以及HMGB1(15ng/ml)与LPS(10ng/ml)共同刺激后IL-8、MCP-1的水平变化;探讨MAPK信号通路在HMGB1诱导内皮细胞释放趋化因子中的作用时首先加入抑制剂SB203580(20mol/L)、PD98059(20mol/L)和JNKinhibitorII(50nmol/L)预处理细胞1h,再加入HMGB1和LPS刺激。结果在HMGB1蛋白刺激后3~6h,IL-8和MCP-1水平开始增加,12~24h持续增高(P<0.01);随着HMGB1浓度的增加,IL-8和MCP-1水平也明显升高,与基础值相比差异有统计学意义(P<0.01)。如果用LPS(10ng/ml)和...
- 钟田雨唐靖刘亚伟李志杰陈登宇赵明哲王蔚刘靖华姜勇
- 关键词：白介素-8单核细胞趋化蛋白-1人脐静脉内皮细胞
- hpc2研究进展被引量：3
- 2004年
- 生物个体的胚胎发育以及细胞的增殖、分化 ,都同时受到多种基因的严格调控 ,PcG基因家族就是一类重要的发育相关基因 .而hPc2基因是人PcG基因家族中的一个重要成员 ,其编码的HPC2蛋白 ,不仅可以和HPH、BMI 1以及RING1等其他人类PcG蛋白结合形成HPC/HPHPcG复合体 ,以蛋白复合体的形式参与对homeotic基因的表达抑制 ,以维持机体的正常发育以及细胞的增殖和定向分化 ,还发现它能与其他多种蛋白质相结合 ,提示HPC2可能具有多种功能 .因此 ,对hPc2的深入研究不仅有助于进一步阐明PcG基因家族的作用机理 ,扩展人们对基因表达调控的认识 ,还有助于发现PcG基因家族与其他信号转导通路的联系 ,更好地理解细胞信号网络系统 .
- 唐靖刘靖华姜勇
- 关键词：家族增殖蛋白复合体G基因种蛋发育
- 双色红外荧光技术在蛋白磷酸化检测中的应用被引量：2
- 2006年
- 目的通过与化学发光法比较,了解双色红外荧光技术在目标蛋白磷酸化检测中的优势。方法分别取内毒素休克小鼠不同时间肺组织,制备组织匀浆蛋白样品。用SDS-PAGE电泳分离后转膜,将膜分别与磷酸化的或／和总的 p42／44 MAPK抗体孵育,二抗用耦联有Alexa Fluor 680和IRDye 800的荧光抗体或辣根过氧化物酶抗体,通过双色红外荧光系统和化学发光法进行蛋白质磷酸化检测。结果红外荧光检测技术和化学发光检测结果均显示内毒素处理后小鼠肺组织p42／44 MAPK磷酸化水平发生了改变,1 h最高,12 h以后逐渐恢复到接近正常水平。两种方法检测结果显示了较好的一致性,相比之下双色红外荧光技术具有更高的灵敏度、操作方便、节省时间及可以同时检测两种蛋白等优点。结论双色红外荧光技术在蛋白磷酸化的检测方面具有较好的应用前景。
- 刘靖华唐靖蓝兴国刘亚伟李志杰陈芳邓鹏姜勇
- 关键词：蛋白质磷酸化化学发光检测
- SLIPATM喉罩与普通喉罩用于全麻气道管理的比较被引量：12
- 2010年
- 目的 比较SLIPATM喉罩（streamlined pharynx airway liner，SLIPATM）与普通喉罩（1aryngeal maskairway，LMA）用于全麻短小手术气道管理的性能。方法选择60例ASAI或Ⅱ级择期全麻下短小手术的成年患者，随机分为2组，分别建立SLIPATM通气道（SLIPATM组）或LMA通气道（LMA组）。从通气道的操作、咽密封性、正压通气的维持以及副作用等方面对通气道的性能进行评估。结果SLIPATM与LMA插入操作的成功率和难易程度差异无统计学意义。SLIPATM组最大密封压（22±5）cmH，0与LMA组（24±6）cm H2O差异无统计学意义（P〉0．05）。通气道插入后SLIPATM组1例患者（3．3％）、LMA组6例患者（20％）需进一步调整位置方可行间歇正压通气；术中LMA组5例患者（16．7％）需重新调整方可维持间歇正压通气，SLIPATM组均顺利完成手术全程间歇正压通气（P〈0．05）。2种喉罩通气道喉损伤的发生率差异无统计学意义。结论SLIPATM喉罩的临床性能与LMA相似，是一种可替代LMA的通气道。SLIPATM喉罩操作简便，对咽喉损伤较小，维持间歇正压通气较LMA更为稳定。
- 徐建设陈辉傅卫军唐靖
- 关键词：普通喉罩气道管理
