张帆
- 作品数：8 被引量：19H指数：3
- 供职机构：北京林业大学生物科学与技术学院更多>>
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- 相关领域：轻工技术与工程农业科学生物学医药卫生更多>>
- 有效降低牛乳β-乳球蛋白免疫原性的糖基供体研究
- 用低聚壳聚糖、低聚半乳糖、低聚异麦芽糖、壳聚糖和羧甲基壳聚糖对牛乳β-乳球蛋白进行糖基化处理，通过动物实验及ELISA方法检测各糖基化产物的抗原性和免疫原性，结果显示低聚半乳糖的糖基化处理降低牛乳β-乳球蛋白的抗原性和免...
- 杨铮任珊徐晋予张帆夏薇许美玉张柏林
- 关键词：牛乳Β-乳球蛋白免疫原性低聚半乳糖
- 文献传递
- 胡杨果糖-1,6-二磷酸醛缩酶的定位及功能研究被引量：3
- 2013年
- 将从胡杨中克隆的果糖-1,6-二磷酸醛缩酶基因(PeALD)构建到pGEX-4T-1载体上,经IPTG诱导成功获得融合蛋白GST:PeALD,并将蛋白进行纯化,其大小约为52 kD,转化大肠杆菌的耐盐性实验表明,PeALD基因的成功表达有利于提高大肠杆菌菌株的耐盐性。为研究该基因编码蛋白在植物细胞中的定位,将基因的ORF区构建到定位表达载体pMDC85上,通过PEG介导的拟南芥瞬时转化法观察融合蛋白PeALD:GFP在细胞中的定位情况,结果显示该蛋白定位于胞质中,由此说明实验克隆得到的该胡杨果糖-1,6-二磷酸醛缩酶基因编码的是胞质蛋白。烟草种子在盐培养基上的萌发实验结果显示转基因烟草具有更高的耐盐性;烟草水培苗经200 mmol/L NaCl处理一周后,可溶性糖的质谱检测结果显示转基因植株中葡萄糖的含量有很大提高。表明胡杨果糖-1,6-二磷酸醛缩酶通过促进糖酵解和有氧呼吸途径来提高植物对盐胁迫的适应性。
- 胡月张帆申泽丹于瑞赵瑞沈昕陈少良
- 关键词：果糖-1,6-二磷酸醛缩酶原核表达亚细胞定位耐盐性
- 低聚异麦芽糖糖基化法降低牛乳β-乳球蛋白抗原性被引量：3
- 2009年
- 利用凝胶过滤层析法从牛乳乳清分离蛋白中分离纯化β-乳球蛋白,然后利用美拉德反应制备β-乳球蛋白与低聚异麦芽糖结合产物。通过竞争和非竞争ELISA法检测该结合产物的抗原性,结果显示糖基化后的β-乳球蛋白的抗原性得到显著降低。利用双缩脲法和苯酚硫酸法测定该结合物的组成,结果显示该结合物中β-乳球蛋白和低聚异麦芽糖摩尔比为1:8。进而对该结合物进行凝胶过滤层析和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,结果显示该结合物相对分子量为44kDa,仍保持原有二聚体结构。
- 任珊康慧杨铮张帆徐卉石磊许美玉
- 关键词：Β-乳球蛋白低聚异麦芽糖糖基化抗原性
- 杏仁蛋白木瓜蛋白酶解液抑制血管紧张素转换酶活性被引量：3
- 2010年
- 用盐析法从苦杏仁中提取蛋白,分别用胰蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶对其进行水解,研究杏仁蛋白水解液对血管紧张素转换酶活性的影响。结果表明,杏仁蛋白的4种酶水解液均能抑制血管紧张素转换酶活性,其中木瓜蛋白酶水解液抑制效果最显著。用木瓜蛋白酶通过分别不同时间的水解,制备不同水解度的杏仁蛋白水解液,进一步研究对血管紧张素转换酶活性抑制率的影响,结果表明,水解度在7%～12%之间的杏仁蛋白木瓜蛋白酶水解液的抑制效果最佳,抑制率在46%～44%。以上结果表明,杏仁蛋白的木瓜蛋白酶水解液是血管紧张素转换酶抑制活性肽的较理想来源。
- 张帆夏薇赖莹汪涛许美玉
- 关键词：杏仁蛋白血管紧张素转换酶木瓜蛋白酶
- 胡杨果糖-1,6-二磷酸醛羧酶基因PeALD的克隆及耐盐性分析被引量：6
- 2011年
- 胡杨(Populus euphratica Oliv)是优良的抗逆树种,有很强的耐盐碱性。前期胡杨转录组研究结果显示盐胁迫可诱导果糖-1,6-二磷酸醛羧酶基因(PeALD)转录上调,提示该基因可能对胡杨耐盐性方面有某种贡献。为分析PeALD基因在胡杨耐盐性中的作用,本研究以胡杨为材料,利用RT-PCR方法克隆了胡杨果糖-1,6-二磷酸醛羧酶基因的全长cDNA,通过基因转化法尝试在烟草中过量表达该基因,并对转基因株系的耐盐性进行初步分析。研究结果显示,克隆的cDNA编码果糖-1,6-二磷酸醛羧酶,ORF为1177bp,是由247个氨基酸编码的疏水性蛋白,理论等电点为6.84,分子量为26.79kD。PCR与RT-PCR检测结果表明,外源的PeALD基因通过转化已经整合到烟草的染色体中,并在4个株系中得到较强的表达。转化株系表型筛选实验表明,在200mmol/L NaCl的MS培养基中培养15d后,野生型烟草植株无明显高生长,叶片全部黄化并萎缩;而转基因烟草高生长基本没有受到抑制,植株生长良好。说明在烟草中过表达PeALD使转化植株的耐盐性显著提高。光合数据结果显示,ALD基因能够降低盐胁迫对烟草叶片净光合速率的影响,可能是PeALD过表达加速了卡尔文循环的运转,提高了CO2的固定速率,进而促进了光合活性,通过光合作用促进碳的积累,利于呼吸作用和氧化磷酸化产生ATP,为维持跨膜质子浓度梯度提供能量,从而有可能促进质膜上的Na+/H+逆向转运,利于细胞质膜保持拒盐性。这些结果初步验证了PeALD基因的耐盐性功能,为进一步深入研究该基因在耐盐机制中的作用奠定了良好基础。
- 张帆常李伟丁明全侯佩臣沈昕陈少良
- 关键词：转基因烟草抗盐性
- 有效降低牛乳β-乳球蛋白免疫原性的糖基供体研究被引量：2
- 2010年
- 用低聚壳聚糖、低聚半乳糖、低聚异麦芽糖、壳聚糖和羧甲基壳聚糖对牛乳β-乳球蛋白进行糖基化处理,通过动物实验及ELISA方法检测各糖基化产物的抗原性和免疫原性,结果显示低聚半乳糖的糖基化处理降低牛乳β-乳球蛋白的抗原性和免疫原性效果最佳,分别降低41%和18%。凝胶过滤层析和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析结果显示,低聚半乳糖糖基化产物的相对分子质量为40kDa,保持原有的二聚体结构。该结合物与β-乳球蛋白比较,乳化稳定性、溶解性和分散性无显著性差异,而热稳定性和抗氧化性明显提高。以上结果表明,低聚半乳糖是糖基化法降低牛乳β-乳球蛋白免疫原性的较理想的糖基供体。
- 杨铮任珊徐晋予张帆夏薇许美玉
- 关键词：免疫原性糖基化低聚半乳糖
- 高分子量乳清蛋白抑制幽门螺旋杆菌黏附性研究
- 2009年
- 用血凝抑制实验,研究牛乳中抑制幽门螺旋杆菌黏附性成分,结果发现高分子量乳清蛋白浓缩物(HWPC)具有抑制幽门螺旋杆菌血凝作用。用凝胶过滤层析法按分子量大小依次将HWPC分为F1、F2、F3三个组分,其中仅F2组分显示血凝抑制作用。经MALDI-TOF-MS及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析显示,F2组分的分子量在73～164kDa,其主要成分是由分子量为14kDa和(或)18kDa亚基形成的多聚体蛋白。以上结果表明,以特定形式存在的高分子量乳清蛋白具有抑制幽门螺旋杆菌黏附性作用。
- 康慧任珊杨铮张帆徐卉马颀许美玉
- 关键词：幽门螺旋杆菌黏附性乳清蛋白高分子量
- 低聚半乳糖糖基化法降低牛乳α_(s1)-酪蛋白抗原性和免疫原性被引量：2
- 2011年
- 用等电点沉淀法从牛乳中提取酪蛋白,根据αs-酪蛋白对尿素溶液溶解特性从酪蛋白中提取αs-酪蛋白,并用阴离子交换层析使αs1-酪蛋白与αs2-酪蛋白分离。用低聚半乳糖通过在一定条件下的美拉德反应对αs1-酪蛋白进行糖基化处理,通过竞争ELISA实验检测αs1-酪蛋白糖基化产物的抗原性。结果表明,该糖基化产物的抗原抗体结合常数Kd较αs1-酪蛋白上升3.7倍,即低聚半乳糖糖基化处理使αs1-酪蛋白的抗原性得到显著降低。用动物实验和非竞争ELISA实验检测αs1-酪蛋白糖基化产物的免疫原性,结果显示免疫原性降低19%,该实验证实对降低牛乳αs1-CN抗原性和免疫原性具有显著效果,为开发较理想的、切实可行的新脱敏奶粉生产技术提供了科学依据。
- 夏薇张帆赖莹杨铮许美玉
- 关键词：低聚半乳糖糖基化抗原性免疫原性
