陈玉环
- 作品数：12 被引量：22H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 抗鸭坦布苏病毒E蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：3
- 2014年
- 为了制备抗鸭坦布苏病毒(DTMUV)囊膜(E)蛋白的单克隆抗体,将鸭坦布苏病毒E基因进行原核表达,目的蛋白被纯化后免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,按常规的单克隆抗体的制备技术,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,经间接ELISA方法筛选及3次连续克隆化共获得6株能稳定分泌抗E蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,它们分别被命名为1F3、1G2、1B11、2A5、3B6和4F9。Dot-ELISA及Western-blot分析结果表明,这6株单克隆抗体均能与原核表达的E蛋白特异性结合。经间接免疫荧光(IFA)试验验证,这6株单克隆抗体均能识别鸭坦布苏病毒感染的细胞,且荧光主要位于细胞质中。结果表明,本研究成功制备了6株抗鸭坦布苏病毒E蛋白的单克隆抗体。鸭坦布苏病毒E蛋白单克隆抗体的制备为今后鸭坦布苏病毒快速的病原学诊断以及E蛋白的结构和功能研究奠定了物质基础。
- 白小飞刘红玉陈玉环殷秀辰刘明张云
- 关键词：E蛋白原核表达单克隆抗体免疫印迹斑点杂交间接免疫荧光
- 一株鹅源巴氏杆菌的分离鉴定及耐药性分析被引量：15
- 2014年
- 对某种鹅场病死鹅进行剖解,肝涂片镜检后观察到革兰氏染色阴性短小杆菌,瑞氏-吉姆萨染色见两极浓染。用巴氏杆菌特异性引物进行PCR扩增,将扩增产物克隆至pMD18-T载体上,测序结果通过BLAST比对与多杀性禽巴氏杆菌的相似性为99.0%,确定其为多杀性巴氏杆菌。用16种常用抗菌药物的纸片法对该分离菌进行药敏试验,结果显示,该菌对四环素和万古霉素不敏感;对克林霉素、链霉素中度敏感;对内酰胺类(青霉素、氨苄西林)、大环内脂类(红霉素、克拉霉素)、喹诺酮类(环丙沙星)抗生素等高度敏感。用小白鼠和鹅进行动物回归试验,分为0.1mL/只、0.3mL/只和0.5mL/只剂量组,分别皮下接种TSB培养的病原菌,并分别在接种后6h和48h内出现死亡,死亡动物的剖检病变与巴氏杆菌感染的鹅相同,并在病变器官内分离出该病原菌。
- 刘红玉邵周伍林李刚殷秀辰陈玉环吴晓颖刘思国张云
- 关键词：多杀性巴氏杆菌PCR检测耐药性分析
- 抗鸭坦布苏病毒E蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
- 为制备抗鸭坦布苏病毒(Duck tembusu virus,DTMUV)囊膜蛋白(E蛋白)的单克隆抗体(MAb),本研究将DTMUV E基因原核表达,目的蛋白纯化后免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,按常规MAb技术方法,取...
- 白小飞刘红玉陈玉环殷秀辰张云
- 关键词：单克隆抗体
- 文献传递
- 新Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1和3D蛋白的原核表达及鉴定
- 2012年
- 为表达新I型亚肝炎病毒(DHV-1C)的VP1和3D重组蛋白,本研究根据GenBank中的DHV-1C N株全基因序列,设计合成两对引物扩增其VP1和3D基因,构建重组表达载体并进行诱导表达。SDS-PAGE和western blot分析表明,VP1和3D重组蛋白分别在诱导3 h和4 h后表达量达到峰值,其大小分别为37.68 ku和65.80 ku,并且能够与抗DHV-1C阳性血清产生特异性免疫反应。
- 孟凡依殷秀辰李刚陈玉环张云刘明冯新畅
- 关键词：VP1克隆表达
- 一株鹅源坦布苏(Tembusu)病毒的分子特征分析
- 鹅DS-SD-11株全基因组序列分析表明,该病毒由10986个核苷酸组,基因组结构5’-UTR-Cv-Ci-prM-M-ENS1-NS2A-NS2B-NS3-NS4A-2K-NS4B-NS5-3’UTR。本研究对多聚蛋白...
- 陈玉环殷秀辰张云
- 文献传递
- Ⅰ型与新Ⅰ型鸭肝炎病毒分离鉴定及实时荧光定量RT-PCR方法的建立
- 鸭病毒性肝炎(Duck viral hepatitis，DVH)是由鸭肝炎病毒(Duck hepatitis virus，DHV)引起雏鸭的一种高度致死性传染病。本试验旨在建立一种快速、特异、准确的鉴别诊断Ⅰ型与新Ⅰ型鸭...
- 陈玉环
- 关键词：鸭肝炎病毒实时荧光定量PCR检测分型鉴定
- 文献传递
- 鸭坦布苏病毒E蛋白的细胞凋亡功能研究
- 引言由鸭坦布苏病毒（Duck Tembusu virus,DTMUV）引起的以蛋鸭产蛋大幅下降已成为危害我国水禽养殖业的重要传染病之一[1-3]。研究表明DTMUV还可引起蛋鸡和鹅的产蛋下降[2,3],被感染的细胞在很短...
- 邵周伍林白小飞张青山陈玉环张云
- 一株分离自中国鹅源黄病毒的分子鉴定
- 2013年
- 为了分析2011年分离到的1株(ZZ株)引起产蛋量下降的鹅源黄病毒的全基因组序列及病原的分子特性,试验采用PCR技术对其全基因组进行PCR扩增、克隆和测序,之后对多聚蛋白的剪切位点、潜在的糖基化位点、半胱氨酸的分布及3'UTR的二级结构进行分析。结果表明:该病毒由10986个核苷酸组成,并具有典型的黄病毒基因组结构;开放阅读框(ORF)编码3 425个氨基酸(95～10 372 nt);与其他黄病毒比较,该病毒的5'UTR(94 nt)大小居中,而3'UTR(614 nt)相对较长;对多聚蛋白及3'UTR的系统进化树分析显示,ZZ分离株与恩塔亚病毒(Ntaya virus)的巴格扎病毒(Bagazavirus)亲缘关系最近。
- 陈玉环葛铭刘红玉张云
- 关键词：分子鉴定进化分析
- 表达Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒VP1蛋白重组腺病毒的构建被引量：1
- 2013年
- 为构建表达Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒(DHV-Ⅰ)VP1蛋白的重组腺病毒,本实验采用RT-PCR方法扩增DHV-Ⅰ HP-1株VP1基因,克隆于腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV中,并将其电转化于含腺病毒pAdeasy骨架质粒的大肠杆菌BJ5183中,通过同源重组制备含有重组腺病毒的质粒。重组质粒经PacⅠ酶切线性化后转染AD293细胞,获得重组腺病毒(rAd-VP1)。间接免疫荧光和western blot鉴定结果显示,DHV-Ⅰ的VP1蛋白在重组腺病毒感染的AD293中获得表达。rAd-VP1的制备为鸭免疫实验效果评价奠定了基础。
- 殷秀辰刘红玉陈玉环刘明张云
- 关键词：重组腺病毒VP1蛋白
- 一管PCR式鉴别I型鸭肝炎病毒和新I型鸭肝炎病毒的试剂盒
- 本发明提供一种一管PCR式鉴别I型鸭肝炎(DHV-1A)和新I型鸭肝炎(DHV-1C)病毒的试剂盒，所述试剂盒包括引物、处理待检样品的试剂、PCR试剂和使用说明，其中所述引物为SEQ ID NOs：1-3。本发明的试剂盒...
- 张云刘明陈玉环
- 文献传递
