高依然
- 作品数：8 被引量：8H指数：1
- 供职机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 一种诊断用微小隐孢子虫重组抗原
- 本发明公开了一种微小隐孢子虫重组抗原基因MUCIN，及其表达的融合蛋白重组抗原rMUCIN，随机取的520份健康人血清，用重组抗原rMUCIN和rCp23做检测抗原，ELISA检测人血清IgG抗体，用spss软件对数据进...
- 尹继刚高依然向梅姜宁陆慧君陈启军
- 微小隐孢子虫cDNA文库的构建与免疫学筛选
- 2013年
- 【目的】构建微小隐孢子虫cDNA文库,以筛选出可替代天然抗原用于诊断的重组抗原。【方法】首先纯化微小隐孢子虫卵囊,用Trizol Reagent提取总RNA,构建全长cDNA;分别用蛋白酶K与Sfi消化、酶切处理cDNA,采用Column Spin H-1000分离柱分离cDNA,连接λTriplEx2载体,构建cDNA文库。扩增cDNA文库,用兔抗微小隐孢子虫血清作探针对cDNA文库进行初筛和复筛,将复筛得到的阳性克隆连接PMD18-T载体,测序后进行序列比对。【结果】微小隐孢子虫cDNA文库噬菌斑插入片段长度为1.5kb左右,库容大于107。经过筛选共获得了20个微小隐孢子虫阳性克隆,测序后从中选出了4个主要免疫识别抗原蛋白,分别为MUCIN蛋白、乳酸脱氢酶、微管相关蛋白和子孢子抗原蛋白。【结论】成功构建了微小隐孢子虫cDNA文库,并筛选出了4个主要免疫识别抗原蛋白,为隐孢子虫的血清学诊断提供了重组抗原。
- 高依然张静韩福松陆慧君姜宁陈启军尹继刚
- 关键词：微小隐孢子虫CDNA文库构建免疫学筛选
- 微小隐孢子虫cDNA文库的构建、筛选与间接ELISA检测方法的建立
- 微小隐孢子虫(C. parvum)为细胞内原虫，主要感染宿主小肠上皮细胞，可引起人兽共患隐孢子虫病（cryptosporidiosis），该病通常由于宿主接触粪便中的卵囊而传播。在免疫功能正常的宿主体内此病表现为腹痛、发...
- 高依然
- 关键词：微小隐孢子虫CDNA文库免疫学筛选重组抗原间接ELISA
- 文献传递
- 抗微小隐孢子虫TSP6蛋白单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的在大肠埃希菌中可溶性表达微小隐孢子虫TSP6抗原分子,并以其纯化产物为抗原,利用杂交瘤技术生产抗TSP6单克隆抗体(McAb)。方法将pGEX-4T-1-TSP6重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3),经0.1mmol/LIPTG诱导表达后超声破菌,获得可溶性表达产物,通过Gluthathione-Sepharose 4B磁珠纯化蛋白质,以纯化的重组TSP6为抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术进行细胞融合,用ELISA和有限稀释法筛选分泌高滴度McAb的杂交瘤细胞株,测定其免疫球蛋白亚类及效价,Western blot分析其特异性。结果筛选出2株杂交瘤细胞能稳定分泌抗TSP6单克隆抗体,经鉴定均为IgG1。Western blot分析显示,制备的单抗均能与相应的重组蛋白特异性结合。结论制备的抗TSP6杂交瘤细胞株能分泌高特异性的McAb。
- 张静赵继学韩福松高依然陆慧君姜宁尹继刚
- 关键词：微小隐孢子虫可溶性表达单克隆抗体
- 微小隐孢子虫TSP9蛋白功能的初步研究
- 2014年
- 隐孢子虫是一种属于顶复门的机会性寄生原虫，寄生于哺乳动物（包括人类）的胃肠道、禽类呼吸道等黏膜上皮细胞内，引起隐孢子虫病。隐孢子虫病是6种世界最常见腹泻病之一，对免疫正常的个体引起自限性腹泻，对免疫受损的个体（老人、儿童、艾滋病患者等）引起致死性腹泻，感染途径主要是通过与病人和患病动物接触及食用污染的水和食物。据报道，1933年在美国威斯康星州地区曾有40万人感染隐孢子虫，至少导致70人死亡。
- 韩福松高依然孙婷张星星刘刚尹继刚
- 关键词：微小隐孢子虫隐孢子虫病蛋白寄生原虫哺乳动物
- 微小隐孢子虫cDNA文库的构建与免疫学筛选
- 2014年
- 【目的】构建微小隐孢子虫eDNA文库，以筛选出可替代天然抗原用于诊断的重组抗原。【方法】首先纯化微小隐孢子虫卵囊，用TrizolReagent提取总RNA，构建全长cDNA；分别用蛋白酶K与sfi消化、酶切处理cDNA，采用ColumnSpinH-1000分离柱分离eDNA，连接入TriplEx2载体，
- 高依然
- 关键词：CDNA文库微小隐孢子虫免疫学筛选全长CDNA重组抗原总RNA
- 东北地区部分犊牛感染贾第虫的基因型及基因亚型分析被引量：6
- 2012年
- 采用巢式PCR方法鉴定东北部分地区牛源贾第虫的基因型。提取DNA后经巢式PCR扩增TPI基因,扩增产物测序后用BLAST和MEGA 4.0软件进行同源性和系统发育分析。结果表明,吉林市和长春分离株属于蓝氏贾第虫的Assemblage E型;大庆分离株中蓝氏贾第虫的Assemblage E和Assemblage A型均存在。
- 张静苏艳白光彦王春仁高依然韩福松姜宁陈启军尹继刚
- 关键词：贾第虫基因型基因亚型
- 一种诊断用微小隐孢子虫重组抗原
- 本发明公开了一种微小隐孢子虫重组抗原基因<i>MUCIN</i>，及其表达的融合蛋白重组抗原rMUCIN，随机取的520份健康人血清，用重组抗原rMUCIN和rCp23做检测抗原，ELISA检测人...
- 尹继刚高依然向梅姜宁陆慧君陈启军
- 文献传递
