白凤
- 作品数:3 被引量:2H指数:1
- 供职机构:山西医科大学第一医院更多>>
- 发文基金:山西省科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 鞘内注射人前脑啡肽基因修饰HEK293细胞在脑脊液释放L-EK情况及L-EK对骨癌痛的镇痛效果
- 2014年
- 目的 评价鞘内注射人前脑啡肽基因(hPPE)修饰人胚胎肾(HEK293)细胞在脑脊液释放亮氨酸脑啡肽(L-EK)情况及L-EK对骨癌痛的镇痛效果.方法 CIBP雌性SD大鼠40只,采用随机数字表法分为移植组(CIBP+ hPPE/HEK293)和对照组(CIBP+ HEK293),每组20只.于接种癌细胞前1d、接种后8、15、21、25、32和35 d(T17)时测定大鼠热缩爪潜伏期,记录舔/咬移植侧爪次数,以及自由活动时后肢跛行程度.于T4时观测后各组随机取10只大鼠大鼠处死,冰浴收集脑脊液,采用放射免疫法检测hPPE的表达.结果 与对照组比较,移植组大鼠T4-7时热缩爪潜伏期延长,脑脊液L-EK浓度升高,大鼠舔/咬移植侧爪次数及自由活动时后肢跛行程度评分降低(P<0.01).结论 大鼠鞘内移植经慢病毒转染hPPE修饰的HEK293细胞株可持续分泌L-EK,有效减轻骨癌痛.
- 潘喻飞杨保仲薛朝霞白凤胡博郭旭丽
- 关键词:基因修饰疼痛测定
- 人前脑啡肽基因修饰人胚胎肾细胞的构建被引量:2
- 2012年
- 目的构建人前脑啡肽基因(hPPE)修饰的人胚胎肾细胞(HEK293细胞)。方法重组质粒peDNA3.1(+)/hPPE经限制性内切酶HindHI和NotI进行双酶切获得hPPE基因,运用基因重组技术将hPPE基因与表达载体同源重组,转染293T细胞进行慢病毒包装、扩增、纯化,测定病毒滴度,再将重组的慢病毒载体转染HEK293细胞。用Westernblot法检测hPPE基因在HEK293细胞中的表达。结果重组慢病毒载体阳性克隆测序结果和基因库的hPPE基因序列完全一致。含有hPPE基因的慢病毒载体,滴度为2.07×10^8TU/ml。转染慢病毒载体后的HEK293细胞,在荧光显微镜下未见到GFP荧光。转染Ubc—GFP—L.V.空病毒载体的HEK293细胞,可见到较强的荧光。Westernblot法检测到经慢病毒载体转染后的HEK293细胞中hPPE基因表达呈阳性。结论成功构建了hPPE基因修饰的HEK293细胞,使hPPE基因可在HEK293细胞中稳定表达。
- 白凤杨保仲薛朝霞潘喻飞黄平
- 关键词:脑啡肽类细胞系基因修饰基因疗法
- 人前脑啡肽原在HEK293细胞中的表达
- 2011年
- 转基因细胞移植镇痛为疼痛治疗带来新的方向,本研究成功构建含抗痛基因人前脑啡肽原重组载体,现报告如下。
- 杨保仲李静薛朝霞白凤潘宇飞
- 关键词:前脑啡肽原HEK293细胞转基因细胞移植