苏良科
- 作品数：14 被引量：33H指数：4
- 供职机构：上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 猪圆环病毒Ⅱ型的分子生物学研究与套式PCR诊断方法的建立及推广应用
- 宋长绪王贵平高向阳林志雄蒋智勇刘燕玲朱道中黄忠苏良科蔡汝健孔德胜李春玲季芳陈建君王浩文
- 建立的检测PCV2的套式PCR方法在生产中已进行了规模化应用，共对287大中型猪场1560份样品进行了检测，其中检测病理材料103份，血清1427份，精液20份。检测的样品中阳性率为63%。其中阳性猪场达72%，检测样品...
- 关键词：
- 关键词：圆环病毒分子生物学
- 马链球菌兽疫亚种中国株的类M蛋白基因抗原表位片段的克隆与表达
- 根据登录的马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi subsp.zooepidemicus)纽约分离株w60类M蛋白基因序列,设计和合成一对引物,以该菌中国分离株ATCC35246的基因组DNA为模板,扩增...
- 苏良科陆承平
- 关键词：马链球菌兽疫亚种中国株类M蛋白抗原表位猪链球菌病
- 文献传递
- 源自大肠杆菌O157编码Stx2毒素的噬菌体特性研究
- 丝裂霉素C诱导8株大肠杆菌O157释放编码Stx2毒素的噬菌体。以地高辛(DIG)标记的stx2基因片段作为探针。应用Southern blot对纯化的噬菌体进行鉴定。通过限制性内切酶图谱分析,确定噬菌体的核酸类型、基因...
- 夏炉明苏良科孙建和严亚贤
- 关键词：SDS-PAGE
- 文献传递
- 8株动物源编码Stx2短尾噬菌体的生物学特性
- 2008年
- 【目的】对8株源自大肠杆菌O157编码Stx2毒素的噬菌体生物学特性进行研究。【方法】丝裂霉素C诱导8株大肠杆菌O157菌株释放噬菌体,采用PCR作初步鉴定,分离、纯化噬菌体基因组,随机引物法地高辛(DIG)标记stx2基因片段作为探针,对纯化的噬菌体采用Southern blot进行Stx2噬菌体再次鉴定,透射电子显微镜观察纯化的8株Stx2噬菌体的形态特征,通过限制性内切酶图谱分析,确定噬菌体的核酸类型和基因组大小、以及限制性内切酶酶切片段多态性,并分析噬菌体的蛋白质组成特征。【结果】Southern blot证实分离的8株噬菌体为Stx2噬菌体,电镜下观察的各株Stx2噬菌体形态一致,头部均为正六边形,尾部很短,属于短尾噬菌体科,各株噬菌体之间存在相同的蛋白结构模式,基因组为双链DNA,限制性内切酶片段长度表现出一定的多态性,噬菌体的基因组大小从48.0～65.3kb不等。【结论】来源不同菌株的8株编码Stx2噬菌体均为短尾噬菌体,其蛋白结构模式一致,但基因组具有不同组成。
- 夏炉明苏良科孙建和严亚贤
- 关键词：SDS-PAGE
- 马链球菌兽疫亚种类M蛋白亚单位疫苗的研制
- 马链球菌兽疫亚种引致的猪链球菌病主要发生在我国，国外报道较少。该菌可引起牛、马的子宫内膜炎，流产，牛乳腺炎，猪的化脓性关节炎和败血症。它的致病因子包括非抗原性的透明质酸荚膜、透明质酸、链溶素O、链激酶、IgG Fc受体蛋...
- 苏良科
- 关键词：类M蛋白克隆表达抗原佐剂
- 文献传递
- 马链球菌兽疫亚种中国株的类M蛋白基因抗原表位片段的克隆与表达被引量：8
- 2004年
- 目的 构建马链球菌兽疫亚种 (Streptococcusequisubsp zooepidemicus)中国株的类M蛋白基因抗原表位片段的重组表达质粒 (pET -Szp) ,并检测表达产物的免疫反应性。 方法 根据GenBank登录的马链球菌兽疫亚种纽约分离株w6 0类M蛋白基因序列设计和合成引物 ,以该菌中国分离株ATCC35 2 4 6的基因组DNA为模板 ,扩增类M蛋白基因 5’端第 5 83～ 10 6 8bp片段 ,并按正确的阅读框架定向克隆到表达载体pET - 32a(+)中 ,将重组质粒转化大肠杆菌BL2 1株 ,用IPTG诱导表达 ,并通过SDS -PAGE和免疫印迹对表达蛋白进行初步分析。结果 扩增出 4 86bp的马链球菌兽疫亚种ATCC35 2 4 6的类M蛋白基因片段 ,该基因在大肠杆菌表达系统中经诱导 ,得到分子量为 5 0 0 0 0的表达产物 ,免疫印迹表明该产物具有特异的免疫反应性。结论 成功构建了表达马链球菌兽疫亚种中国株类M蛋白片段的重组表达质粒 ,并实现在大肠杆菌中表达 ,为重组类M蛋白亚单位疫苗的研制奠定了基础。
- 苏良科陆承平
- 关键词：马链球菌兽疫亚种重组表达质粒免疫反应性
- 马链球菌兽疫亚种ATCC35246株类M蛋白的提取被引量：5
- 2004年
- 马链球菌兽疫亚种 (Streptococcusequisubsp.zooepidemicus) 是引起我国猪链球菌病的主要病原之一 ,其类M蛋白是一重要的毒力因子和保护性抗原。用热酸提取的马链球菌兽疫亚种ATCC352 4 6株类M蛋白 ,作SDS PAGE电泳 ,在电泳图谱中出现相对分子质量为 43 0 0 0、 34 0 0 0、33 0 0 0、31 0 0 0和 30 0 0 0等 5条主蛋白带。免疫印迹显示 ,这 5条主蛋白带都能被ATCC352 4 6的全菌兔血清识别 。
- 苏良科陆承平
- 关键词：马链球菌兽疫亚种类M蛋白链球菌病亚单位疫苗
- Stx2噬菌体ΦMin27的stx2基因突变株构建及其感染特性
- 利用λ噬菌体的Red重组系统,将氯霉素抗性基因(cat)插入到大肠杆菌O157:H7 Min27株的stx2基因中。获得O157:H7 Min27的突变菌株Min27(Δstx::cat)。用丝裂霉素对该突变菌株进行诱导...
- 苏良科严亚贤陆承平
- 关键词：大肠杆菌O157:H7
- 文献传递
- 志贺毒素2型噬菌体ΦMin27的stx2基因突变株构建及其感染特性被引量：3
- 2008年
- 【目的】通过构建一株stx2基因突变的志贺毒素2型噬菌体,来观察它对不同血清型大肠杆菌的感染特性。【方法】利用λ噬菌体的Red重组系统,将氯霉素抗性基因(cat)插入到大肠杆菌O157:H7Min27株的stx2基因中,获得O157:H7Min27的突变菌株Min27(△stx∷cat)。用丝裂霉素对该突变菌株进行诱导,结合抗性标记和PCR方法筛选出一株突变的志贺毒素2型噬菌体,命名为ΦMin27(△stx∷cat)。采用双层琼脂平板法和氯霉素抗性筛选的方法,观察ΦMin27(△stx∷cat)感染21株不同血清型大肠杆菌后的裂解和溶原转换情况。【结果】2株血清型分别为O60和O138的大肠杆菌可以被ΦMin27(△stx∷cat)溶原感染,表现出对氯霉素的抗性,但没有形成噬菌斑,而大肠杆菌MG1655株既可以被溶原又可以被裂解。溶原的菌株经丝裂霉素诱导后,能释放出感染性的ΦMin27(△stx∷cat)颗粒,并对大肠杆菌MC1061进行裂解形成噬菌斑。【结论】ΦMin27(△stx∷cat)可以感染和溶原特定的大肠杆菌,且溶原菌株能释放出原感染性的噬菌体,显示出ΦMin27噬菌体具有携带外源基因在若干不同血清型的大肠杆菌间水平转移的能力,为进一步研究Stx噬菌体的感染机理和志贺毒素表达调控奠定了基础。
- 苏良科严亚贤陆承平
- 关键词：大肠杆菌O157:H7
- 类M蛋白亚单位疫苗的佐剂筛选被引量：6
- 2004年
- 将铝胶、ISA2 0 6和CpG三种佐剂分别与热盐酸提取的马链球菌兽疫亚种 (Streptococcusequisubsp.zooepidemicus)ATCC35 2 4 6株类M蛋白配合 ,制成疫苗接种 2 0日龄的小鼠 ,并设不加佐剂的类M蛋白亚单位疫苗免疫对照组。二次免疫后用ATCC35 2 4 6株活菌攻击 ,铝胶、ISA2 0 6、CpG和对照组的保护率分别为 75 % ( 1 2 /1 6)、81 .2 5 % ( 1 3/1 6)、68.75 % ( 1 1 /1 6)和5 6.2 5 % ( 9/1 6)。试验结果表明ISA2 0 6的免疫增强作用高于其他两种佐剂 ,可望与类M蛋白亚单位疫苗配合 ,用于预防猪链球菌病。
- 苏良科陆承平
- 关键词：类M蛋白佐剂亚单位疫苗马链球菌兽疫亚种猪链球菌病
