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抗小鼠H-Y抗原IgY抗体的纯化被引量：1: 2008年; 用 Ni-NTA 柱纯化 SMCY 重组蛋白,将该蛋白作为配基偶联至 CNBr 活化的 Sepharose 4B制成亲和层析柱,分离纯化抗 H-Y 抗原的特异性 IgY 抗体。结果表明:Ni-NTA 柱纯化后,SMCY 重组蛋白纯度可达到80%左右;亲和层析柱纯化可以使IgY 抗体的纯度达到97%,经免疫组化检测,该抗体能够结合与雄性小鼠肝脏细胞表面,而不与雌性小鼠肝脏细胞发生结合。证实了经过纯化得到的高纯度 IgY 抗体具有很好的抗 H-Y 抗原特异性。通过该方法可纯化分离得到高纯度抗 H-Y 抗原 IgY 抗体。; 刘本成药晨江雷庆李欣周颖徐汪节李巧丽王朝霞乔中东; 关键词：H-Y IGY

基于H－Y抗原分选奶牛X精子的免疫磁珠负筛选法: 一种基于H-Y抗原分选奶牛X精子的免疫磁珠负筛选法，选择H-Y抗原所特有的4个抗原决定簇，利用反转录聚合酶链反应法扩增后连接，获得只编码这4个抗原决定簇的基因重组体并将其亚克隆入表达载体pET28a，在大肠杆菌BL21中...; 乔中东药晨江赵仰星周颖; 文献传递

健康人成熟精子中mRNA的种类特征: 2007年; 目的分析具有正常生育能力男性成熟精子mRNA的种类特征。方法健康并育有后代的成年男性11例,禁欲3～5d后取精液,上游法纯化精子,Trizol试剂提取精子总RNA。混合所有总RNA进行基因表达系列分析(SAGE),随后对所得SAGE文库进行功能聚类性分析。结果所建SAGE文库共获877个克隆,测序得到21052个标签,出现两次以上的独特性标签有2712种。SAGE文库用DAVID软件进行功能性聚类分析,高丰度的389个基因能聚合成25组功能性的基因。最突出的是一组核蛋白基因、参与DNA依赖的基因转录和转录调节;其次是与胞质,核糖体蛋白以及蛋白质合成相关的基因;其他基因类别还包括蛋白多肽水解相关蛋白;具有蛋白激酶活性,蛋白氨基酸磷酸化、蛋白修饰相关蛋白;免疫相关蛋白等。结论人成熟精子中存在数量庞大、种类繁多的mRNA,这些mRNA可能并不仅仅是在精子形成过程中残留下来的,它的功能可能包括重新翻译以替代降解的蛋白、染色质的重组装,受精过程中传递一些父系必须的RNAs到卵子中以进行表观遗传。; 药晨江赵仰星李巧丽徐汪节王朝霞周颖乔中东王一飞; 关键词：精子基因表达系列分析

精子中H-Y抗原的蛋白和mRNA表达背离被引量：1: 2007年; 目的:进一步验证成熟精子中是否存在H-Y抗原的mRNA,并探讨精子mRNA的保留机制。方法:采集健康男性志愿者的精液,通过上游法纯化精子,使用多克隆抗H-Y抗原的IgY抗体和FITC标记的兔抗鸡IgG对精子进行免疫组化和流式细胞仪检测,观察成熟Y精子膜表面是否带有H-Y抗原。提取成熟精子总RNA,用RT-PCR的方法观察精子mRNA中是否含有H-Y抗原的mRNA。结果:免疫组化实验显示可在许多精子的头部与尾部的交界处非常清晰地看到H-Y抗原的荧光;流式细胞仪检测显示49.86%精子为H-Y抗原阳性。RT-PCR结果显示,未扩增到H-Y抗原的mRNA特异性条带。结论:成熟精子表面存在有H-Y抗原,但未检测到H-Y抗原的mRNA。; 张志明徐汪节药晨江周颖王朝霞乔中东; 关键词：精子

小鼠Y染色体编码基因mRNA在成熟精子中保留情况的研究被引量：3: 2009年; 目的:探讨成熟精子中Y染色体编码基因mRNA的保留情况。方法:从小鼠Y染色体长臂和短臂上选择10个重要基因,应用RT-PCR方法分析这些基因在成熟精子、睾丸、雄脑和雌脑中的表达。结果:所选基因在睾丸中均有表达,而成熟精子只有Dby基因表达。结论:成熟精子对所选的10个Y染色体编码基因mRNA选择性地保留,在小鼠成熟精子中仅仅保留了Dby的mRNA。; 雷庆药晨江徐汪节刘本成朱子珏王朝霞乔中东; 关键词：Y染色体 MRNA RT-PCR

基于H－Y抗原分选奶牛X精子的免疫磁珠负筛选法: 一种基于H－Y抗原分选奶牛X精子的免疫磁珠负筛选法，选择H－Y抗原所特有的4个抗原决定簇，利用反转录聚合酶链反应法扩增后连接，获得只编码这4个抗原决定簇的基因重组体并将其亚克隆入表达载体pET28a，在大肠杆菌BL21中...; 乔中东药晨江赵仰星周颖; 文献传递

抗H-Y抗原抗体的制备和成熟精子中Y染色体编码基因mRNA的研究: 作为雄性生殖细胞的精子,其承担着将父亲的遗传物质传递给卵子的任务。长期以来,人们一直认为,精子传递给卵子的遗传物质仅仅包含父亲的基因组DNA。按照这种观点,精子作为一个终末分化的细胞,其除了高度压缩的染色体DNA和薄薄的...; 药晨江; 关键词：精子胚胎发育; 文献传递

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药晨江