许乐仁
- 作品数：109 被引量：391H指数：16
- 供职机构：贵州大学动物科学学院动物医学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生经济管理更多>>
- 羊痘病毒P32基因生物信息学分析被引量：4
- 2011年
- 为获得羊痘病毒P32基因生物信息学资料,扩增山羊痘病毒贵州LD株的P32基因,并进行克隆、测序与序列分析;以P32基因的推导氨基酸序列为材料,应用计算机技术和生物学软件预测P32蛋白的跨膜结构、亲水性、抗原指数、柔韧性、表面可及性和二级结构,综合评价P32蛋白的抗原表位。结果表明,羊痘病毒P32基因核苷酸和氨基酸同源性分别达到97.8%和95.6%以上;P32蛋白为含有一个跨膜结构的膜蛋白;肽段227-251区域的各种预测指数均高,推断该区域为一个潜在的优势抗原表位。数据分析显示,P32蛋白具有较强的抗原性,该结果将为GPV P32基因工程疫苗的研究和体外表达产物的应用提供依据。
- 程振涛岳筠周碧君许乐仁王开功文明李永明
- 关键词：羊痘病毒P32基因生物信息学
- 山羊痘病毒P32基因重组表达载体的构建及原核表达被引量：2
- 2007年
- 以含山羊痘病毒贵州LD株P32基因的质粒pMD18-T-P32/LD为模板,应用PCR方法扩增P32基因,将该基因片段克隆至原核表达载体pET-28a,构建了重组表达载体pET-28a-P32/LD,转化大肠杆菌BL21(DE3)中并诱导表达。SDS-PAGE分析结果显示,有分子量约为35.5 ku的融合蛋白获得表达,与预期结果相符;Western-Blotting证实该表达蛋白具有免疫学活性。P32蛋白的成功表达为山羊痘基因工程疫苗的研制及诊断方法的建立奠定了基础。
- 程振涛岳筠徐春志李永明许乐仁文明周碧君
- 关键词：山羊痘病毒P32基因原核表达
- 水牛胆管细胞性肝癌并腹腔广泛转移被引量：1
- 1989年
- 牛胆管细胞性肝癌(Cholangiocellar Liver Carcinoma)都比较少见,本文报道了一例水牛的胆管细胞性肝癌,对其大体及组织病理学特点进行了简略的描述讨论。 1 病例来源及剖检 1987年12月,惠水县农民杨应明从花溪集市上购入14岁雌性水牛一头,体重约300公斤。据买主称,购买时该牛无明显临床异常。当天经约10公里驱赶后歇息过夜。
- 许乐仁刘继跃
- 关键词：胆管细胞病理学特点细胞性肝细胞腺瘤
- 山羊痘病毒P32基因的克隆、测序及在原核细胞表达被引量：1
- 2008年
- 为比较山羊痘病毒贵州分离株P32基因与国内外分离株的关系,并获得P32蛋白,应用PCR方法从贵州山羊痘病毒分离株的核酸样本中扩增出P32基因片段,将PCR产物克隆至pMD18-T载体,对重组质粒进行了基因序列测定。将测定的P32基因核苷酸序列和推导的氨基酸序列与GenBank中相应序列作比较,同源性分别达到99.4%和98.4%,表明山羊痘病毒的P32基因具有高度保守性。将P32基因克隆至原核表达载体pET-28a,成功构建重组表达质粒pET-28a-P32/LD,转化至大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达。SDS-PAGE检测显示,重组细菌在35.5 kDa处表达一条特异性的蛋白带,而阴性对照未见这条蛋白带;Western-Blotting检测证实,这条蛋白带能与山羊痘高免血清反应而显示其免疫学活性。
- 程振涛岳筠徐春志李永明许乐仁文明周碧君
- 关键词：山羊痘病毒P32基因基因克隆原核表达
- 山羊痘病毒诱导BHK-21细胞凋亡的检测被引量：2
- 2011年
- 为验证山羊痘病毒诱导BHK-21细胞出现凋亡现象的存在,分别采用HE染色、凋亡试剂盒检测、流式细胞仪检测和DNA Ladder检测,对山羊痘病毒感染的BHK-21细胞培养物进行细胞凋亡检测。不同方法检测结果均显示,山羊痘病毒感染BHK-21细胞组相同时间细胞凋亡数明显高于对照组。表明山羊痘病毒可诱导BHK-21细胞发生凋亡。
- 程振涛岳筠周碧君王开功文明李永明许乐仁朱时杰
- 关键词：山羊痘病毒BHK-21细胞细胞凋亡
- 山羊痘病毒ITR基因片段的克隆与序列分析被引量：1
- 2008年
- 应用PCR方法扩增山羊痘病毒QL、LD、Y和B株ITR基因片段,插入pMD18-T载体,转化DH5α感受态细胞,提取重组载体经PCR和酶切鉴定后测序,并与GenBank上8株羊痘病毒相应序列进行同源性分析。结果经PCR扩增,4株病毒均可得到一条均一的DNA片段,该片段可被内切酶AluⅠ特异酶切,而且该PCR的DNA模板最小检出量为24.40pg。经测序,该基因片段长度为289bp;序列比较发现,4株病毒ITR片段与GenBank上2株山羊痘病毒的核苷酸与氨基酸序列同源性均为100%,与3株绵羊痘病毒分别为98.2%和96.5%,与3株牛疙瘩皮肤病病毒为98.2%～99.3%和96.5%～97.7%。这表明ITR基因片段在羊痘病毒属中较为保守,可以针对ITR基因建立羊痘病毒的PCR检测方法。
- 王开功岳筠徐春志程振涛周思旋罗阿东周碧君许乐仁
- 关键词：山羊痘病毒PCR
- 应用反向间接血凝试验检测山羊痘病毒抗原被引量：26
- 2005年
- 以兔抗山羊痘病毒IgG致敏绵羊红细胞,采用反向间接血凝试验(RPHA)检测山羊痘病毒抗原.该诊断试剂与山羊痘病毒抗原发生特异性的凝集反应;在PBS中不自凝;与其它动物病病毒抗原无交叉反应.对贵州省8个疫区现场采集山羊痘待检抗原检测结果表明,该方法阳性检出率为87.5%(7/8),与琼脂扩散试验(AGP)阳性检出率为50%(4/8)相比较,RPHA敏感性比AGP高;同时对山羊痘野生强毒H-GZ株F1～F5代细胞培养物进行检测,F1代就可检出RPHA效价,而AGP则不能检测.该诊断试剂可用于兽医临床上山羊痘的快速诊断及作为病毒分离培养的检测指标.
- 王开功虞天德何光志周碧君许乐仁孙道忠
- 关键词：琼脂扩散试验山羊痘抗原检测诊断试剂
- 贵阳市黑斑蛙裂头蚴感染调查及动物感染观察
- 目的对贵阳市花溪地区黑斑蛙(Rana nigromaculata)裂头坳病(Sparganosis)进行了调查及病理学研究,探讨肥大细胞在裂头蚴(Sparganum)感染病变中的意义。方法对贵阳市花溪地区收集的818只黑...
- 王开功陈红杨冬梅江萍许乐仁
- 关键词：黑斑蛙裂头蚴病曼氏迭宫绦虫病理组织学
- 文献传递
- 胡子鲇肥大细胞的组织化学及形态学被引量：23
- 2003年
- 以成年胡子鲇(Clarisfuscuslacepede,体重1.5kg)为研究材料,通过组织化学与形态学研究证实,肥大细胞在胡子鲇肠粘膜与粘膜下数量较多,在头肾和胸腺中也有少量分布,并有沿血管周分布的倾向。肥大细胞以Carnoy氏固定、AB/SO染色的效果最好。以AB/SO着色的肥大细胞胞质颗粒呈深蓝色,胞核呈淡褐色;以TB/SO着色的肥大细胞胞质颗粒呈紫红色,胞核呈淡红色。而中性缓冲福尔马林固定对肥大细胞的着染有一定阻断作用。一些曾被国外学者用于鉴定硬骨鱼肥大细胞(或嗜酸性颗粒细胞)的组织化学技术在本研究中未能鉴定出胡子鲇的肥大细胞。电镜观察证实,胡子鲇肥大细胞中含有大量特征性的胞浆颗粒,胞浆颗粒基质电子密度较均匀,个别颗粒中央呈空泡样。
- 杨筱珍高登慧许乐仁
- 关键词：胡子鲇肥大细胞组织化学形态学
- 贵阳地区幼猫腹泻的病原学诊断被引量：1
- 1992年
- 腹泻和呕吐是猫病、特别是猫消化道疾病时最常见的临床症状。但能够引起家猫腹泻的病因很多,其中很大一部分是由不同的病原微生物引起的。多数发生腹泻和呕吐的病猫病势发展迅速,常因不能及时明确病因及采取适宜的抢救治疗措施而终归脱水衰竭死亡。幼猫腹泻的死亡率更高。一些群众因此将有腹泻呕吐的病猫均误认为是难以治癒的“猫瘟热”(即由细小病毒所致的猫泛白细胞减少症)而丧失治疗信心,延误时机,更增加了病猫的死亡率。
- 江萍温伦季许乐仁
- 关键词：腹泻病原学
