谢淑丽
- 作品数:25 被引量:40H指数:4
- 供职机构:吉林大学第一医院更多>>
- 发文基金:吉林省科技厅科研基金吉林省科技厅青年科研基金辽宁省科学技术计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 肝癌SMMC7721细胞株P27RF-Rho mRNA基因沉默对5-Fu药物敏感性的影响被引量:1
- 2017年
- 目的:探讨肝癌SMMC7721细胞株P27RF-Rho mRNA基因沉默对5-氟脲嘧啶(5-Fu)药物敏感性的影响,为临床晚期肝癌治疗提供理论依据。方法:构建P27RF-Rho RNAi载体,P27RF-Rho基因沉默慢病毒感染SMMC7721肝癌细胞,Western blotting法检测基因沉默效果。SMMC7721细胞分为Scramble-siRNA阴性对照组、5-Fu组、P27RF-Rho-siRNA组和P27RF-Rho-siRNA+5-Fu组。荧光显微镜检测细胞转染效果,Western blottting法检测RNAi基因沉默效率,MTT法检测各组细胞生长曲线,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell小室检测细胞侵袭能力,Western blotting法检测各组细胞中肿瘤相关蛋白P27及RhoC表达。结果:成功构建P27RF-Rho RNAi慢病毒载体。Western blotting法,P27RF-Rho-siRNA组细胞中P27RF-Rho蛋白表达水平明显低于5-Fu组和Scramble-siRNA组(P<0.05)。与其他3组比较,P27RF-Rho-siRNA+5-Fu组细胞生长速度降低(P<0.05);划痕实验中P27RF-Rho-siRNA+5-Fu组细胞迁移能力明显减低(P<0.01);P27RF-Rho-siRNA+5-Fu组穿过Transwell小室微孔滤膜的平均细胞数明显少于其他3组(P<0.01);Western blotting法检测,P27RF-Rho-siRNA+5-Fu组细胞中癌相关蛋白P27表达水平明显高于其他3组(P<0.05),侵袭相关蛋白RhoC表达水平低于其他3组(P<0.05)。结论:P27RF-Rho基因沉默能明显增强5-Fu对肝癌SMMC7721细胞的药物敏感性。
- 杨耀群谢淑丽吕国悦马强李开良王广义
- 关键词:慢病毒5-氟脲嘧啶药物敏感性
- siRNA沉默RhoC表达诱导人肝癌BEL7402细胞凋亡被引量:1
- 2011年
- 目的:研究siRNA沉默RhoC基因表达对人肝癌细胞BEL7402凋亡的影响及其机制,为肝癌的基因治疗提供实验依据。方法:构建RhoC-siRNA真核表达载体pU6mRFPRhoC-siRNA,转染BEL7402细胞,激光共聚焦显微镜检测转染效率,RT-PCR和Western blotting鉴定RhoC基因沉默效果;流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳和瑞氏染色检测BEL7402细胞凋亡,RT-PCR检测细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达。结果:成功构建pU6mRFPRhoC-siRNA重组载体,转染BEL7402细胞的效率为70%,RT-PCR和Western blotting检测RhoC基因沉默效率分别为85%和82%。pU6mRFPRhoC-siRNA转染组BEL7402细胞凋亡显著高于未转染BEL7402细胞和pU6mRFP Scramble-siRNA转染组BEL7402细胞[(21.00±2.23)%vs(6.47±1.64)%、(4.63±0.47)%,P<0.01)],pU6mRFPRhoC-siRNA转染组BEL7402细胞DNA呈典型的"梯状"条带,瑞氏染色见转染组BEL7402细胞中有大量凋亡细胞。pU6mRFPRhoC-siRNA转染组BEL7402细胞Bcl-2基因水平显著低于、而Bax基因水平显著高于未转染BEL7402细胞和pU6mRFP Scramble-siRNA转染组BEL7402细胞(0.28±0.15vs0.96±0.21,1.03±0.24,P<0.05;1.09±0.21vs0.26±0.10,0.25±0.07,P<0.01)。结论:siRNA沉默RhoC基因可诱导人肝癌BEL7402细胞凋亡,其机制与下调Bcl-2基因、上调Bax基因表达有关。
- 谢淑丽王广义吕国悦朱明光
- 关键词:RHOC基因SIRNA肝肿瘤凋亡
- mTOR与消化系统肿瘤
- 本文对mTOR与消化系统肿瘤的关系进行了探讨。雷帕霉素靶蛋白是PI3K/AKT/mTOR信号转导途径中一个重要的信号分子,该信号转导途径主要与细胞的增殖、分化、能量代谢有关。mTOR的表达异常和活性状态改变与多种肿瘤发生...
- 张毅谢淑丽董丙飞王广义
- 关键词:消化系肿瘤细胞增殖蛋白表达病理细胞学
- 文献传递
- ERCC1与RRM1在胰腺癌组织中的表达及临床意义被引量:3
- 2013年
- 目的研究胰腺癌、癌旁组织、正常胰腺组织中DNA损伤修复蛋白ERCC1,RRM1表达及其临床意义。方法选取吉林大学第一医院2009年1月至2012年6月手术切除胰腺癌及癌旁组织34例,正常胰腺组织20例,标本经常规石蜡包埋,采用SABC法行免疫组化染色。结果在胰腺癌组织中ERCC1高表达14例(41.2%),RRM1高表达10例(29.4%),癌旁组高表达率分别为67.6%、52.9%,正常胰腺组织分别为70.0%、80.0%。两种基因的高表达率均低于癌旁组及正常胰腺组(P<0.05)。在有无淋巴结、肿瘤大小、分化程度因素中分析ERCC1及RRM1的高低表达无统计学差异。结论 ERCC1及RRM1基因的表达缺失与肿瘤的发生密切相关,其表达与否对肿瘤大小、分化程度、区域淋巴结转移等无显著影响。
- 柴文刚王广义谢淑丽王蒙
- 关键词:ERCC1RRM1胰腺癌
- RhoC-siRNA真核表达载体的构建
- 目的:构建RhoC-siRNA真核表达载体并检测其基因沉默效果,为深入研究RhoC基因在肿瘤中的生物学作用提供有效手段。
方法:将携带红色荧光报告基因的pU6mRFP载体与RhoC基因干扰片段连接,转染人肝癌细...
- 谢淑丽王广义吕国悦金哲高显峰金立鹏张毅董丙飞
- 关键词:肝脏肿瘤细胞增殖基因表达病理细胞学
- 文献传递
- RhoC高表达诱导人正常肝细胞迁移和侵袭的研究被引量:1
- 2014年
- 目的观察RhoC高表达诱导人正常肝细胞迁移和侵袭恶性转化。方法pcDNA3-RhoC转染HL7702细胞,划痕实验和Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力;明胶酶谱分析检测基质金属蛋白酶(MMPs)活性;逆转录一聚合酶链反应(RT—PCR)检测细胞迁移和侵袭相关基因表达;Westernblot检测相关蛋白水平;接种裸鼠检测活体成瘤率。结果转染RhoC细胞组与HL7702细胞组和空质粒转染细胞组比较获得了迁移和侵袭能力,相对迁移距离显著增大,分别为(63.33±10.07)%、(28.67±7.02)%和(28.33±6.66)%(P〈0.01);穿过Transwell微孔滤膜细胞显著增多,分别为(65.33±6.80)%、(24.33±5.79)%和(23.33±5.73)%(P〈0.01),侵袭能力显著增强,分别为43.67±7.59、13.33±3.40和15.33±4.11(P〈0.01);MMPs活力增强;迁移和侵袭相关基因MMP-2、MMP-9、血管内皮生长因子(VEGF)、P27RF.Rho和Survivin表达上调,基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)、TIMP2、p53和人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)表达水平下调;接种裸鼠成瘤率为40%。结论RhoC高表达诱导人正常肝细胞迁移和侵袭的恶性转化。
- 谢淑丽吕国悦朱明光陈国富金哲王广义
- 关键词:RHOC肝细胞恶性转化
- 胰腺癌细胞对TRAIL耐药机制的研究进展被引量:1
- 2010年
- 高显峰王广义吕国悦谢淑丽
- 关键词:胰腺癌细胞TRAIL耐药
- c-Flip在CPT增强TRAIL诱导胰腺癌细胞凋亡中的作用研究
- 目的:探讨喜树碱(CPT)增强TRAIL诱导胰腺癌细胞PANC-1凋亡的机制。
方法:通过MTT检测TRAIL组、喜树碱组、二者联合组对胰腺癌细胞PANC-1生长抑制的影响;利用Hoechst33258荧光染色...
- 高显峰王广义谢淑丽吕国悦
- 关键词:胰腺肿瘤细胞凋亡病理细胞学
- 文献传递
- P27RF-Rho基因沉默对肝癌Bel7402细胞增殖的影响被引量:4
- 2015年
- 目的:构建靶向新分子P27RF-Rho基因的慢病毒RNA干扰载体,研究P27RF-Rho基因对肝癌Bel7402细胞增殖能力的影响。方法:将合成的寡核苷酸片段克隆入RNAi载体,并转染肝癌Bel7402细胞,以沉默P27RF-Rho基因表达。实验分为空白对照Bel7402组、阴性对照Scramble-siRNA组和P27RF-Rho-siRNA组。荧光显微镜观察细胞转染情况;RT-PCR法检测各组Bel7402细胞中P27RF-Rho基因沉默效果;绘制生长曲线,检测转染细胞的增殖情况;平板克隆实验检测细胞的克隆形成能力;RT-PCR法检测细胞增殖能力相关基因P16、Cyclin E、MMP-9和CDK-5mRNA的表达水平。结果:P27RF-Rho-siRNA组P27RF-Rho基因表达水平明显低于空白对照Bel7402组和阴性对照Scramble-siRNA组(P<0.01)。P27RF-Rho-siRNA组肝癌细胞的生长速度明显低于空白对照Bel7402组和阴性对照Scramble-siRNA组(P<0.05)。与2个对照组比较,P27RFRho-siRNA组细胞中CyclinE、MMP-9和CDK-5mRNA表达水平降低(P<0.01),P16mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。结论:抑制P27RF-Rho基因的表达能够降低肝癌细胞的增殖能力。
- 邢光远谢淑丽邱伟王广义吕国悦郝恩源李丁洋
- 关键词:基因沉默细胞增殖肝肿瘤
- 肝癌细胞信号转导通路研究的最新进展被引量:8
- 2013年
- 肝癌具有发病率高、病情隐匿、预后凶险等临床特征。经大量研究证实,某些信号转导通路的激活或抑制与肝癌的发生、发展等有着紧密的联系。现对近年来有关肝癌信号转导通路的文献进行回顾,就此研究进展作一综述。肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,占恶性肿瘤死亡率的第二位。具有病情隐匿、预后凶险等I}缶床特征。肝癌的发病率逐年递增,肝癌的发病年龄也在不断提前,未经治疗的患者中位生存期约为10个月。肝癌的发生、发展是肝癌细胞无限制增殖与凋亡减少的结果,其中,肝癌的信号转导通路扮演着重要角色。近些年来,虽然肝癌的临床研究取得了很大进展,但肝癌侵袭、转移的机制目前还尚不完全清楚。随着对肝癌信号转导通路研究的不断深入,人们发现肝癌细胞内部的某些信号转导通路的激活或抑制与肝癌的发生、发展等有着紧密的联系。
- 徐同磊谢淑丽王广义
- 关键词:肝癌细胞信号转导