- 曼氏裂头蚴感染诊断的病原鉴定方法研究
- 目的:系统观察和分析曼氏裂头蚴的解剖组织学和组织病理学用以补充对该病原诊断基础的不足;探索检测切片中曼氏裂头蚴抗原和基因的方法用以解决病理切片中不能确定虫种的鉴定技术问题。 方法:收集来自青蛙和病人的曼氏裂头蚴标本42...
- 贺美
- 关键词:病原诊断基因鉴定
- 文献传递
- AKP染色鉴别组织内死活血吸虫虫卵的条件探索与效果观察被引量:2
- 2011年
- 目的探索碱性磷酸酶(AKP)染色条件,观察其对宿主组织内死活血吸虫虫卵的鉴别效果。方法采用偶氮偶联法和NBT/BCIP两种AKP酶染色方法对血吸虫感染后第45 d鼠(未治疗组10只)和经吡喹酮治疗后3个月鼠(治疗组10只)的肝、肠组织内完整虫卵,冰冻切片虫卵和石蜡切片虫卵进行比较检测和分析;收集12份有近、远期变性虫卵的血吸虫病患者肠黏膜活检标本,进行虫卵染色,计数虫卵阳性数,评价两种AKP染色法对血吸虫死卵和活卵鉴定的效果。结果两种AKP染色方法对未治疗组小鼠组织内完整虫卵染色仅半数阳性,其阳性反应主要取决于完整虫卵是否裸露。未治疗组小鼠肠组织石蜡切片和冰冻切片偶氮偶联染色法阳性率分别为97.72%和92.47%,NBT/BCIP染色法阳性率分别为97.65%和98.49%;肝组织两种染色法的阳性率分别为81.17%、86.55%和74.36%、95.32%。在冰冻切片中,肝、肠组织偶氮偶联检测的敏感性均低于NBT/BCIP法;治疗组两法的阳性率均为0。12份临床标本,偶氮偶联法检出1例阳性,NBT/BCIP法检出3例阳性。结论 NBT/BCIP AKP染色法可用于鉴别组织切片中血吸虫虫卵的死活,但在实际应用时尚有待于进一步探索活检肠黏膜组织的处理方法。
- 王芳曾庆仁喻鑫玲周军薛伟世张祖萍李岳生何永康贺美李闻文
- 关键词:虫卵碱性磷酸酶血吸虫病患者肠黏膜
- 曼氏裂头蚴在人体胸壁、支气管、颈部和腰部皮下寄生的4个病例简介
- 主要介绍了曼氏裂头蚴在人体胸壁、支气管、颈部和腰部皮下寄生情况,并对曼氏裂头蚴在人体胸壁、支气管、颈部和腰部皮下寄生的病例进行分析,分别介绍了各类病例的临床症状、病理诊断情况,并得出结论,目前还遇到有一些一直未能做出明确...
- 贺美曾庆仁张祖萍王芳薛伟世张顺科
- 关键词:曼氏裂头蚴支气管颈部
- 10例疑似曼氏裂头蚴病的病原学诊断被引量:28
- 2012年
- 目的对10例临床疑似曼氏裂头蚴病病例进行病原学诊断。方法 2009年8月至2011年8月,对4家医院送来的10例患者病理活检标本进行病原学鉴定。10个标本分别来源于腹部皮下包块4例,眼部肿块3例,脑部占位病变、肺部肿块和胸腔积液各1例。3例眼部肿块和1例腹部皮下包块中各取出1条虫体,通过肉眼和显微镜观察虫体解剖组织学特征进行鉴定。余6例标本均采用石蜡包埋、切片及苏木素-伊红(HE)染色后于镜下观察虫体组织,并以曼氏裂头蚴免疫兔血清为一抗通过免疫组化法作进一步鉴定。结果自3例眼部肿块中获取的3条完整虫体具典型曼氏裂头蚴形态特征,自腹部皮下包块取出的1条残断虫体在镜下观察到的网状结构和石灰小体均与曼氏裂头蚴解剖组织学特征一致。6个病理切片经HE染色后于镜下观察发现,3个切片呈现典型裂头蚴组织学特征,即体壁有凹凸不等的皱褶,皮层致密较厚呈嗜伊红深染,部分皮层外密布微毛,体内为网状疏松实质结构,可见空泡状石灰小体,但无器官腔和空腔结构;余3个病理切片的虫体组织结构不典型。6个病理切片经免疫组化检测均呈阳性。结论该10例临床疑似病例均确诊为曼氏裂头蚴病。
- 曾庆仁贺美王芳张祖萍粟占三周军刘保安兰智华胡勉娟蔡力汀
- 关键词:曼氏裂头蚴病病原学鉴定免疫组化
- 用虫种特异性线粒体基因序列鉴定2例疑似曼氏裂头蚴感染无虫病理标本被引量:3
- 2013年
- 目的探讨采用线粒体细胞色素C氧化酶亚基1(CO1)基因特异性序列鉴定临床无虫病理标本中裂头蚴感染的可靠性。方法应用免疫曼氏裂头蚴的兔血清检测病理切片中裂头蚴的抗原,有2例呈阳性,疑似裂头蚴感染的无虫病例,按照DNA提取试剂盒说明书提取核酸,用曼氏裂头蚴线粒体CO1基因特异性序列的两对引物作扩增。结果经PCR 2次扩增后得到目的序列,电泳条带出现在预期的位置。2例病理标本扩增的核苷酸序列与已知基因片断序列比对,引物F650/R800扩增条带符合率分别为100%和97%,引物F965/R1120扩增条带符合率均为100%。结论用裂头蚴线粒体CO1特异性基因引物作重复PCR扩增,对鉴定无虫病理标本曼氏裂头蚴感染有诊断意义。
- 兰智华粟占三贺美张祖萍胡勉娟曾庆仁
- 关键词:虫种鉴定
- 一种从蠕虫组织切片中提取DNA作PCR鉴定虫种的简便方法被引量:1
- 2013年
- 目的建立一种实用于临床病理鉴别诊断组织切片内蠕虫虫种的分子病理学方法。方法制作已知的和从临床收集的多种蠕虫和宿主组织病理切片标本,用改良蛋白K消化法对各种蠕虫切片的白片、HE染色片和免疫组化片组织提取DNA;设计合成检测并殖吸虫、曼氏裂头蚴和猪囊虫各自特异性基因片段的引物,分别对各DNA提取物作PCR扩增,经凝胶电泳观察目的基因片段;比较分析三种蠕虫各自最小组织量检测的敏感性和特异性。结果对三种蠕虫所选用的引物均可扩增出清晰的特异性目的条带。用改良蛋白K消化法提取蠕虫DNA可PCR扩增出目的片段的敏感性均优于商品化试剂盒提取法,可提出DNA的最小组织面及厚度为:肺吸虫的为1.50 mm2,10μm;曼氏裂头蚴的为4.87 mm2,5μm;猪囊虫的为5.80 mm2,5μm。经10个临床标本检测均获得理想结果。结论本研究成功地探索出一种对病理切片中微量组织提取DNA作PCR鉴定虫种的简便方法,为病理诊断提供了进一步鉴别此3种蠕虫的分子病理学手段。
- 胡勉娟曾庆仁粟占三兰智华贺美余权张祖萍蔡力汀
- 关键词:蠕虫石蜡切片
- 日本血吸虫不同发育期虫卵内抗氧化酶检测的研究
- 2012年
- 目的检测日本血吸虫(Sj)不同发育期虫卵内抗氧化酶水平,分析其是否可作为鉴别虫卵死与活的标志物。方法采用3,3-二甲基联苯胺盐酸盐(DAB)+H2O2底物作为抗氧化酶检测方法对完整Sj虫卵进行染色观察,并探索其染色条件。建立Sj感染后50d和90d的小鼠模型和吡喹酮治疗后30d和90d的小鼠模型。用最佳染色条件对从各模型组小鼠肝肠组织分出的虫卵作检测,比较观察对未成熟卵、成熟卵、近期变性卵和远期变性卵的显色程度与其分布来评价抗氧化酶水平,分析其用于判别Sj虫卵死与活的可能性。结果与不做染色虫卵比,DAB加入完整游离活卵中经室温震动反应30min时,所呈深棕黄色阳性反应的反差最明显;DAB对沸腾处理30min虫卵染色,未见呈显色反应;DAB对Sj感染50d、90d及治后30d和90d的模型鼠肝肠来源虫卵染色的阳性率分别为92.34%、46.03%、13.68%和0.00%。其阳性反应程度:未成熟虫卵普遍呈深棕黄色;成熟卵多呈深黄色,分布于毛蚴体部;近期变性卵中部分有显色;远期变性卵和卵壳均无见显色。结论 Sj活虫卵内均富含抗氧化酶成分,其水平则以未成熟卵内为最高,且随着虫卵发育成熟至死亡而逐渐减低。提示Sj虫卵作抗氧化酶染色可作为虫卵死与活鉴别的标志物。
- 薛伟世曾庆仁王芳张祖萍喻鑫玲何永康李岳生贺美李闻文
- 关键词:日本血吸虫虫卵
- 一种用于细胞划痕实验的培养皿
- 本实用新型公开了一种用于细胞划痕实验的培养皿,所述培养皿的内腔放置有划痕架,所述划痕架包括划痕成形杆和立杆,若干所述划痕成形杆与培养皿的底面贴合接触,并将培养皿底面分成若干区域,所述立杆与所有划痕成形杆连接,形成一体的划...
- 黎明徐艳贺美邹纯
- 文献传递
- 囊虫病诊断技术的发展与临床应用
- 2010年
- 囊虫病是一种由猪囊尾蚴寄生于人体组织内主要引起脑、眼等重要器官或组织损害的常见寄生虫病。目前对其诊断的实验技术研究已发展到高层水平,但被临床应用的并不多。本文从多个方面较全面地分析和回答了出现此现象的原因,并提出了拟解决临床问题的见解与探索思路。
- 贺美曾庆仁贺达仁
- 关键词:囊虫病实验诊断技术