邹年莉 作品数:20 被引量:76 H指数:5 供职机构: 四川农业大学动物医学院 更多>> 发文基金: 长江学者和创新团队发展计划 四川省青年科技基金 四川省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
鸡卡氏杆菌的分离与16S rRNA基因的分析鉴定 被引量:9 2010年 四川雅安某种鸡场种鸡出现消瘦,腹部膨大,肝脏肿大破裂出血,腹膜和输卵管炎为主要特征的疾病。为诊断和预防此病的发生,通过对细菌分离纯化、形态学观察、生化试验、药物敏感性试验鉴定出1株致病菌,应用通用引物对细菌的16SrRNA基因进行克隆和测序,测序结果于NCBI上进行BLAST比对,选择同源性较高的巴氏杆菌科15个属的29株细菌16SrRNA序列进行比对分析,构建遗传进化树。结果表明,分离纯化的细菌能在血平板上生长,革兰氏染色阴性短杆状,能发酵大多数糖和醇类,对头孢类抗生素敏感,16S rRNA序列与卡氏杆菌属细菌的同源性最高,在92.2%~99.5%之间,特别是与鸭卡氏杆菌同源在97.5%~99.5%之间。遗传进化树分析结果表明,该菌株与卡氏杆菌属细菌属于同一大分类群,与鸭卡氏杆菌位于同一个小分支,最终诊断该鸡场为卡氏杆菌感染。 田明星 林艳 邹年莉 李敏 黄勇关键词:卡氏杆菌 RRNA 同源性分析 遗传进化树 藏鸡副鸡嗜血杆菌的分离及16S rDNA序列分析 被引量:3 2010年 四川省某藏鸡场藏鸡发生以鼻腔与窦发炎、颜面肿胀、流鼻涕和打喷嚏为主要特征的疾病,通过对送检病鸡病原的分离纯化、生化鉴定、16 S rDNA基因的克隆和序列分析诊断为副鸡嗜血杆菌感染,将该株副鸡嗜血杆菌的16 S rDNA序列与GenBank中15株巴氏杆菌科菌株进行同源性分析发现,与6株副鸡嗜血杆菌同源性较高,为94.2%~97.2%,与其它菌株16 S rDNA基因的同源性较低。另外,药敏试验表明,本菌株对菌必治、阿莫西林、庆大霉素、头孢氨噻肟和阿奇霉素等药物敏感。 林艳 田明星 李敏 邹年莉 黄勇关键词:藏鸡 副鸡嗜血杆菌 四川草科鸡IL-15 cDNA的克隆与序列分析 被引量:2 2008年 根据GenBank上登录的鸡白介素15(IL-15)基因序列,设计合成一对特异性引物,以ConA诱导的鸡脾淋巴细胞提取的总RNA为模板进行RT-PCR扩增,并克隆到pMD18-T载体测序。测序结果表明,四川草科鸡IL-15开放阅读框(ORF)由564个核苷酸组成,编码187个氨基酸,与GenBank中公布的鸡白介素15基因进行比较,核苷酸和氨基酸同源性为98.6%~99.5%。生物信息学分析表明,该基因编码的蛋白具有亲水性,有很强的抗原性,共有3个潜在的N-糖基化位点,可能存在3个蛋白激酶C磷酸化位点,存在2个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点。 刘蕊娜 邹年莉 王红宁 柳萍 黄勇关键词:白细胞介素-15 基因克隆 鸡传染性支气管炎病毒M蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:5 2013年 目的制备鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)M蛋白单克隆抗体,并进行鉴定。方法利用IBV Sczy3株免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,间接ELISA法筛选杂交瘤细胞,强阳性孔经有限稀释法亚克隆,制备抗IBV M蛋白单克隆抗体。对制备的单抗进行单抗亚型、腹水ELISA效价、特异性、交叉反应性鉴定及Western blot分析。结果获得2株能稳定分泌抗IBV M蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为2C10和7H6,单抗亚型分别为IgM和IgG1;腹水ELISA效价分别为1∶25 600和1∶12 800;2株单抗均只与IBV发生特异性反应,而与新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)、禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)H9亚型、AIV H5抗原和鸡传染性法氏囊病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)均不反应;2株单抗与5种基因型的其他10株IBV均有良好的反应性。结论制备出2株针对IBV M蛋白的单抗,为今后更深入地研究该蛋白的分子生物学功能、抗原表位的鉴定及抗原捕获ELISA方法的建立等提供了有力的工具。 王富妍 任雅 邹年莉 郭明萍 吴瑞婷 付润饶 文心田 曹三杰 黄勇关键词:鸡传染性支气管炎病毒 M蛋白 单克隆抗体 酶联免疫吸附测定 四川草科鸡IL-15 cDNA的克隆与序列分析 被引量:1 2008年 根据GenBank上登录的鸡IL-15基因序列,设计合成了一对特异性引物,以ConA诱导的鸡脾淋巴细胞提取的总RNA为模板进行RT-PCR技术扩增,并克隆到pMD18-T载体测序。测序结果表明,四川草科鸡IL-15开放阅读框(ORF)由564个核苷酸组成,编码187个氨基酸,与GenBank中公布的ChIL-15基因进行比较,核苷酸和氨基酸同源性为98.6%~99.5%。生物信息学分析表明,该基因编码的蛋白具有亲水性,有很强的抗原性,共有3个潜在的N-糖基化位点,可能存在3个蛋白激酶C磷酸化位点,存在2个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点。 黄勇 刘蕊娜 邹年莉 王红宁 柳萍关键词:白细胞介素-15 基因克隆 新城疫病毒感染鸡胚成纤维细胞中免疫相关细胞因子表达的检测 被引量:4 2009年 分别采用新城疫强毒株F48E9与新城疫弱毒株LaSota感染10日龄鸡胚制作的鸡胚成纤维细胞,感染后24h提取鸡胚成纤维细胞的总RNA,通过RT-PCR技术结合凝胶成像系统扫描检测21种免疫相关细胞因子在鸡胚成纤维细胞中的表达量。实验结果表明,在鸡胚成纤维细胞中,无论是否感染新城疫病毒,IL-2、IL-3、IL-4、IL-21不能检测到其相应条带。通过统计学分析,IFN-β、IFN-γ、IL-9、IL-12-P35、IL-12-P40在病毒感染组与对照组间呈现出显著的差异,而强毒感染组与弱毒感染组的比较中,仅IFNγ、IL-9表现出显著差异。 刘温泉 王远萍 邹年莉 柳萍 黄勇关键词:鸡胚成纤维细胞 LA 一株猪源棒状杆菌的分离及其16S rRNA基因分析鉴定 被引量:10 2010年 四川某商品猪场仔猪出现以体温升高,背、腹和腿部皮肤发绀,淋巴结出血肿大,肺、脾脏出血、化脓为主要特征的疾病。通过对分离细菌的纯化培养、形态学观察、生化试验、致病性试验和药物敏感性试验,鉴定出一株致病菌。应用通用引物对其16S rRNA基因进行克隆和序列分析,序列在NCBI上进行BLAST比对,选择同源性较高的棒状杆菌属中25株不同种的菌株16S rRNA序列进行比对分析,构建遗传进化树。分离纯化的细菌在鲜血琼脂平板厌氧条件下生长良好,为革兰氏染色阳性杆状菌,能发酵部分糖类,能致死小白鼠,对头孢类抗生素敏感,16S rRNA序列与棒状杆菌属细菌的同源性最高,在78.2%-98.0%之间,遗传进化树分析结果表明,该菌株与棒状杆菌属细菌属于同一分类群,分离菌鉴定为棒状杆菌。 李敏 田明星 邹年莉 王远萍 柳萍 黄勇关键词:棒状杆菌 同源性分析 鸡传染性支气管炎病毒Sczy3 S1蛋白中和性单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定 鸡传染性支气管炎(Infectious bronchitism,IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)引起鸡的一种高度传染性呼吸道疾病,IB可以感染所有日龄的鸡,... 邹年莉关键词:鸡传染性支气管炎病毒 中和性单克隆抗体 抗原表位 家兔魏氏梭菌的分离与半套式PCR鉴定 被引量:1 2008年 魏氏梭菌病是危害养兔业的重要疾病。某养兔场发生一种以急性黑色水样腹泻或排带血的胶冻样粪便、盲肠出血、胃粘膜出血为主要特征的传染病,通过病原菌的分离培养、形态染色观察、生化鉴定和半套式PCR反应,分离出一株魏氏梭菌。通过药物敏感实验筛选出了敏感药物。实验结果为该病的正确防控措施的提出提供了参考。 黄勇 宋宇 刘温泉 范荣香 王远萍 邹年莉关键词:魏氏梭菌 J亚群禽白血病病毒四川株SCMS1的分离及其囊膜基因序列分析 被引量:3 2011年 为研究四川首例分离株SCMS1株J亚群禽白血病病毒(ALV-J)囊膜(env)基因是否产生新的变异,本实验通过将病毒接种鸡胚成纤维细胞、RT-PCR及PCR检测技术,对包括env基因和部分3'UTR在内的片段进行PCR扩增、克隆和序列测定。结果发现该病毒gp85基因出现6个碱基的缺失,与HPRS-103原型株6995位~7242位对应的核酸序列也发生248个碱基的缺失,包括整个rTM区域。这些碱基的缺失在病毒致病性变化中可能具有潜在的意义。 石敏 田明星 王远萍 邹年莉 林艳 余冲 赵芳芳 李敏 黄勇关键词:J亚群禽白血病病毒 ENV基因