陈凌
- 作品数：30 被引量：107H指数：6
- 供职机构：上海交通大学附属第六人民医院更多>>
- 发文基金：上海市自然科学基金国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 综合性医院儿科临床研究生培养的困境与思考被引量：3
- 2016年
- 综合性医院儿科目前面临巨大的困难。作为培养儿科临床专业技术人才的研究生培养工作更是陷入困境,主要表现在儿科学专业考生来源不尽人意、专业稳定性不强、专业知识和相关知识拓展受限等方面。加强宣传,提升医学生对儿科专业的热爱;改善环境,提高儿科研究生专业的稳定性;加强与专科医院合作,拓展儿科研究生的专业知识面等措施,将有利于综合性医院儿科临床研究生教育与培养。
- 张建华陈凌吴良霞
- 关键词：教育
- 重组IL-17A耻垢分枝杆菌的构建及其对巨噬细胞表达炎症因子的影响被引量：2
- 2012年
- 目的构建携带小鼠IL-17a编码基因的重组耻垢分枝杆菌(Recombinant Mycobacterium smegmatis,rMs),并研究其对巨噬细胞表达炎症因子的影响。方法双酶切质粒pET28a/mIL-17a和pMFA41,转化感受态E.coli TOP10,构建大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达质粒pMFA41/mIL-17a,电转化耻垢分枝杆菌mc2155,经SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物。分别以MOI为10∶1加入rMs、rMs+anti-IL-17A、Ms感染小鼠巨噬细胞系RAW264.7,并设PBS对照组。荧光定量PCR法检测转染细胞中β防御素-2(Defensinβ2,Defb-2)、巨噬细胞炎症蛋白(Macrophage inflammatory protein,MIP)-1α和MIP-2β基因mRNA水平;ELISA法检测细胞培养上清中MIP-1α、MIP-2β、IL-4及IFNγ蛋白的表达水平。结果重组表达质粒pMFA41/mIL-17a经双酶切及测序鉴定证明构建正确;表达的重组蛋白mIL-17A可与大鼠抗小鼠IL-17A单克隆抗体特异性结合,在相对分子质量约20 000处可见特异性反应条带;rMs组RAW264.7细胞中Defb-2、MIP-1α、MIP-2β基因mRNA水平较Ms组及PBS组明显升高(P<0.01);rMs组细胞培养上清中MIP-1α、MIP-2β、IL-4和IFNγ的蛋白浓度较Ms组及PBS组明显升高(P<0.01)。结论成功构建了表达具有生物学活性mIL-17A的重组耻垢分枝杆菌疫苗,该疫苗可有效促进体外培养的巨噬细胞表达MIP、Defb2、IFN-γ及IL-4,为新型疫苗的研发奠定基础。
- 郭盛张建华吴良霞陈凌郝春莉范小勇
- 关键词：耻垢分枝杆菌白细胞介素17巨噬细胞炎症蛋白
- 重组小鼠白细胞介素-17F/His融合蛋白的原核表达、纯化及生物活性被引量：4
- 2010年
- 目的在大肠杆菌(E.coli)中表达并纯化重组小鼠白细胞介素-17F(rmIL-17F),并鉴定其生物活性。方法经RT-PCR扩增mIL-17f基因片段,定向插入原核表达载体pET28a,构建重组表达质粒pET28a/mIL-17f,转化E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导表达,Ni2+-NTA亲和层析纯化rmIL-17F/His融合蛋白,Western blot鉴定其反应原性。以纯化复性的rmIL-17F滴鼻干预小鼠,采用实时荧光定量PCR法检测小鼠肺组织IL-6 mRNA的表达,ELISA法检测小鼠外周血IL-17F、IL-4和IFNγ的水平。结果扩增的mIL-17f基因DNA序列与GenBank中登录的mIL-17f基因序列一致,所构建的重组表达质粒pET28a/mIL-17f构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为19000,主要以包涵体形式表达,表达量约占菌体总蛋白的30%;纯化的重组蛋白纯度约为95%,具有良好的反应原性,经黏膜给药后,可促进小鼠肺组织中IL-6 mRNA的表达,并提高小鼠血清中IL-4和IFNγ的水平。结论已成功地在大肠杆菌中高效表达并纯化了具有生物学活性的rmIL-17F,为进一步研究IL-17F的功能奠定了基础。
- 陈凌郭盛郝春莉吴良霞张建华
- 关键词：白细胞介素-17原核细胞蛋白纯化生物活性
- 地塞米松减轻过敏性哮喘模型小鼠气道炎性反应
- 2023年
- 目的 观察地塞米松(DEX)对过敏性哮喘模型小鼠气道炎性的影响并探讨相关机制。方法 将小鼠随机分为对照组、哮喘组、地塞米松组。哮喘组小鼠于实验第0、7、14天皮下注射卵清蛋白(OVA)/氢氧化铝混合液,第21、22天1%OVA混悬液雾化吸入20 min;地塞米松组在哮喘组基础上于每次雾化吸入前3 h地塞米松(2 mg/kg)腹腔注射。末次雾化结束测定小鼠气道阻力,24 h后收集肺泡灌洗液(BALF),Wright-Giemsa染色后行细胞分类计数;ELISA测定BALF中IL-6、IL-18和IL-1β等浓度;免疫组织化学法(IHC)检测肺组织NLRP3、IL-1β蛋白表达,HE染色观察肺组织病理。结果 与对照组比较,哮喘组小鼠气道高反应性(AHR)明显增高;BALF中嗜酸性粒细胞、中性粒细胞等炎性细胞数量明显增加;IL-5、IL-6、IL-18和IL-1β表达均升高(P<0.01);肺组织NLRP3、IL-1β蛋白表达增强。与哮喘组比较,地塞米松组小鼠AHR显著降低,BALF中炎性细胞总数、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞均明显减少(P<0.01),IL-5、IL-6、IL-18和IL-1β表达水平显著降低(P<0.01);肺组织NLRP3、IL-1β蛋白表达降低;肺组织HE染色结果显示地塞米松组小鼠肺组织炎性细胞浸润明显减轻,炎性指数显著降低(P<0.01)。结论 地塞米松抑制OVA诱导的NLRP3炎性小体活化及IL-5、IL-6、IL-18等炎性因子分泌,降低气道高反应性,有效缓解过敏性哮喘小鼠气道炎性反应。
- 刘芬胡润芳茅松徐敏石文静陈凌
- 关键词：支气管哮喘NLRP3IL-1Β地塞米松
- 不同年龄儿童传染性单核细胞增多症临床特点分析
- 王小鹏焦瑒瑒陈凌吴良霞张建华
- 不同年龄儿童传染性单核细胞增多症临床特点分析被引量：4
- 2017年
- 目的探讨儿童传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis,IM)的临床特点与发病年龄的关系。方法 2009年1月—2013年12月268例IM住院患儿按年龄分期分为4组:婴儿组(≤1岁)、幼儿组(≤3岁)、学龄前组(≤6岁)和学龄组(>6岁),进行回顾性分析。结果发病高峰为学龄前期,幼儿期也占相当的比例。高热、淋巴结炎、扁桃体渗出、眼睑水肿在年长儿多见,而皮疹在小年龄患儿多见,差异有统计学意义(P<0.05)。肝肿大幼儿组较学龄前组及婴儿组低,差异有统计学意义(P<0.05)。脾肿大、肝功能损害及血小板减少各年龄组间差异无统计学意义(P>0.05)。小年龄组患儿更易出现贫血与心肌损害,差异有统计学意义(P<0.05)。异常淋巴细胞比例随年龄增加而增高。除婴儿期外,随年龄增加,CD4^+T细胞降低,CD8^+T细胞增加。结论儿童IM某些临床特点与发病年龄有关,应予以重视,以提高确诊率。
- 王小鹏焦瑒瑒陈凌吴良霞张建华
- 关键词：儿童传染性单核细胞增多症EB病毒
- 耻垢分枝杆菌IL-17A及其制备方法
- 本发明涉及一种耻垢分枝杆菌IL-17A，其中，表达IL-17A基因的大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体在耻垢分枝杆菌IL-17A中表达；该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO.444...
- 张建华吴良霞郭盛范小勇陈凌郝春莉
- 表现为节段性炎症的肺炎支原体肺炎患儿的临床特点被引量：13
- 2010年
- 目的探讨以节段性炎症改变为特点的儿童肺炎支原体肺炎(MPP)的临床表现、影像学特征及肺功能改变。方法收集本院儿科病房明确诊断为MPP肺炎,且胸部CT证实为节段性炎症改变的143例患儿,对其临床特征、实验室检查、CT表现及治疗转归情况进行分析,并对其中的部分患儿进行急性期与恢复期的肺功能检测分析。结果143例MPP患儿主要表现为发热、咳嗽、肺部一过性啰音,50例有肺外表现。胸部CT主要表现为大片状模糊影和肺实变,且在此基础上可合并多种改变。病变可累及肺部各个叶段,其中右肺多于左肺,下肺多于上肺,以右下肺最多见。急性期肺功能可为正常、限制性障碍和混合性障碍,一秒钟用力呼气量、用力肺活量、最大呼气流量、25%用力呼气肺活量、50%用力呼气肺活量和75%用力呼气肺活量和最大中期呼气流速均明显降低。3周后,20例患儿复查肺功能,其中85.0%患儿已恢复正常。经大环内酯类药物治疗,61.5%患儿临床症状和肺部体征消失,其他患儿在加用头孢类抗生素或(和)激素后症状和体征得到控制。结论儿童MPP可表现为节段性炎症改变,其临床表现严重且多样化,肺功能有不同程度的损害。对大环内酯类药物治疗效果不理想的患儿,可以考虑联合使用头孢类抗生素和(或)激素治疗。
- 郝春莉张建华郭盛陈凌吴良霞
- 关键词：肺炎支原体肺功能胸部CT
- 重组耻垢分枝杆菌对非特异性哮喘小鼠气道炎症反应的影响及作用机制
- 陈凌
- Th17细胞的分化调控机制及其在支气管哮喘呼吸道炎症中的作用被引量：26
- 2016年
- Th17细胞属CD4^＋T淋巴细胞亚群，与变态反应性疾病、自身免疫性疾病关系密切。支气管哮喘（哮喘）是儿童常见疾病，哮喘是Th2型免疫反应占优势的变态反应性疾病，Th17细胞亚群的发现进一步完善了Th1／Th2失衡学说，并且Th17细胞及其分泌的细胞因子在哮喘中的作用受到越来越多的关注。现从Th17细胞的分化调控机制、与其他T淋巴细胞亚群的关系以及其在哮喘发病中的作用等方面进行综述，以期更好地理解哮喘的发病机制，并为哮喘的治疗提供新方向。
- 陈凌张建华
- 关键词：TH17细胞支气管哮喘呼吸道炎症
