陈剑清
- 作品数:58 被引量:47H指数:4
- 供职机构:浙江理工大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划浙江省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生文化科学更多>>
- 蛹虫草口服片剂及其制备方法
- 本发明提供一种蛹虫草口服片剂,该片剂为固体片剂,含水量在5%以下,固体成分包括以下重量百分比的各组分:60-90%蛹虫草、5-20%虫草素提取物、0-20%腺苷提取物,其中虫草素提取物、腺苷提取物为从蛹虫草中提取所得。该...
- 陈剑清张耀洲吕正兵陈健聂作明
- 文献传递
- 家蚕JAB1/CSN5蛋白的基因克隆表达及亚细胞定位被引量:4
- 2009年
- JAB1/CSN5是COP9信号复合体(constitutive photomorphogenic signalosome CSN)的第5个亚基,内嵌的JAMM基序是CSN参与蛋白的泛素化降解途径并调控生物体生长发育过程的异构酶活性位点。在家蚕蛹cDNA文库中筛选到的一条基因序列,其ORF长度为1047 bp,预测编码蛋白含有JAB1/CSN5保守结构域JAB-MPN,因此命名为BmJM。将BmJM基因的ORF插入到载体pET-28a(+)的多克隆位点,构建重组表达质粒pET-28a(+)-BmJM,于E.coliRosetta菌中进行原核表达,重组蛋白以包涵体形式存在。以纯化后的重组蛋白为抗原免疫大白兔获得BmJM的多克隆抗体,采用RT-PCR、Western blotting方法对BmJM基因在家蚕不同发育时期和组织中的转录及蛋白表达水平进行分析,发现BmJM蛋白在家蚕5龄幼虫的生殖腺表达量最高,而在其他组织中表达量较少,由此初步揭示了JAB1/CSN5在家蚕生长发育过程中的作用。亚细胞定位测定表明BmJM蛋白在细胞质近核区域含量最高,在细胞核中也有分布。
- 许红姚斐盛清吕正兵陈健聂作明王丹刘立丽沈红丹舒建洪舒特俊陈剑清吴祥甫张耀洲
- 关键词:家蚕基因克隆荧光定量PCR亚细胞定位
- 家蚕脂围蛋白(PLIN)基因的序列分析及表达与亚细胞定位研究
- 2009年
- 脂围蛋白(perilipin)与脂肪细胞脂类代谢的调节有关。从家蚕蛹cDNA文库中筛选到一条cDNA开放阅读框(ORF)序列长度为918 bp的基因,预测其编码305个氨基酸残基,蛋白分子质量约32.5 kD。经NCBI比对发现该蛋白具有部分脂围蛋白的保守结构域,因此将该ORF序列命名为BmPLIN基因。将该基因插入到载体pET-28a(+)的多克隆位点,构建重组表达质粒pET-28a(+)-BmPLIN,并转化大肠杆菌中进行原核表达得到带有His标签的融合蛋白,表达的融合蛋白以包涵体形式存在。用纯化后的融合蛋白为抗原免疫大白兔获得多克隆抗体,ELISA间接法测定抗体的效价达到1∶12 800以上。通过荧光定量PCR和Western blotting技术对BmPLIN基因及其编码蛋白在家蚕5龄幼虫各个组织器官中的转录、表达水平进行分析的结果是:BmPLIN基因mRNA在家蚕5龄幼虫各组织器官中的转录水平由高到低依次为生殖腺(卵巢和睾丸)、脂肪体、肠、表皮、头部、马氏管、丝腺、气门,在家蚕5龄幼虫的生殖腺(卵巢和睾丸)中有明显的BmPLIN蛋白特异条带。以家蚕Bm5细胞进行免疫细胞实验的结果显示,BmPLIN蛋白在细胞质和细胞核中均有分布。
- 姚斐许红舒特俊盛清吕正兵陈健聂作明王丹刘立丽沈红丹舒建洪陈剑清吴祥甫张耀洲
- 关键词:家蚕蛋白纯化亚细胞定位
- 一种蛹虫草的培育方法及其应用
- 本发明提供一种蛹虫草的培育方法,它包括以下步骤:干蚕蛹粉20g/L、大米粉180g/L、磷酸二氢钾1.2g/L、磷酸二氢钠1g/L、余量为水配制培养基,密封、灭菌、冷却;接种蛹虫草菌种,菌种密度为3~5个菌球/mL,培养...
- 陈剑清舒特俊
- 文献传递
- NF2基因在制备诊断/防治长骨发育疾病产品中的应用
- 本发明公开了NF2基因在制备诊断和/或防治长骨发育相关疾病的产品中的应用,属于生物医学技术领域。本发明通过构建Prx1‑cre/NF2 <Sup>f/f</Sup>条件性基因敲除小鼠,获取NF2基因缺失后长骨表,探究NF...
- 陈贵钱陈剑清蓝胜芝吕正兵
- EF手图像超家族成员——肌钙蛋白C的研究进展被引量:7
- 2007年
- EF手图像超家族蛋白泛指一类含有由螺旋区-泡区-螺旋区构成的EF手图像模体的蛋白。这类蛋白通常都具有金属离子结合能力或者形成二聚体的能力。肌钙蛋白C是一种EF手图像蛋白,它具有钙离子结合能力,可以与肌钙蛋白I、肌钙蛋白T形成复合物调节肌肉收缩。目前,国内外对肌钙蛋白C的研究多数集中在脊椎动物上,而对无脊椎动物的研究较少。主要从EF手图像超家族的特性及其家族成员——肌钙蛋白C的分类、结构及功能等方面进行了阐述,并结合笔者自身的研究方向,简要介绍了家蚕肌钙蛋白C的研究情况及前景。
- 陈剑清张耀洲
- 关键词:肌肉收缩家蚕
- 家蚕肌钙蛋白C基因的研究
- 肌钙蛋白C(Troponin C,TnC)是一科EF手图形超家族蛋白,可以结合Ca<'2+>并发挥其生物学功能。它的Ca<'2+>结合位点是由螺旋-环-螺旋(HLH)构成的EF手图像模体。肌钙蛋白C主要存在于肌肉组织中,...
- 陈剑清
- 关键词:家蚕原核表达亚细胞定位荧光定量PCR
- 文献传递
- 甲型H1N1流感的流行现状及处理对策的思考被引量:9
- 2009年
- 2009A/H1N1流感在世界各地传播,许多国家进入公共卫生紧急状态。认识甲型H1N1病毒基因组序列结构和其抗原的遗传漂移,生产有效的接种疫苗,寻找积极的应对策略具有重要的意义。
- 吕正兵李谦黄宏杰何靖陈剑清张耀洲王友同吴梧桐
- 关键词:甲型H1N1流感病毒疫苗
- 虫草素生物合成工艺的研发及产业化应用初步研究
- 虫草素(Cordycepin)化学名为3’-脱氧腺苷(3’-deoxyadenosine),化学式为CHNO,相对分子质量为251,又称冬虫夏草素、虫草菌素、蛹虫草菌素,是蛹虫草中(尤其是核苷类)的主要活性成分,也是第一...
- 吕雅雯朱俊德徐婷婷陈剑清吕正兵
- 关键词:虫草素生物合成基因工程
- 文献传递
- NF2基因在制备诊断颅骨发育异常产品中的应用
- 本发明公开了NF2基因在制备诊断颅骨发育异常产品中的应用,属于生物医药技术领域。本发明通过构建Wnt1‑Cre/NF2的基因条件性敲除小鼠,在颅骨组织中特异性敲除NF2基因,研究NF2基因敲除后对颅骨发育的影响,来阐明N...
- 陈贵钱陈剑清蓝胜芝吕正兵