李欢
- 作品数：10 被引量：22H指数：4
- 供职机构：福建农林大学园艺学院园艺植物生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省种业创新与产业化工程项目福建省高校产学合作科技重大项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程更多>>
- ‘云香’水仙NtWRKYY1基因的分离与功能分析被引量：3
- 2017年
- 为明确WRKY转录因子在‘云香’水仙中的功能,该研究以‘云香’水仙为材料,克隆了WRKY基因,命名为NtWRKYY1(GenBank登录号为KX056495)。序列分析显示,NtWRKYY1基因开放阅读框(ORF)长度为510bp,编码169个氨基酸。多序列比对和系统进化树分析显示,NtWRKYY1编码蛋白含1个WRKY结构域和C2H2锌指结构(Cx4Cx23HxH),与AtWRKY57聚在一起,属于第Ⅱc类WRKY转录因子。组织表达和时空表达分析显示,NtWRKYY1基因在花中表达量高于根和叶,且在花瓣及副冠中的表达量随开花过程(花蕾期、始花期、盛花期、衰败期)呈上升趋势。植物激素和非生物胁迫分析显示,NtWRKYY1基因受脱落酸(ABA)、高温、干旱和盐诱导,受茉莉酸甲酯(JA)抑制,表明NtWRKYY1基因可能在‘云香’水仙花朵的衰老过程中起正调节作用,同时参与‘云香’水仙ABA、JA等激素信号转导及高温、干旱、盐碱等非生物胁迫过程的调控。利用In-Fusion克隆技术成功构建过表达载体pMDC140-NtWRKYY1,并采用农杆菌介导叶盘法转化烟草。RT-PCR和GUS染色结果显示,目的基因已成功导入烟草基因组中。
- 温秀萍孙申申杨菲颖李梦思李欢李科陈晓静
- 关键词：WRKY转录因子基因表达
- 多花水仙WRKY转录因子的克隆与序列分析被引量：4
- 2014年
- 以‘黄花水仙2号’和‘金盏银台’为材料,根据课题组已克隆出的多花水仙转录因子WRKY基因片段设计特异引物,通过RACE技术分别从2个水仙品种中克隆出2个不同的WRKY基因,命名为Nt WRKY40a和Nt WRKY40b,开放阅读框(ORF)长度分别为945和951个碱基。序列分析结果表明,两序列均含有WRKYGQK保守结构域;‘黄花水仙2号’与‘金盏银台’、拟南芥、葡萄、青蒿、小麦和粳稻的相似系数分别为:97.27%、45%、43%、47%、41%和43%。Real-time PCR分析结果表明:WRKY基因在花瓣和副冠开花过程中的表达量发生变化,说明其可能参与多花水仙花朵的衰老过程。
- 李欢何炎森李科申艳红吴用陈晓静
- 关键词：中国水仙WRKY转录因子基因克隆
- 多花水仙转录组分析及相关功能基因的研究
- 中国水仙（Narcissus tazetta var.chinensis）,石蒜科水仙属植物,是多花水仙（Narcissus tazettaL.）的一个变种。由于中国水仙品种较少、花色单一、育种资源匮乏等原因,传统育种方...
- 李欢
- 关键词：转录组测序花色植物表达载体
- 文献传递
- ‘云香’水仙花香成分分析被引量：8
- 2015年
- ‘云香’水仙是福建农林大学园艺遗传育种研究所选育的多花水仙新品种,2012年4月1日通过福建省农作物品种审定委员会认定。‘云香’水仙花朵大、花朵数量多、花期长、香气浓,不仅具有优良的观赏性状,而且可作为提取香料的原料。本试验利用气相色谱质谱联用仪（GC-MS）分别对‘云香’水仙花蕾期、初花期、盛花期、衰败期的花朵样品进行了花香成分分析。以期为进一步研究花香成分的生物合成途径,指导花香育种奠定基础。试验采用Tenax管吸附剂吸附法采集‘云香’水仙花香成分。将采样瓶、活化后的Tenax吸附管、大气采样仪,相互之间用硅胶管连接。然后在采样瓶中装入水仙花样品用橡胶塞密封好,打开大气采样仪进行采样。采样完成后取下Tenax管,用1m L的色谱纯正己烷洗脱。取1μL洗脱的样品,用美国Varian Saturn3900/2100T气相色谱质谱联用仪进行分析。色谱条件：色谱柱为DB-5MS（内径0.25mm,柱长30m,液膜0.25μm）;载气为氦气（纯度〉99.999%）;流速1m L·min-1;进样口温度250℃;分流比1/2;起始70℃,保留3min;以10℃/min升到90℃保留2min;以5℃/min升到180℃保留1min;以8℃/min升到190℃保留2min。质谱条件：电离方式EI;电子能量70Ev;阱温220℃;传输线温度280℃;采集方式为全扫描;质量扫描范围为40～650amu。通过自带的软件Saturn GC/MS Workstation Version 5.52和谱库wiley7、nist98m、nist05m数据库进行图谱分析,得出可能的成分鉴定结果。以面积归一化法根据各组分的峰面积值换算样品中不同物质的相对含量。分析结果表明：‘云香’水仙花蕾期和初花期分别检测出25种成分,其中含量最高的5种是反式罗勒烯、乙酸苄酯、苯甲酸、3,4-二羟基苯乙二醇和茴香醚。盛花期检测出的成分上升至29种,其中含量最高的5种成分略有差别,分别是反式罗勒烯,其次是乙酸苄酯、茴香醚、顺式�
- 李科张游南李欢陈晓静
- 关键词：香气
- 多花水仙WD40基因的克隆与分析
- 本研究利用多花水仙花瓣抑制消减杂交文库获得的WD40基因片段,通过RACE技术从‘黄花水仙2号''''和‘金盏银台''''中各克隆一条WD40基因,2个基因都含有1个1302bp的开放阅读框,编码433个氨基酸,只存在3...
- 李科李欢吴用何炎森陈晓静
- 文献传递
- ‘云香’水仙ACC合成酶基因NtACS1的克隆及遗传转化被引量：7
- 2017年
- 为探究多花水仙ACS基因的序列特征及功能,以‘云香’水仙盛花期花瓣为试验材料,根据‘云香’水仙花朵转录组数据信息,通过RT-PCR方法克隆出1个ACS基因,命名为NtACS1(GenBank KX082936);NtACS1开放阅读框(ORF)长度为552bp,编码183个氨基酸。编码蛋白质分子量约为20.6KDa,理论等电点为6.30,不稳定系数为65.49,属于不稳定的疏水性蛋白。通过qRT-PCR对‘云香’水仙不同时期花瓣和副冠中的NtACS1基因进行了表达分析,得到与‘云香’水仙花朵转录组数据中相同的结果:NtACS1基因在‘云香’水仙花瓣和副冠中的表达都是随着花衰老过程呈现逐渐下降的趋势,且NtACS1基因在花瓣和副冠中的表达峰值都在花苞期,表明NtACS1基因编码的蛋白是在乙烯生物合成途径的系统1发挥催化作用的ACC合成酶。成功构建了NtACS1基因的正义植物表达载体,并通过农杆菌介导法获得8株转基因烟草,PCR和RT-PCR检测显示其中有6株为阳性植株,初步证实NtACS1基因已导入烟草基因组中且在烟草中已表达。该研究结果为进一步分析NtACS1基因的功能和后续转化水仙延长其花期研究奠定了基础。
- 孙申申温秀萍杨菲颖李梦思李欢李科陈晓静
- 关键词：基因克隆延长花期ACS
- 多花水仙HDS基因cDNA全长克隆与序列分析被引量：4
- 2015年
- 以‘黄花水仙2号’和‘金盏银台’为材料,水仙各自花瓣的c DNA为模板,采用RT-PCR和RACE技术克隆出2个HDS基因,分别命名为Nt HDSY和Nt HDSJ,测序结果表明,Nt HDSY和Nt HDSJ基因全长分别为2 592 bp和2 599 bp,2个基因均含有1个2 178 bp的开放阅读框(ORF),编码745个氨基酸。同源性分析表明,黄花水仙2号与金盏银台、铁皮石斛、长春花、大豆、葡萄和苹果的相似系数分别为:97.77%、79.29%、75.29%、75.51%、75.02%和74.40%。Real-time PCR分析表明:Nt HDS基因在花瓣和副冠内的表达量在开花过程的花蕾期与盛花期存在明显差异,推测该基因可能与多花水仙香气物质的合成有关。
- 吴用何炎森李科申艳红李欢陈晓静
- ‘云香’水仙NAC基因克隆及表达分析被引量：3
- 2017年
- 从‘云香’水仙转录组文库中筛选出1条NAC基因序列,采用PCR技术克隆得到其c DNA序列。序列分析表明,该NAC基因包含822 bp的开放阅读框,编码273个氨基酸,分子量30 903.9 u,命名为Nt NAC3153(Gen Bank登录号:KU375569)。理化性质分析和多重序列比对显示,Nt NAC3153蛋白是一个无跨膜区域的亲水性蛋白,在N端具有一段保守结构域。系统进化树分析表明,Nt NAC3153与同为单子叶植物的小果野芭蕉Ma NAC、二穗短柄草Bd NAC和小米Si NAC亲缘关系最近。实时荧光定量PCR分析显示,Nt NAC3153基因能够被ABA、盐胁迫和高温诱导表达。研究表明:Nt NAC3153可能参与‘云香’水仙的抗逆调控机制。
- 李梦思赵潇俐吴用李欢李科陈晓静
- 关键词：NAC转录因子基因克隆非生物胁迫
- 云香水仙WD40基因克隆及序列分析
- 2023年
- 目的探讨云香水仙WD40基因在花色形成中的作用。方法基于前期的转录组数据,以云香水仙为材料,采用RT-PCR技术对WD40基因进行克隆,并结合Real-time PCR检测其在不同花期的表达水平。结果克隆得到1个WD40基因,命名为NtWD40,开放阅读框长为1020 bp,共编码339个氨基酸。同源性分析表明,云香水仙与拟南芥、苹果、矮牵牛及苜蓿的相似系数分别为68%、68%、68%和69%。Real-time PCR分析表明:始花期NtWD40的表达量较其他花期有明显差异。结论NtWD40可能参与云香水仙类黄酮途径相关色素的合成。
- 李欢李欢
- 关键词：基因克隆花色QRT-PCR
- 铝毒下耐铝性不同的两个柑橘品种叶片蛋白质组学研究
- 在热带、亚热带的许多酸性土壤上，铝（Al）毒已经成为限制作物生长和产量的主要因素。世界上有超过50％的潜在可耕地和约30%的陆地面积呈酸性，而且由于不当的农业措施和酸沉降，土壤酸化正日益加剧。柑橘为常绿果树，主要栽种于酸...
- 李欢
- 关键词：柑橘铝毒植物叶片蛋白质组
