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5-Aza-CdR和低氧对小鼠海马中蛋白磷酸酶-1γ表达及对学习记忆的影响被引量：5: 2015年; 通过使用去甲基化试剂5-氮-2'脱氧胞苷(5-aza-2'deoxycytidine,5-Aza-CdR)和低氧处理小鼠,从而揭示低氧和5-Aza-CdR对蛋白磷酸酶1γ(protein serine/threonine phosphatase-1γ,PP1γ)表达的影响以及对小鼠学习记忆的影响。水迷宫筛选小鼠,正常小鼠随机分为对照组和试验组2组,分别给小鼠大脑立体定位注射10g/L BSA和10μmol/L 5-Aza-CdR至右侧脑室,休息1周,水迷宫测试小鼠学习记忆能力情况,然后依次处死低氧后3、2、1、0d的小鼠。最后通过Real-time PCR检测蛋白磷酸酶1的转录水平的表达。5-Aza-CdR和低氧分别处理小鼠都会提高小鼠的学习记忆能力,抑制PP1γmRNA的转录水平,但是联合处理对小鼠的PP1γmRNA转录水平却没有影响。说明5-Aza-CdR和低氧抑制PP1γ的转录水平,促进小鼠海马区突触可塑性的形成。; 张柱霞孙明英杨洁姜树原刘友闫少春邵国; 关键词：5-AZA-CDR 低氧小鼠学习记忆

5-aza-cdR对神经细胞NG108-15细胞周期的影响被引量：1: 2015年; 目的:观察DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase,DNMT)抑制剂5-氮-2'脱氧胞苷(5-aza-2'deoxycytidine,5-aza-cdR)对神经细胞系NG108-15细胞周期的作用,并探讨相关的机制。方法:NG108-15细胞用10μmol/L 5-aza-cdR处理,RTCA分析细胞指数,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡,8-PCR检测DNMTs及细胞周期相关基因CCND1和CCND2 mRNA的表达。结果:5-aza-cdR能抑制NG108-15细胞的增殖,5-aza-cdR处理细胞后使细胞周期发生变化,同时使DNMT1的表达降低(P<0.05)而DNMT3A和DNMT3B mRNA表达不变,并且CCND1和CCND2 mRNA表达也不变。结论:10μmol/L 5-aza-cdR可以抑制NG08-15细胞的增殖,其抑制作用可能是通过降低DNMT1表达实现的,这种抑制作用不影响CCND1和CCND2的表达。; 张柱霞孙明英杨洁姜树原刘友闫少春邵国; 关键词：NG108-15细胞细胞周期

5-Aza-CdR对低氧NG108-15细胞的影响机制研究: 2016年; 通过使用DNA甲基转移酶(DNA methyltransferases,DNMTs)抑制剂5-氮-2'脱氧胞苷(5-aza-2'deoxycytidine,5-Aza-Cd R)和低氧干预神经细胞系NG108-15,旨为揭示5-Aza-Cd R、低氧、低氧预适应对NG108-15细胞增殖和细胞周期影响的相关机制。利用5-Aza-Cd R(10.0μmol/L)孵育NG108-15细胞后进行低氧与低氧预适应处理;使用倒置显微镜观察细胞形态的变化;通过RTCA分析细胞增殖指数;收集细胞后使用流式细胞仪检测各组细胞周期和细胞凋亡的变化情况;利用Real-time PCR检测甲基转移酶DNMTs和细胞周期相关基因在m RNA水平的表达变化情况。结果表明,5-Aza-Cd R和低氧抑制NG108-15细胞增殖,促进细胞早期和晚期凋亡,低氧预适应促进细胞的增殖。然而,5-Aza-Cd R处理后再低氧与低氧预适应,DNMTs和细胞相关周期基因的m RNA转录增加(P<0.05)。10.0μmol/L的5-Aza-Cd R联合低氧处理抑制细胞的增殖,低氧预适应对细胞的增殖有促进作用。; 张柱霞孙明英杨洁姜树原闫少春邵国; 关键词：NG108-15细胞低氧低氧预适应

6种人DNA甲基转移酶3B典型异构体的克隆、表达及对293A细胞增殖的影响: 2015年; 目的构建6种人DNA甲基转移酶(DNMT)3B典型的异构体的真核表达载体并对其进行过表达,初步探讨其在人胚肾细胞系293A中的生物学作用。方法以人HCT116 c DNA为模板,采用高保真PCR获得DNMT3B1和DNMT3B2的全长,并以DNMT3B2为模板,利用特异的引物扩增出DNMT3B3、DNMT3B4、DNMT3B5和DNMT3B7,将PCR产物连接到真核表达载体p CMV-2B上,并对上述载体进行Bam HⅠ、EcoRⅠ双酶切和测序鉴定,鉴定正确后,将重组质粒转染293A细胞并利用G418筛选出稳定表达的克隆株,MTT法检测细胞增殖活力。结果双酶切和测序结果表明克隆了6种人DNMT3B异构体CDS序列,经蛋白印迹检测,DNMT3B异构体在293A细胞中获得稳定表达;稳定过表达DNMT3B3、DNMT3B4和DNMT3B7可以抑制细胞增殖。结论构建了人DNMT3B异构体真核表达载体及获得了其稳定表达细胞株,DNMT3B异构体蛋白对胚肾细胞系293A的增殖有不同的作用。; 张柱霞孙明英杨洁姜树原石蕊闫少春邵国; 关键词：DNA甲基转移酶3B 异构体增殖

颤蛋白在学习记忆中的作用: 2014年; 颤蛋白(Reelin)是一种分泌型细胞外基质蛋白,Reelin在大脑的正常发育、学习记忆、突触可塑性、神经元的迁移和定位、板层结构的形成方面发挥重要的作用,本文从DNA甲基化、Reelin受体、Reelin信号通路的相关基因3个方面阐述Reelin对学习记忆的影响。; 孙明英闫少春邵国; 关键词：REELIN DNA甲基化 F-SPONDIN

Reelin及其DNA甲基化在低氧预适应小鼠学习记忆变化中作用研究: 目的：　　建立低氧预适应小鼠（in vivo）和细胞(in vitro)模型，研究低氧预适应是否通过影响DNA甲基化来影响Reelin的表达进而影响小鼠的学习记忆能力的。　　方法：　　1. 取体重18～22 g成年雄性...; 孙明英; 关键词：学习记忆低氧预适应 REELIN DNA甲基化动物实验

5-aza-cdr对低氧预适应神经细胞NG108的DNMTs表达的影响被引量：1: 2015年; 目的观察低氧预适应和DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase,DNMT)抑制剂5-氮-2'脱氧胞苷(5-aza-2'deoxycytidine,5-aza-cdR)对神经细胞系NG108-15的DNMTs表达的影响,研究DNA甲基转移酶抑制剂对重复低氧NG08-15细胞的神经保护作用的可能分子机制。方法 NG08-15细胞随机分为药物处理组(5-aza-cdR)和正常组(control),每组又分为C组(未低氧)、H组(1%低氧处理8 h)和HP组(1%低氧/21%复氧4个循环后1%低氧预处理后低氧8h)处理,5-aza-cdR的浓度为10.0μM,Q-PCR检测DNMTs mRNA的表达。结果C,H和HP的DNMT1在5-aza-cdR和control组内和组间无显著性变化;在control组中,HP较H的DNMT3A mRNA表达降低(P<0.05),HP较C的DNMT3B mRNA降低(P<0.05);5-aza-cdR组中,H较C和HP的DNMT3B mRNA降低(P<0.05);HP的DNMT3B mRNA在5-aza-cdR组和control组之间有差异(P<0.05)。结论单纯低氧预适应可以使DNMT3A和DNMT3B mRNA表达降低,5-aza-cdR+低氧预适应可以影响DNMT3BmRNA的表达。; 孙明英张柱霞杨洁姜树原王光丽张颜波邵国; 关键词：低氧预适应 NG108-15细胞 DNA甲基转移酶

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孙明英