冯丽
- 作品数:2 被引量:12H指数:2
- 供职机构:长春中医药大学吉林省人参科学研究院更多>>
- 发文基金:吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 嗜热β-葡萄糖苷酶的原核表达、纯化及其活性被引量:2
- 2014年
- 目的原核表达、纯化嗜热β-葡萄糖苷酶,并检测其活性。方法从嗜热细菌Fervidobacterium pennivorans基因组DNA中PCR扩增β-葡萄糖苷酶基因,插入原核表达载体p ET-28a中,构建重组表达质粒,转化E.coli BL21(DE3)Codon Plus,筛选阳性重组菌,IPTG诱导表达。采用镍柱亲和层析法纯化重组酶;紫外吸收法检测酶活力和底物选择性。结果 PCR退火温度为67℃时,可扩增得到单一的目的基因条带;测序结果显示,重组表达质粒中目的基因的核苷酸序列与细菌基因组中该基因序列同源性为100%,未发现终止密码子及氨基酸的改变;表达的重组酶相对分子质量约为54 000;纯化的目的蛋白纯度达95%,浓度为10 mg/L;该重组酶能够高效催化对硝基苯-β-D-葡萄糖苷(p NPG)的水解,60℃条件下的比活力达124 293.5 U/mg。结论成功在E.coli中表达了嗜热细菌Fervidobacterium pennivorans来源的具有较高催化活力和底物专一性的β-葡萄糖苷酶。
- 王馨莹冯丽许春春于珊珊
- 关键词:嗜热细菌Β-葡萄糖苷酶原核细胞酶活性
- 人参皂苷的口服吸收及体内转化被引量:10
- 2014年
- 人参中的活性成分人参皂苷具有较好的生物活性和药理作用,疗效确切,毒副作用小,应用广泛,然而其易被胃酸分解、肠内菌群代谢,且肠黏膜通透性差,导致其口服生物利用度极低。本文对人参皂苷的口服给药药代动力学特点及体内生物转化作用进行了概述,并对其未来研究方向进行了展望,为今后的研究提供新的思路。
- 李晶戴雨霖郑飞许春春冯丽王馨莹郑柏松于珊珊
- 关键词:人参皂苷口服生物利用度