刘元果
- 作品数：2 被引量：21H指数：2
- 供职机构：东南大学附属中大医院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 绿色荧光蛋白转基因大鼠骨髓间充质干细胞培养及鉴定被引量：17
- 2016年
- 目的体外分离、培养和鉴定增强型绿色荧光蛋白(EGFP)转基因大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)。方法取EGFP转基因大鼠胫、股骨骨髓,全骨髓贴壁法分离培养、纯化BMSCs;荧光显微镜观察细胞形态;流式细胞仪分析细胞表型;CCK-8法绘制细胞生长曲线并与野生型BMSCs增殖情况相比较;分别向成脂、成骨、成软骨诱导分化鉴定;将细胞经鼠尾静脉移植入大鼠体内,观察其在体内定植情况。结果获得稳定表达EGFP的BMSCs,以长梭形为主,融合后呈漩涡状排列;生长曲线示EGFP-BMSCs增殖能力旺盛,与野生型BMSCs相比差异无统计学意义(t=-0.023,P=0.982);细胞CD29、CD90、CD34、CD49d、CD45表达率分别为99.4%、96.4%、0.171%、0.049%、0.038%;成脂、成骨、成软骨诱导后,分别给予油红O、茜素红、甲苯胺蓝染色,结果均呈阳性;在肺组织内可检测到稳定的绿色荧光。结论成功获得高纯度、稳定表达EGFP的BMSCs,干细胞特性不受EGFP影响。细胞定植后,示踪效果良好,可用于后续实验研究。
- 刘慧娟胡若愚戴王娟刘元果闵波蒋犁
- 关键词：骨髓间充质干细胞绿色荧光蛋白诱导分化
- 大鼠骨髓间充质干细胞分离、培养与鉴定被引量：4
- 2015年
- 目的:建立简单、经济、高效、快捷的扩增骨髓间充质干细胞的方法。方法:利用全骨髓贴壁分离法分离、纯化大鼠的间充质干细胞,观察细胞的形态,绘制生长曲线,并采用流式细胞术检测细胞表面CD29、CD90、CD45、CD34的表达情况。采用茜素红染色法检测间充质干细胞诱导分化为成骨细胞的情况;采用油红O染色法检测间充质干细胞诱导分化为成脂肪细胞的情况。结果:间充质干细胞培养到第3代时形成漩涡状、纺锤形的形态相对均一的贴壁细胞。流式细胞术检测结果显示其表面抗原CD29、CD90阳性,CD45、CD34阴性。间充质干细胞经不同诱导剂诱导后,茜素红染色呈红色,油红O染色呈暗红色。结论:全骨髓贴壁分离法可以有效获得数量充足、生长状态良好并具有分化潜能的间充质干细胞。
- 刘元果刘志勇
- 关键词：骨髓间充质干细胞形态学分化
