目的探讨亚砷酸钠对人正常肝(L-02)细胞凋亡及Bax、Bcl-2 m RNA和蛋白表达的影响。方法将L-02肝细胞分别暴露于含0(对照)、50、100、150μmol/L亚砷酸钠的培养基中暴露24 h。采用MTT法检测L-02肝细胞的存活率,采用流式细胞术检测L-02肝细胞凋亡率,采用RT-PCR的方法检测Bax、Bcl-2 m RNA相对表达情况,采用Westernblotting方法检测L-02肝细胞中Bax、Bcl-2蛋白的表达情况。结果与对照组相比,各浓度亚砷酸钠染毒组L-02细胞的存活率均较低,凋亡率均较高,差异均有统计学意义(P<0.05);且随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,L-02细胞的存活率呈下降趋势,而凋亡率上升趋势。与对照组相比,各浓度亚砷酸钠染毒组L-02细胞中Bcl-2、Bax m RNA和蛋白的表达水平均较高,100μmol/L亚砷酸钠染毒组Bcl-2 m RNA/Bax m RNA值也较高,而150μmol/L亚砷酸钠染毒组Bcl-2 m RNA/Bax m RNA值及50、150μmol/L亚砷酸钠染毒组Bcl-2蛋白/Bax蛋白值均较低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论亚砷酸钠可抑制L-02肝细胞的生长,诱导细胞凋亡的发生;其机制可能与Bcl-2家族的激活有关。
【目的】优化竹荪菌托多糖的提取工艺,为其开发利用提供技术支持。【方法】以竹荪菌托为原料,通过单因素试验分析提取温度、提取时间、液料比、提取次数对竹荪菌托多糖提取率的影响,并在此基础上采用Box-Benhnken响应面法建立以竹荪菌托多糖提取率为响应值的二次回归数学模型。【结果】通过响应面分析建立竹荪菌托多糖提取回归方程为:Y=12.96+0.29A+0.13B+0.17C-0.13AB-0.039AC-0.014BC-0.34A2-0.27B2-0.34C2(A为提取温度,B为提取时间,C为液料比,Y为竹荪菌托多糖提取率,R2=0.9551),该模型拟合度好;并确定竹荪菌托多糖提取的影响因素顺序为:提取温度>液料比>提取时间,其中提取温度和液料比对竹荪菌托多糖提取率有极显著影响(P<0.01),提取时间有显著影响(P<0.05),但双因素交互作用对竹荪菌托多糖提取率无显著影响(P>0.05);竹荪菌托多糖最佳提取工艺条件为:在提取温度82℃、液料比62∶1 m L/g的条件下提取3.1 h、提取1次,竹荪菌托多糖提取率为13.016%,与模型预测理论值13.040%接近。【结论】采用响应面法优化竹荪菌托多糖提取工艺具有可行性,可用于实际生产。
