赵冰心
- 作品数:4 被引量:2H指数:1
- 供职机构:北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金:云南省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生农业科学化学工程更多>>
- 轮状病毒VP7抗原表位嵌合蛋白免疫学研究
- 轮状病毒(Rotavirus, RV)是引起人类、哺乳动物类、禽类病毒性腹泻的主要病原体。几乎全世界每一个儿童都被RV感染过,每年有大量儿童因为感染RV致死。由于RV所导致的高发病率及对儿童健康的严重危害,RV疫苗的使用...
- 赵冰心
- 关键词:RV
- 文献传递
- 轮状病毒VP4抗原表位在VP6载体蛋白同一位点表达比较研究被引量:1
- 2015年
- 目的:评价轮状病毒(RV)VP4两个抗原表位插入VP6载体蛋白同一位点所表达的重组嵌合蛋白免疫学性质及在研制嵌合蛋白疫苗中的意义。方法:采用分子克隆和基因重组技术将RV VP4的两个抗原表位插入到VP6载体蛋白同一位点上,构建重组抗原表达质粒,表达携带不同抗原表位的重组嵌合蛋白,用Western blot和中和试验分析重组嵌合蛋白的抗原反应性和免疫原性。结果:成功构建了两个嵌合蛋白表达质粒,并在大肠杆菌中高效表达;表达的嵌合蛋白可与相应抗体特异性反应;可诱导豚鼠产生特异性血清抗体;抗嵌合蛋白血清抗体可特异性识别载体蛋白VP6F,Wa株病毒的VP6和VP4蛋白,可中和Wa株病毒在MA104细胞上的感染性;结果表明,所构建和表达的两个以VP6为载体的VP4抗原表位嵌合蛋白具有较高抗原反应性和免疫原性;嵌合蛋白携带的VP4抗原表位具有增强载体蛋白免疫原性作用;为研制新型RV重组蛋白疫苗的奠定了较好的基础。
- 夏文跃王晶赵冰心潘小霞文喻玲陈元鼎
- 关键词:轮状病毒抗原表位免疫原性
- Ⅱ型脊灰病毒抗原表位嵌合蛋白的免疫学研究
- 2016年
- 目的:评价以轮状病毒(RV)重组VP6蛋白为载体插入Ⅱ型脊髓灰质炎病毒(PV2)VP1蛋白上的1个抗原表位构建而成的嵌合蛋白的体外免疫学性质。方法:采用分子克隆和基因重组技术将PV2抗原表位插入到RV载体蛋白上,在大肠杆菌中表达并用SDS-PAGE确认表达产物,再通过动物免疫、Western blot、免疫荧光和病毒血清抗体中和试验分析嵌合蛋白的免疫学性质。结果:成功构建了以VP6为载体的PV2抗原表位嵌合蛋白6F/PV2N1,并且在E.coli系统中高效表达,嵌合蛋白免疫的豚鼠血清抗体对RV和PV2具备较好的中和活性。结论:以RV VP6为载体构建的嵌合蛋白具有较好的免疫原性,免疫豚鼠产生血清抗体可中和RV和PV2在体外细胞上的感染;进一步为研发RV/PV2嵌合疫苗提供了较好的基础。
- 王晶夏文跃潘小霞赵冰心滕玉梅李传印杨筱舟文喻玲陈元鼎
- 关键词:轮状病毒脊灰病毒抗原表位嵌合蛋白免疫原性
- 大规模纯化脊髓灰质炎病毒的蔗糖垫层离心法的建立被引量:1
- 2015年
- 目的建立可大规模纯化脊髓灰质炎病毒(poliovirus,PV)的蔗糖垫层离心法。方法病毒大量增殖后,收集病毒液,经PEG浓缩、三氟三氯乙烷抽提后,采用蔗糖垫层或Cs Cl密度梯度离心法纯化PV(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型),电镜下观察病毒形态,进行核酸及感染性滴度的检测。将纯化的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型PV免疫豚鼠,心脏采血,分离血清,微量中和试验法检测血清中和抗体滴度。结果蔗糖垫层离心法纯化的各型PV,病毒颗粒形态典型,背景清晰,除完整的光滑型病毒颗粒外,还可见大量空心病毒颗粒样品,纯化效果较好;Cs Cl密度梯度离心法纯化的PV样品,病毒形态也较典型,但完整的病毒颗粒较多。两种纯化方法获得的病毒基因组核酸特征显著,背景清晰,无明显差异。蔗糖垫层离心法纯化的各型PV的感染性滴度及免疫后豚鼠血清中和抗体滴度均高于Cs Cl密度梯度离心法。结论蔗糖垫层离心法纯化的PV纯度高,免疫原性好,可用于大规模纯化PV或其他病毒。
- 赵冰心戴素萍潘小霞夏文跃文喻玲廖国阳陈元鼎
- 关键词:脊髓灰质炎病毒纯化