陈晓 作品数:29 被引量:117 H指数:6 供职机构: 武汉大学土木建筑工程学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖北省教育厅科学技术研究项目 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 建筑科学 生物学 农业科学 更多>>
喷昔洛韦对单纯疱疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型的抑制作用 被引量:4 2004年 目的 评估喷昔洛韦钠盐在体内外对HSV Ⅰ和HSV Ⅱ感染的抑制作用。方法 在组织培养中用CPE抑制实验测定喷昔洛韦钠盐对HSV Ⅰ和HSV Ⅱ所致vero细胞病变的抑制作用 ;在BALB/c小鼠中测定其对HSV Ⅰ感染BALB/c小鼠所致耳部皮损的治疗作用。结果 喷昔洛韦钠盐能有效抑制 10 0TCID50 HSV Ⅰ (sm44株 )和HSV Ⅱ (3 3 3株 )感染vero细胞所产生的细胞病变作用 ,半数有效剂量 (IC50 )分别为 1.95 μg/ml和 3 .90 μg/ml ;使HSV Ⅰ病毒感染性滴度下降 99%的药物浓度 (IC99)为 2 .40 μg/ml。在HSV Ⅰ (sm44)感染BALB/c小鼠中 ,喷昔洛韦钠盐大剂量组 (2 5 0mg/kg·d)、中剂量组 (10 0mg/kg·d)、小剂量组 (5 0mg/kg·d)均能明显降低HSV Ⅰ感染BALB/c小鼠所致耳部皮损作用。 结论 喷昔洛韦钠盐在体内外具有抗HSV Ⅰ和HSV Ⅱ感染的作用。 严银芳 夏洪铃 徐华 陈晓 梁风 严晓红关键词:药物治疗 抗病毒活性 一种从血清标本中快速提取HBV DNA方法的建立 被引量:15 2005年 目的:建立一种快速提取血清标本中HBVDNA的方法,即裂解液煮沸法。方法:以碱裂解法和经典的苯酚法为对照,比较3种方法提取的HBVDNA纯度和半巢式PCR后的阳性率。结果:用裂解液煮沸法提取的HBVDNA进行半巢式PCR的阳性率最高,与两种对照方法之间的差异有极显著意义(P<0.01)。结论:裂解液煮沸法是一种快速、简单、高效的提取血清中HBVDNA的方法。 郭龙华 董长垣 高婧 郭淑芳 陈晓 刘文惠关键词:乙型肝炎病毒 DNA提取 半巢式PCR 同时携带人血管内皮生长因子和血管生成素基因的内皮祖细胞血管再生研究 2007年 目的用腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)载体将人血管内皮生长因子165 (vascular endothelial growth factors,VEGF165)和血管生成素-1(angiopoietin-1,Angl)基因同时转入骨髓源性内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)中,观察外源基因的表达并评价其促血管再生的能力。方法用同时携带人VEGF165和Angl基因的AAV载体AAV2-hAngl/VEGF165转染体外培养的兔骨髓源EPCs,用RT-PCR和细胞免疫化学法检测外源基因的表达。实验用新西兰大白兔24只,制作成右下肢缺血模型,随机分成3组:PBS、EPC和EPC/AV组。造模后第10天,向缺血肌组织中分别注射PBS、EPCs和AAV2-hAngl/VEGF165转染的EPCs,用免疫组织化学法评价其血管再生效应。结果EPCs可高效地被AAV2-hAngl/VEGF165转染而表达Angl和VEGF165。细胞移植4周后,EPC/AV组存活的EPCs密度(283±137)/mm^-2明显高于EPC组(191±88)/mm^-2;EPC/AV组的毛细血管密度(856±212)/mm^-2明显高于EPC组(564±177/mm^-2)和PBS组(308±112)/mm^-2;α-SMA阳性血管密度(6.9±3.0)/mm^-2明显高于PBS组(3.6±1.8)/mm^-2,P〈0.05。结论AAV载体可同时将人VEGF165和Angl基因转入EPCs中,转染后的EPCs具有更强的促血管再生能力。 陈锋 谭最 董长垣 谢友利 吴云 陈晓 郭淑芳关键词:血管内皮生长因子类 血管生成素1 腺相关病毒 内皮祖细胞 腺相关病毒介导的血管内皮生长因子基因与内皮祖细胞联合治疗肢体缺血 被引量:3 2007年 目的探讨腺相关病毒(AAV)介导的人血管内皮生长因子165(hVEGF165)基因转染的兔骨髓内皮祖细胞(EPCs)自体移植对于移植细胞存活率和缺血肢体血管再生的影响。方法构建、制备携带hVEGF165基因或β-半乳糖苷酶(β-gal)基因的AAV载体AAV-hVEGF165和AAV-LacZ;用AAV-hVEGF165和AAV-LacZ分别转染体外培养的EPCs,得到AAV/VEGF-EPC和AAV/LacZ-EPC,用RT-PCR、免疫细胞化学、流式细胞术检测外源基因的表达。分别用AAV/VEGF-EPC、AAV/LacZ-EPC和PBS自体移植于兔右下肢缺血的肌组织,28d后行双侧肢体血流和免疫组织化学检测。结果AAV/VEGF-EPC和AAV/LacZ-EPC内可检测到外源基因的表达。AAV/VEGF-EPC、AAV/LacZ-EPC和PBS组患/健侧血流比值、毛细血管密度分别为0.73±0.21、0.64±0.13、0.45±0.10;(962±291)、(557±132)、(361±69)/mm^2。AAV/VEGF-EPC和AAV/LacZ-EPC组移植成活的EPCs密度分别为(330±81)/mm^2和(204±55)/mm^2。结论AAV能够高效将外源基因转入EPCs,对其进行基因修饰。自体移植从V-hVEGF165酤转染的EPCs可提高其移植存活率和增强其促进缺血肢体血管再生能力。 陈锋 谭最 董长垣 陈晓 郭淑芳关键词:腺相关病毒 内皮细胞 血管内皮生长因子 缺血 体外诱导兔骨髓单个核细胞向血管内皮细胞分化的研究 被引量:5 2005年 目的 :研究体外培养兔骨髓单个核细胞 (bonemarrowmononuclearcells,BM MNCs)诱导分化为内皮系细胞。方法 :穿刺抽取兔骨髓 ,经密度梯度离心与免疫磁珠法富集的BM MNCs ,于内皮细胞条件培养基 (endothelialgrowthmedium ,EGM )中培养 2月 ,观察细胞的贴壁情况、形态变化及其血管内皮细胞特异性标志的表达。 结果 :培养第 3d开始出现梭形贴壁细胞 ,约第 7d出现团状聚集细胞集落 ;第 7~ 10d的贴壁细胞表达vWF、CD31,摄取acLDL ,分泌NO。贴壁细胞传代培养 10代后接近融合 ,细胞扩增了约 10 0 0倍。结论 :在一定条件下 ,体外培养BM MNCs可增殖诱导分化得到内皮系细胞。 艾鹏 谭最 董长垣 陈晓关键词:骨髓单个核细胞 内皮细胞 分化 体外培养 蓝舌病毒HbC株与不同种系细胞相互作用及群特异性抗原特征 被引量:7 2002年 BTV HbC株和蓝舌病毒标准株BTV 10分别接种在不同种系细胞如猴肾传代细胞 (Vero)、人宫颈癌细胞(Hela)和小鼠神经胶质瘤细胞 (C6)等细胞株上 ,比较研究了BTV HbC在不同种系细胞上的增殖特征 ,BTV HbC与BTV 10在相同细胞上的复制增殖特征 ,病毒与细胞相互作用的显微和超微结构特征。用免疫交叉反应研究了BTV HbC株与BTV 10型标准株之间的血清学关系。本研究结合本室对BTV HbC株基因组图谱分析和蓝舌病毒群特异性抗原编码基因S7的RT PCR分析 ,进一步证实了BTV 唐省三 董长垣 郭淑芳 陈晓 陈冬娥 桂亦瑞 芦莉莉 罗翔关键词:种系 细胞 相互作用 血清学特征 育龄妇女和母婴巨细胞病毒感染的流行病学调查 被引量:7 2002年 我们应用ELISA技术和PCR技术对武汉市地区1051名育龄妇女和1 9 5对母婴的巨细胞病毒感染进行了血清流行病学调查。结果表明:1246名受检妇女CMV IgM和 IgG抗体阳性率分别为3.6%和82.2%。195对母婴有20名产妇尿中CMV-DNA阳性,所生子女中 有3名尿中CMV-DNA阳性,相关率为15%。受检妇女中98名有不良孕产史,其CMV IgM和IgG抗 体阳性率与无不良孕产史妇女比较均有显著性差异(p<0.01)。 严银芳 陈晓 杨小清 况二胜 祝兵 董长垣关键词:巨细胞病毒 流行病学调查 育龄妇女 母婴感染 巨细胞病毒感染致MRC_(-5)细胞周期及Cyclin E表达的变化 2003年 本文研究了巨细胞病毒感染人二倍体细胞MRC_(-5)后诱导产生高水平Cyclin E,Cyclin E/cdk_2激酶活性增加和导致细胞周期阻滞。应用流式细胞仪分析表明10PFU/cell的病毒量感染MRC_(-5)细胞72h后,29%细胞位于s期,69%细胞位于G_2/M期,只有2%细胞位于G_1/G_0期。应用双抗夹心ELISA法检测,感染病毒20h后,MRC_(-5)细胞中Cyclin E含量比对照细胞高出8倍。感染细胞中CyclinE/cdk_2激酶活性基本上与CyclinE含量相关联。 严银芳 陈晓 闫远芳 严晓红关键词:巨细胞病毒 细胞周期 CYCLINE 武汉地区妊娠和育龄妇女抗ToRCH-IgM分析 被引量:6 2002年 目的 调查武汉地区妊娠妇女和育龄妇女 To RCH - Ig M抗体水平。方法 用酶联免疫吸附技术 (EL ISA)检测 86 7例妊娠妇女和 2 95例育龄妇女血清中 To Rc H- Ig M并对结果进行统计学分析。结果 妊娠妇女 To X、Ru V、CMV、HSVl 和 HSV2 Ig M抗体阳性率分别为 3.0 %、6 .1%、3.8%、2 .6 %和 1.2 % ,育龄妇女的分别为 2 .8%、1.0 %、3.0 %、0 .6 8%和 0 .6 8%。妊娠妇女 Ru V-Ig M阳性率显著高于育龄妇女 Ru V - Ig M阳性率 (P <0 .0 1)。有异常孕产史妇女 To X- Ig M阳性率为 11.4 % ,明显高于无异常孕产史妇女 To X- Ig M阳性率 2 .3% (P <0 .0 5 )。妊娠妇女中农民组Ru V - Ig M阳性率为 1.2 % ,明显低于服务行业组 (8.2 % ,P <0 .0 5 )。结论 武汉地区妊娠妇女To RCH- Ig M抗体水平高于育龄妇女 。 严银芳 陈晓 杨小清 董长垣 夏辉璐 刘杨关键词:巨细胞病毒感染 免疫学 血清学 统计学 RT-PCR检测蓝舌病毒技术的建立 被引量:3 2001年 Using primers complementary to the conserved sequence previously published of BTV genomic dsRNA segment 7,a part of the 5′end of segment 7 was synthesized and amplified by RT PCR method.We adapted this method to test on 12 blood samples suspected to be with BTV and the blood sample of a health sheep as a negative control.The results suggested that eleven of the twelve samples were positive,one was negative.In order to compare the sensitivity and reliability of RT PCR technique,Vero cells were used to isolate BTV from these suspected samples and the results will be a control.The study proved that RT PCR is a rapid,sensitive and precise method for detection and identification of bluetongue virus in clinical samples,animal quarantine and scientific research. 张芃玮 董长垣 涂攀 郭淑芳 陈晓 严银芳关键词:蓝舌病毒 DSRNA RT-PCR 病毒核酸检测