刘艳敏
- 作品数：4 被引量：11H指数：1
- 供职机构：汕头大学医学院细胞生物学与遗传学教研室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 腺苷酸活化蛋白激酶在维甲酸衍生物CD437介导细胞凋亡中的作用被引量：1
- 2015年
- 目的 观察腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）在肿瘤细胞凋亡过程中的作用,研究其分子机制及其对肿瘤临床治疗的意义.方法 HeLa-S3细胞分别设6组：0.1％ DMSO对照组、5μmol/L CD437处理组、CD437＋Compound C处理组、CD437＋AICAR处理组、AMPK抑制剂Compound C处理组、AMPK激活剂AICAR处理组.采用流式细胞术检测各组细胞凋亡发生率;通过Western blot检测AMPK的Thr-172位点的磷酸化以及细胞凋亡的标志蛋白Caspase-3的激活,结合流式细胞术凋亡检测结果分析细胞内AMPK活性变化与凋亡的关系;通过在LKB1表达缺失的HeLa-S3细胞内再表达野生型LKB1,观察其在CD437诱导细胞凋亡过程中的作用.结果 流式细胞术检测显示5μmol/L CD437诱导8h可引起（87.42±5.95）％的HeLa-S3细胞凋亡.AICAR可降低CD437的凋亡诱导作用[（51.04±8.26）％,P＜ 0.05],而Compound C可提高CD437诱导的HeLa-S3细胞的凋亡率[（86.42±5.95）％].在细胞内重新表达LKB1则会抑制AICAR对CD437的凋亡抵抗作用.结论 内源性AMPK激活对HeLa-S3细胞具有保护作用,此作用可被细胞内的抑癌基因LKB1的再表达所抑制.
- 梁斌宋旭红袁松刘艳敏
- 关键词：肿瘤细胞AMPK凋亡
- AMPK活性对HeLa细胞内质网功能稳态的影响被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)对He La细胞内质网应激的影响。方法:试验分为对照组(1‰DMSO)、内质网应激诱导组(2μg/m L衣霉素或500 nmol/L MG132内质网应激诱导剂诱导)和内质网应激干预组[衣霉素或MG132+2 mmol/L AMPK激动剂5-氨基咪唑-4-甲酰胺-1-B-呋喃核糖苷(AICAR)干预组、衣霉素或MG132+2 mmol/L AMPK激动剂二甲双胍干预组以及衣霉素或MG132+0.5 mmol/L AMPK抑制剂Compound C干预组],以探究各处理组中AMPK活性状态对内质网应激的影响。收集对数生长期的He La细胞,分组诱导孵育后,用Western blot检测He La细胞AMPK/T-172磷酸化水平及内质网应激标志蛋白(p-elf2α、Grp78和XBP-2+2+1s)的表达,并采用细胞内钙集群检测分析(Indo-1 ratiometric Ca analysis)检测各组He La细胞内Ca浓度的变化。结果:衣霉素和MG132可诱导内质网应激标志蛋白p-elf2α、Grp78和XBP-1s的表达。AMPK激动剂AICAR和二甲双胍干预可降低上述3种内质网应2+激标志蛋白的表达,并降低细胞胞浆内因内质网应激导致的Ca浓度升高,与对照组比较,差异均有统计学意义(P均<0.05)。AMPK抑制剂Compound C的干预对上述内质网应激标志蛋白的表达无明显影响(P均>0.05)。结论:AMPK激活能缓解He La细胞中的内质网应激,维持细胞内质网的功能稳态,可能对提高肿瘤细胞的应激耐受能力起到主要作用。
- 梁斌袁松刘艳敏宋旭红
- 关键词：腺苷酸活化蛋白激酶内质网应激
- 二甲双胍对糖尿病小鼠血管内皮细胞氧化应激的影响被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨二甲双胍对糖尿病模型小鼠血管内皮细胞中氧化应激的影响。方法:雄性小鼠(30只)随机分为正常对照组(枸椽酸钠缓冲液注射)、糖尿病模型组(链脲菌素注射)和二甲双胍模型组(链脲菌素注射+二甲双胍口服),每组10只。链脲菌素(80 mg·kg-1·d-1)诱导造模成功后二甲双胍模型组予二甲双胍(50 mg·kg-1·d-1),正常对照和糖尿病模型组正常饮水,定期称重,并检测各阶段血糖。1周后处死小鼠,取股直肌免疫组化染色,观察毛细血管内皮细胞氧化应激状态。结果:与糖尿病模型组比,二甲双胍模型组血糖降低,体质量增加(P<0.05)。免疫组化染色示小鼠肌间隙毛细血管内皮细胞氧化应激标志物水平均明显降低。结论:二甲双胍可缓解血管内皮细胞氧化应激,对糖尿病血管并发症的发生具有预防作用。
- 梁斌袁松刘艳敏宋旭红
- 关键词：二甲双胍糖尿病内皮细胞氧化应激
- 二甲双胍激活AMPK对高糖诱发内皮细胞氧化应激的影响被引量：8
- 2015年
- 目的探讨二甲双胍激活AMPK对高糖诱发的血管内皮细胞氧化应激过程的影响。方法高糖培养诱导人主动脉内皮细胞HAEC氧化应激,用AMPK激动剂5-氨基咪唑-4-甲酰胺-1-B-呋喃核糖苷(AICAR,2 mmol/L)和二甲双胍(metformin,2mmol/L)进行干预,分别用Western blot和免疫荧光检测内皮细胞AMPK/T-172磷酸化蛋白表达水平及细胞内氧化应激相关蛋白p47phox和p67phox的表达。雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(NC,n=10)、链脲菌素诱导糖尿病模型组(DM,n=10)和二甲双胍干预糖尿病模型组(MT,n=10),造模成功后MT组经饮水给予二甲双胍50mg/(kg/d),NC组、DM组给予正常饮水。期间定期测定小鼠体重,并检测各阶段血糖。二甲双胍干预一周后处死小鼠,取主动脉做免疫组化观察血管内皮细胞的氧化应激状态。结果在内皮细胞中二甲双胍可通过激活AMPK来抑制NADPH氧化酶胞质内亚基p47phox和p67phox的表达。动物实验显示,与糖尿病模型组小鼠相比,二甲双胍干预组小鼠血糖降低,体重增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫组化分析显示,小鼠主动脉血管内皮细胞的氧化应激标志性产物3-NT(3-nitrotyrosine),MDA(malondialdehyde)和HNE(4-hydroxy-2-nonenal)的水平均明显降低。结论二甲双胍可通过激活AMPK来缓解内皮细胞中出现的氧化应激,可能对糖尿病血管并发症具有预防和治疗作用。
- 梁斌袁松刘艳敏宋旭红
- 关键词：二甲双胍氧化应激糖尿病内皮细胞AMPK
