刘帅 作品数:10 被引量:64 H指数:5 供职机构: 齐齐哈尔大学生命科学与农林学院 更多>> 发文基金: 黑龙江省高校科技创新团队建设计划项目 黑龙江省大学生创新创业训练计划项目 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 环境科学与工程 更多>>
一株DMP降解菌的分离鉴定及特性研究 被引量:5 2018年 为分离邻苯二甲酸二甲酯(DMP)降解菌,本研究以长期覆盖塑料废弃物垃圾场的土壤为试材,采用选择性培养基筛选降解DMP的菌株,并研究其降解和生长特性。结果表明,分离获得了一株能降解DMP的菌株QD15-1,根据其菌落的形态特征、生理生化试验及16S rDNA碱基序列同源性分析,鉴定QD15-1为Paracoccus sp.,革兰氏阴性。底物利用试验表明,菌株QD15-1具有降解多种邻苯二甲酸酯(PAEs)的能力;以DMP为唯一碳源,菌株QD15-1生长的最佳条件为pH 8,温度30℃;动力学试验表明,降解DMP过程符合一级动力学方程,随着DMP初始浓度的增加,半衰期缩短;该菌株中含有降解PAEs的基因——邻苯二甲酸双加氧酶基因(PApht Ab)和3,4-二羟基-3,4-二氢邻苯二甲酸脱氢酶基因(PApht B)。液相质谱试验表明,降解的中间产物有邻苯二甲酸单酯、邻苯二甲酸,推测其降解DMP的途径为:将DMP降解成邻苯二甲酸单酯,再分解成邻苯二甲酸(PA),通过PApht Ab和PApht B的作用进一步降解。综上所述,QD15-1是一株高效降解DMP的菌株,在修复DMP污染方面有一定的应用前景。 徐伟慧 刘帅 王志刚关键词:邻苯二甲酸二甲酯 RDNA 降解动力学 降解基因 大豆根际高效自生固氮菌分离鉴定与特性研究 被引量:8 2015年 采用无氮培养基,从大豆根际土壤中分离获得4株具有固氮能力的菌株:LS01、LS04、LS05和LS06。根据菌落的形态特征及16S r DNA序列比对分析,结果表明:LS01属于Microbacterium sp.,LS04属于Streptomyces sp.,LS05属于Micromonospora sp.,LS06属于Sarocladium sp.,在无氮液体培养基中培养64 h生物量均达到最大且能够分泌吲哚乙酸(IAA)。利用乙炔还原法对4种菌的固氮酶活性进行测定,固氮酶活测定结果表明4种菌均具有较高的固氮酶活性。因此,Microbacterium sp.LS01,Streptomyces sp.LS04,Micromonospora sp.LS05和Sarocladium sp.LS06具有一定的固氮能力并能分泌IAA,在制备大豆生物菌肥方面具有较好的应用前景。 王超群 刘帅 王晓璐 陈慧文 吴勇军 王志刚关键词:大豆 自生固氮菌 固氮酶活性 乙炔还原法 吲哚乙酸 黑土典型细菌生长和氧化应激酶对邻苯二甲酸二丁酯的响应 土壤微生物是土壤生态系统的重要组成成分,可参与土壤的物质循环,优化土壤生态功能,也是评价土壤健康的重要指标.在群体水平上研究发现,PAEs类污染可抑制黑土微生物的呼吸速率与微生物代谢熵,DBP污染会改变黑土功能微生物的丰... 胡影 王志刚 徐伟慧 胡云龙 刘帅 由义敏 赵晓松 苏云鹏关键词:细菌生长 邻苯二甲酸二丁酯 生理响应 一株溶磷菌的分离鉴定及对西瓜根系的促生效应 被引量:11 2015年 溶磷菌具有提高土壤中磷元素的植物利用率,促进植物生长的作用。利用选择性培养基,在植物根际分离纯化溶磷菌并鉴定,进一步研究了它们对西瓜幼苗根系的影响。结果表明,在获得的7株具有溶磷能力的菌株中,菌株HYL01具有较强的溶磷能力,经鉴定属于Pantoea ananatis,溶解Ca3(PO4)3的有效量为140.26 mg·L^-1,溶磷量与p H值相关性为-0.743,菌剂施用后,处理组比对照组西瓜幼苗的总根长、根表面积、根体积和比根长的增加量分别为44.38%,7.58%,63.65%和16.32%,并且显著增加了根系直径为0-0.5 mm范围内的西瓜幼苗根长所占的比例。因此,新分离鉴定的Pantoea ananatis HYL01号菌株具有较高的溶解无机磷的能力,对西瓜幼苗根系生长具有促进作用,能有效提升细根所占比例,具有制备复合微生物菌肥的潜力。 王志刚 胡云龙 徐伟慧 胡影 刘帅 张颖 王春龙关键词:溶磷菌 西瓜 根系 促生效应 黑土微生物量和酶活性对邻苯二甲酸二丁酯污染的响应 被引量:5 2015年 邻苯二甲酸二丁酯(di-n-butyl phthalate,DBP)是一种在环境中广泛存在的有毒有机化合物,已被我国列为优先控制污染物之一。本研究探讨了不同浓度的DBP污染对黑土呼吸、微生物量以及黑土酶活性的影响。结果表明,DBP污染处理的黑土呼吸速率和微生物量碳较对照均显著增加;微生物氮在DBP污染过程中呈"降低-升高-降低"波动性变化;微生物磷与DBP污染浓度呈显著负相关;DBP对黑土多酚氧化酶表现为先促进后抑制,对转化酶和蛋白酶活性表现为低浓度促进而高浓度抑制;在DBP污染过程中脲酶呈现被激活状态;黑土过氧化氢酶和酸性磷酸酶均受到DBP污染的显著抑制。通过相关性分析发现,土壤微生物量、土壤酶活性与DBP污染浓度之间存在着高度的相关性。由此可推断,DBP污染改变了黑土呼吸、微生物量和酶学活性的代谢特征,进而有可能影响了黑土的生态系统功能,威胁到黑土的可持续利用。 王志刚 赵晓松 徐伟慧 苏云鹏 由义敏 刘帅 胡影 胡云龙 张颖关键词:微生物量 土壤酶 黑土 污染 一株黑土生境中DMP降解菌的分离鉴定和降解条件研究 被引量:4 2015年 邻苯二甲酸二甲酯(DMP)作为一种在环境中广泛存在的有毒化合物,已被中国列为优先控制污染物。采用无机盐培养基从长期覆盖农膜的黑土中分离鉴定了一株能够以DMP为碳源的菌株QD-9-10,根据菌落的形态特征及16S r DNA碱基序列同源性分析,鉴定QD-9-10为Bacillus sp.。正交实验结果表明,菌株QD-9-10的最优降解条件为p H 8.0,温度35.0℃,摇床转速124.0 r·min-1,DMP初始浓度100.4 mg·L-1,在32 h时内可将DMP完全降解。底物利用能力测试表明,菌种QD-9-10具有可降解多种邻苯二甲酸酯(PAE)的能力。由此可见,Bacillus sp.QD-9-10在修复PAEs污染环境方面有一定应用前景。 刘帅 王志刚 胡云龙 胡影 张颖关键词:黑土 降解菌 硅酸盐细菌的分离鉴定及其对西瓜的促生效应 被引量:6 2015年 为研究硅酸盐细菌对植物的促生效应,分离鉴定了1株硅酸盐细菌,通过盆栽试验,研究其对西瓜的促生效应。结果表明:硅酸盐细菌WZW03属于Plantibacter sp.,在硅酸盐液体培养基中培养96 h生物量达到最大,最高释放钾离子浓度为1.41 mg·L^-1。在灭菌的连作土中,分别施用30 mL浓度为OD600=0.5和OD600=1的WZW03菌悬液的西瓜植株,与对照相比,地下部分干重分别提高了18.6%和28.0%;根系长度分别提高了62.2%和34.8%;根尖数分别提高了39.0%和32.9%;根系直径在0-0.5 mm范围内根长所占总根长的比例分别提高了59.7%和55.0%。在未灭菌的连作土中,分别施用30 mL浓度为OD600=0.5和OD600=1的WZW03菌悬液的西瓜植株,与对照相比,地下部鲜重分别提高了22.0%和90.9%,地下部分干重分别提高了99.3%和215.9%,株高分别提高了41.0%和12.1%,根系长度分别提高了111.8%和33.6%,根体积分别提高了200.0%和52.9%,根系直径在0-0.5 mm范围内根长所占总根长的比例分别提高了23.6%和16.4%。可见硅酸盐细菌Plantibacter sp.具有分解、吸收钾离子的能力,对西瓜植株具有明显的促生效应。本研究表明此菌株在制备生物菌肥方面具有较好的应用前景,并为生物肥料的开发与应用提供了菌株资源和理论基础。 王志刚 刘帅 徐伟慧 王姊威 王瑞奇 胡影 胡云龙 王超群关键词:微生物肥料 硅酸盐细菌 西瓜 促生效应 两种典型细菌的生长和氧化应激酶对邻苯二甲酸二丁酯的响应 被引量:3 2016年 邻苯二甲酸二丁酯(Di-n-butyl phthalate,DBP)是一种广泛存在于环境中的有机污染物,对环境构成严重威胁,现已被中国环境监测中心列入优先控制污染物名单。本研究从黑土中分离出两种典型细菌B.subtilis D13和E.coli Q5,以液体培养法接种于添加不同质量浓度(0、5、10、20、40、80 mg·L^(-1))DBP的LB培养基中,测定两种菌株的生长曲线;以分光光度法测定其氧化应激酶系对DBP胁迫的应答反应。结果表明,(1)DBP污染可抑制细菌生长,在对数生长期抑制作用显著,但随着污染时间的延长,B.subtilis D13菌株生长量呈恢复趋势,抑制作用减缓;DBP污染对E.coli Q5的抑制作用更为显著,且菌株生长未出现恢复趋势。(2)经DBP培养,6 h时两种菌株的抗氧化应激酶对污染出现应答反应,SOD活性随着污染物浓度的升高而增加。(3)两种细菌的CAT、GST活性与SOD活性的变化趋势基本一致,酶活呈现DBP低浓度诱导而高浓度抑制的趋势。实验结果可为进一步研究DBP对微生物的生态毒理效应提供理论基础。 胡影 王志刚 徐伟慧 胡云龙 刘帅 由义敏 赵晓松 苏云鹏黑土微生物丰度和多样性对邻苯二甲酸二丁酯污染的响应 被引量:7 2015年 邻苯二甲酸二丁酯(Di-n-butyl phthalate,DBP)是一种在环境中广泛存在的有机污染物,已被中国环境检测中心和美国环保署列为优先控制污染物。该研究探讨了黑土微生物丰度和多样性对不同浓度DBP(0、5、10、20和40 mg·kg^(-1))污染的响应。研究结果基本表明,黑土中的细菌、真菌和放线菌的生长(数量)对DBP污染均表现为被抑制效应,且在污染初期抑制效应与DBP浓度呈正相关,随着培养时间的增加有减缓的趋势,但在短期(25 d)内并未完全消除。为了确证这一结果,选择了4种有代表性的微生物,做了进一步的研究。结果同样表明自生固氮菌、亚硝酸氧化菌和磷细菌的生长均受到DBP污染的抑制,且抑制效应与DBP污染浓度呈显著性正相关(P=0.05);但是铁细菌的生长(数量)却受到了DBP污染的促进,且增幅与DBP污染浓度呈现正相关。采用RAPD方法研究表明,黑土微生物的丰富度和Shannon-Weanier多样性受到DBP污染的抑制,且10、20和40 mg·kg^(-1)的污染浓度处理的抑制效应在25 d内并未完全消除。因此,可以得出结论:DBP污染改变了黑土微生物区系结构和功能代谢菌群数量,降低了黑土微生物的多样性与丰度,从而有可能影响黑土的生态系统功能,威胁黑土的可持续利用。 王志刚 由义敏 徐伟慧 苏云鹏 胡影 刘帅 胡云龙 赵晓松关键词:黑土 微生物区系 微生物多样性