时春风
- 作品数：3 被引量：3H指数：2
- 供职机构：辽宁师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家海洋公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 野生型rLj-RGD3基因重组突变体rLj-112分子克隆及对HeLa细胞活性影响被引量：3
- 2016年
- 为研究突变体r Lj-112蛋白的抗肿瘤活性,人工合成七鳃鳗野生型r Lj-RGD3蛋白和突变型r Lj-112蛋白,通过比较两种蛋白质的抗增殖、迁移和促凋亡的活性,确定突变体r Lj-112蛋白的生物学意义及地位。采用MTT方法检测不同浓度的r Lj-112蛋白对He La细胞增殖的抑制作用。结果表明,r Lj-112蛋白能显著抑制He La细胞的增殖,且IC50为4.3μmol/L。使用Transwell细胞培养板对b FGF诱导的He La细胞迁移实验表明,r Lj-112蛋白能抑制He La细胞的迁移。r Lj-112蛋白作用后,He La细胞经Hoechst33258和Annexin V-FITC染色结果显示,细胞均凋亡。流式细胞仪进一步证明,r Lj-112蛋白能诱导He La细胞发生凋亡,且呈剂量依赖性。由此可见,与野生型r Lj-RGD3蛋白比较,突变型r Lj-112蛋白有较高的细胞毒性作用,具有抗肿瘤的功能,有望应用于抗肿瘤基因工程药物的开发,具有重要的生物学意义。
- 白娟时春风柳云恩吕士红李庆伟王继红
- 关键词：基因合成
- 重组肽rLj-RGD4对小鼠黑色素瘤B16细胞活性的影响
- 2017年
- 该研究在前期重组日本七鳃鳗RGD3毒素蛋白(recombinant Lampetra japonica RGD3,rLj-RGD3)工作基础上,设计并人工合成分子克隆,获得去纯化标签的rLj-RGD4。该论文采用小鼠黑色素瘤(B16)为肿瘤细胞模型,对rLj-RGD4是否抑制B16细胞增殖、迁移、浸润与凋亡进行了研究。研究结果表明,采用不同浓度的rLj-RGD4经MTT方法检测发现,rLj-RGD4对B16细胞的增殖有抑制作用,IC50为9.6μmol/L;使用Transwell法和细胞划痕实验结果证实,rLj-RGD4对B16细胞的迁移和浸润都具有抑制作用,且呈剂量依赖方式;B16细胞经鬼笔环肽-FITC染色结果显示,rLj-RGD4肽对B16细胞骨架发生破坏;Hoechst 33258法和TUNEL-FITC法结果显示,rLj-RGD4可诱导B16细胞发生凋亡;运用Western blot对其诱导B16细胞发生凋亡的作用机制研究结果显示,随着rLj-RGD4浓度的增加cleaved-caspase-8和cleaved-caspase-3的水平显著增加,B淋巴细胞瘤-2(B cell lymphoma/leukaemia-2,Bcl-2)基因水平量显著减少。由此可见,rLj-RGD4具有显著促B16细胞凋亡的作用,具有抑制增殖与侵袭的功能,有可能成为一个具有抗肿瘤作用的候选药物。
- 王一迪时春风勾萌宁淑香王继红
- 关键词：抗肿瘤B16
- 七鳃鳗口腔腺重组蛋白rLj-RGD3对人肝癌HepG2细胞活性的影响被引量：2
- 2015年
- 七鳃鳗口腔腺含有RGD功能基因,为了确认其表达蛋白在抑制肿瘤方面的功能,在前期获得带有组氨酸标签的分子量为14.5kD的基因重组蛋白rLj-RGD3基础上,研究了不同浓度rLj-RGD3对HepG2细胞的增殖、凋亡、黏附、迁移、侵润的影响.结果显示:rLj-RGD3能显著抑制HepG2细胞的增殖,IC50为3.8μmol/L,诱导HepG2细胞发生凋亡,有效抑制HepG2细胞黏附玻蛋白(VN),抑制HepG2细胞的迁移,且抑制率达58%,明显抑制以bFGF为趋化剂的HepG2细胞穿透Matrigel的侵润行为.以上研究表明,rLj-RGD3具有典型的RGD毒素蛋白抑制肿瘤细胞的功能,能够应用于抗肿瘤基因工程药物开发,具有重要的应用意义.
- 张丕桥时春风金阳王继红李庆伟
- 关键词：七鳃鳗RGD整合素
